Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
MU_po_laboratornomu_kontrolyu_kachestva_produkt...docx
Скачиваний:
38
Добавлен:
09.11.2019
Размер:
841.43 Кб
Скачать

8.1.2. Определение массовой доли редуцирующих

сахаров и сахарозы

Определение массовой доли сахаров в меде проводят по ГОСТ 19792.

8.1.3. Определение диастазного числа

Диастазное число характеризует активность амилолитических ферментов меда.

Метод основан на колориметрическом определении количества субстрата, расщепленного в условиях проведения ферментативной реакции, и последующем вычислении диастазного числа.

Диастазное число выражают количеством кубических сантиметров раствора крахмала массовой долей 1%, которое разлагается за 1 ч амилолитическими ферментами, содержащимися в 1 г безводного вещества меда. 1 куб.см раствора крахмала соответствует 1 единице активности.

Аппаратура, материалы, реактивы. Фотоэлектроколориметр; рН-метр; электрод измерительный стеклянный; баня-термостат водяная на 20 и 40 град. C; пробирки стеклянные диаметром 20 мм и высотой 200 мм; бюретка вместимостью 25 куб.см с ценой деления 0,1 куб.см; пипетки вместимостью 1,2 и 5 куб.см; колбы мерные вместимостью 50 куб.см; секундомер; крахмал растворимый для йодометрии, раствор массовой долей 0,25%; кислота уксусная ледяная плотностью 1,07 г/куб.см, раствор концентрации 0,2 моль/куб.дм; ацетат натрия трехводный, раствор концентрации 0,2 моль/куб.дм; хлорид натрия, раствор концентрации 0,1 моль/куб.дм; 2,4-динитрофенол; йод, раствор концентрации 0,25 моль/куб.дм; раствор буферный стандартный с рН близким к 5,0 для проверки стеклянного электрода; вода дистиллированная.

Подготовка к испытанию. Ацетатный буферный раствор концентрации 0,2 моль/куб.дм с рН 5,0 приготовляют, смешивая одну объемную часть раствора уксусной кислоты и три объемных части раствора ацетата натрия. В полученном буферном растворе растворяют 2,4-динитрофенол с таким расчетом, чтобы его концентрация в комбинированном реактиве составила 0,05%. Проверяют рН раствора потенциометрически и в случае отклонений от рН 5,0 его корректируют, добавляя раствор уксусной кислоты концентрации 0,2 моль/куб.дм или раствор ацетата натрия концентрации 0,2 моль/куб.дм.

Комбинированный реактив готовят из восьми объемных частей раствора крахмала, пяти объемных частей буферного раствора с 2,4-динитрофенолом и одной объемной части раствора хлорида натрия. При приготовлении комбинированного реактива в количестве, равном или большем 1 куб.дм, объем соответствующих растворов отмеривают с точностью до 0,5 куб.см. Полученную смесь тщательно встряхивают. Реактивы хранят при комнатной температуре не более 3 мес.

Раствор меда. 5 г меда, взвешенного с точностью до 0,01 г, растворяют в дистиллированной воде в мерной колбе вместимостью 50 куб.см. 1 куб.см такого раствора содержит 0,1 г меда.

Раствор крахмала. 0,25 г крахмала, взвешенного с точностью до 0,001 г, размешивают в стаканчике вместимостью 50 куб.см с 10 - 20 куб.см дистиллированной воды и количественно переносят в коническую колбу, где не сильно кипит 80 - 90 куб.см дистиллированной воды. Кипение продолжают 2 - 3 мин. Колбу охлаждают до 20 град. C, содержимое количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 куб.см и доводят до метки.

Проведение испытания. В сухую пробирку отмеривают из бюретки 14 куб.см комбинированного реактива. Пробирку закрывают резиновой пробкой и помещают на 10 мин в водяную баню с температурой 40 град. C. Затем в пробирку вносят пипеткой 1 куб.см раствора меда. Содержимое перемешивают пятикратным перевертыванием и пробирку вновь помещают на водяную баню, одновременно включая секундомер. Пробирку выдерживают на водяной бане в течение 15 мин при температуре (40 +/- 0,02) град. C.

Пипеткой отбирают 2 куб.см реакционной смеси, которую вносят при перемешивании в мерную колбу вместимостью 50 куб.см, содержащую 40 куб.см воды и 1 куб.см раствора йода, имеющих температуру 20 град. C. Раствор доводят водой до метки. Колбу закрывают пробкой, содержимое хорошо перемешивают и выдерживают на водяной бане при 20 град. C в течение 10 мин.

Одновременно проводят контрольный опыт, заменяя раствор меда дистиллированной водой.

Оптическую плотность измеряют на фотоэлектроколориметре против

воды при светофильтре с длиной волны 582 или 590 нм, используя

кювету с рабочей длиной 10 мм. Значения оптической плотности

испытуемого раствора (Д ) и контрольного опыта (Д ) записывают с

исп к

точностью 0,001.

Обработка результатов. Диастазное число меда (X, ед. Готе) в

пересчете на 1 г безводного вещества вычисляют по формуле

(Д - Д ) · 100 · 80

к исп

Х = ---------------------- (84)

Д (100 - W)

к

где Д - оптическая плотность контрольного раствора;

к

Д - оптическая плотность испытуемого раствора;

исп

80 - коэффициент пересчета;

W - массовая доля воды в меде, %.

За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений. Допустимые расхождения между результатами параллельных определений не должны превышать 0,5 ед. Готе в интервале величин менее 10 ед.

Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]