Глава 3. Универсальные патогенетические механизмы развития хп • 125

о тметить, что Reg-бе­лок — это еще одно название, предложен­ное для литостатина и характеризующее его в качестве продукта Reg-гена. Этот ген был впервые обнару­жен в регенерирую­щей печени и регене­рирующих островках ПЖ, не эквивалент­ных нормальным тка­ням [233]. Функция Reg-белка полностью не выяснена; считает­ся, что он может сти­мулировать регенера­цию и/или рост пан­креатических (3-кле-ток [60].

Исторические об­стоятельства открытия белков в панкреатиче­ских конкрементах повлияли на исследо­вание их свойств. Бо­лее ранние работы были посвящены ал­когольному кальци-фицирующему ХП. Н. Sarles и соавт. [213] предположили, что литостатин способен

в этом случае предотвращать внутрипанкреатическое камнеобразование, блокируя кристаллизацию кальция и «рост» конкрементов в протоках ПЖ.

Однако эта точка зрения со временем была оспорена, и специфика функциональной роли литостатина в предотвращении камнеобразования теперь подвергается сомнению [67, 90]. Существуют данные, что литоста­тин может даже способствовать выделению мелких кристаллов, легко вы­мываемых потоком панкреатического сока [114]. В дальнейшем были про­анализированы различные аспекты этих противоречий: гипотетические функции литостатина (предотвращение осаждения карбоната кальция и ингибирование нуклеации и роста конкрементов в растворе) и возможное патогенетическое значение белка в развитии ХП.

3.1.4.2. Функции литостатина

Ингибирование образования кальциевых камней. J. P. Bernard и соавт. [62] предположили, что ингибирующая функция литостатина реализуется N-терминальным андекапептидом. Однако концентрация, в которой про­являет свою активность N-терминальный пептид или его синтетический

126 • Хронический панкреатит

а налог, до сих пор не выяснена. J. P. Bernard и соавт. [62] наблюдали ин-гибирующий эффект различных концентраций как естественных, так и синтетических пептидов (1,2—5,9 и 3,0—9,0 мкмоль/л соответственно), ин-гибирующему действию литостатина S2-5 проявляет такую же активность (0,6—5,9 мкмоль/л). В то же время D. Bimmler и соавт. [67] наблюдали от­сутствие какого-либо эффекта синтетического пептида даже при концен­трации 243 мкмоль/л (тест на нуклеацию) или 81 мкмоль/л (тест на кри­сталлический рост). В другом исследовании [90] синтетический пептид был активен только при концентрации более 80 мкмоль/л. По данным S. Geider и соавт. [114], концентрация пептида должна была достигать 500 мкмоль/л, чтобы вызвать предотвращение кристаллообразования.

Противоречивость полученных данных вызвала оживленную дискуссию исследователей. D. Bimmler и соавт. [67] заявили, что различие между собственными данными и результатами J. P. Bernard и соавт. [62] может быть связано с дефектами дизайна исследования. Согласно мнению S. Gei­der и соавт. [114], размер андекапептида намного меньше, чем литостатина S2-5. Следовательно, для достижения активной концентрации и реализа­ции его ингибирующего эффекта требуется большее количество молекул андекапептида (приблизительно в 100 раз больше), чем литостатина S2-5.

Было высказано мнение, что известный ингибирующий эффект лито­статина был фактически реализован из-за присутствия высокой концен­трации буфера Триса [90]. Действительно, в исследованиях М. de Reggi и соавт. буфер Триса при концентрации 1 ммоль/л полностью ингибировал формирование кристаллов из ионов Са²⁺. Поэтому ингибирование кри­сталлообразования кальция литостатином могло быть «побочным эффек­том» типовой подготовки эксперимента. В дальнейшем было подтвержде­но, что низкие концентрации буфера Триса действительно ингибируют нуклеацию кальция и кристаллический рост, в соответствии с ингибирую-щими кривыми, первоначально приписанными литостатину [190].

По данным D. Bimmler и соавт. [67], рекомбинантный литостатин кры­сы обладал ингибирующей активностью в отношении осаждения кристал­лов кальция. Однако при тех же самых условиях бычий трипсиноген и че­ловеческий сывороточный альбумин также вызывал ингибирование выпа­дения кристаллов кальция, сопоставимое с таковым у литостатина. Кроме того, было показано, что NaCl, фосфаты и, в некоторой степени, трипси­ноген и химотрипсиноген ингибируют рост кристаллов кальция [90]. L. Addadi и S. Weiner [54] также сообщили о существовании неспецифиче­ской функции ингибирования выпадения кристаллов кальция различными белками при концентрациях выше 0,5 мг/мл, как это было показано для литостатина.

Еще более интересным является эффект, выявленный S. Geider и соавт. [114], когда литостатин S2-5, напротив, потенцировал нуклеацию кристал­лов кальция. По данным авторов, литостатин способствовал образованию множества микрокристаллов, не имеющих патологического значения, ко­торые легко вымываилсь из протоковой системы ПЖ током панкреатиче­ского секрета.

Таким образом, биологические функции, первоначально приписанные литостатину, в настоящее время весьма дискутабельны.

В настоящее время существует несколько гипотез механизмов действия литостатина.

Гипотеза I. Литостатин связывает кальций. В экспериментах, выполнен­ных с помощью литостатина, меченного радиоактивным ⁴⁵Са, было опре­делено, что литостатин С имеет четыре эквивалентных и независимых