6. Качественная реакция на кровяные пигменты.

Появление в моче форменных элементов крови (гематурия) или кровяных пигментов (гемоглобинурия) относится к патологии и может быть обнаружено с помощью ряда проб (гваяковой, бензидиновой и др.). Гематурия имеет место при нарушении целостности кровеносных сосудов, повреждении мочеполовых путей (мочевые камни, рак мочевого пузыря); гемоглобинурия наблюдается при отравлении гемолитическими ядами, при ожогах происходит разрушение эритроцитов. Кровяные пигменты можно открыть бензидиновой пробой, которая основана на окислении бензидина атомарным кислородом, который образуется при разложении перекиси водорода кровяным пигментом, моча окрашивается в синий или зеленый цвет.

Проба с бензидином.

В пробирку наливают 1 мл прокипяченной мочи, добавляют 4 капли раствора 5% бензидина в ледяной уксусной кислоте (свежеприготовленный) и 4 капли 3% раствора перекиси водорода. После перемешивания жидкость окрашивается в синий или зеленый цвет, это указывает на присутствие крови в моче.

Проба гваяковой смолой.

Налить в пробирку 1 мл исследуемой мочи. В другую пробирку добавить 1 мл 2% раствора гваяковой смолы, туда же добавить 3-5 капель 1% раствора перекиси водорода и осторожно наслоить в пробирку раствор, содержащий мочу. При наличии кровяных пигментов отметить появление синего кольца на границе наслаивания.

7. Качественное определение желчных пигментов.

Желчные пигменты (билирубин, биливердин и др.) появляются в моче при желтухах, образуются при распаде гемоглобина эритроцитов. Моча, содержащая желчные пигменты, имеет желтовато-коричневое или зеленое окрашивание (характерный признак желтухи).

Проба на билирубин с раствором йода (проба Розина).

К 3 мл мочи осторожно наслаивают 1% спиртовый раствор йода или раствор Люголя. При наличии билирубина на границе между обеими жидкостями образуется зеленое кольцо. С нормальной мочой проба отрицательна.

Проба Гмелина на желчные кислоты.

К 1 мл концентрированной азотной кислоты осторожно по стенке наслоить мочу равный объем. При наличии желчных пигментов на границе наслаивания образуется зеленое кольцо.

8. Проба Петенкофера на желчные кислоты.

Реакция основана на конденсации желчных кислот с оксиметилфурфуролом, образующимся под влиянием концентрированной серной кислоты из сахарозы. Продукт конденсации имеет красно-фиолетовую окраску.

В пробирку поместить 1 мл мочи добавить 5 капель 5% раствора сахарозы и осторожно по стенке пробирки наслоить 1 мл концентрированной серной кислоты. При наличии желчных кислот на границе наслаивания образуется кольцо красно-фиолетового цвета.

9. Проба Яффе - реакция на уробилин.

К 2 мл мочи прибавляют небольшую порцию хлористого цинка. При встряхивании появляется хлопьевидный осадок, который растворяют в концентрированном растворе аммиака (около 1мл). В норме появляется слабо-зеленая флюоресценция, ярко выраженная при патологии.

10. Качественное определение индикана в моче.

Индикан - калиевая или натриевая соль индоксилсерной кислоты, содержится в нормальной моче в виде следов. Много индикана в моче травоядных животных, а также в моче человека при усиленном гниении белков в кишечнике, при запорах и непроходимости кишечника.

В пробирку наливают 4 мл исследуемой мочи и прибавляют при помешивании равный объем серной кислоты. Затем добавляют около 1 мл хлороформа, 1-2 капли раствора перманганата калия, закрывают пробкой и несколько раз перевертывают, не встряхивая. Пробирку ставят в штатив и наблюдают интенсивность окрашивания хлороформного слоя в синий цвет.

УИРС. Анализ пробы мочи.

Задание получает каждый студент. В каждой пробирке студенты анализируют присутствие белка, сахара, кетоновых тел, желчных и кровяных пигментов, а также другие компоненты. Полученные данные анализируются и оформляются выводы.

Эталоны ответов на тесты контроля сходного уровня знаний

1 – 1,3. 2 – 2,4. 3: 1-В, 2-А, 3 – Б, 4 – А, 5 - В. 4:1 – А,В; 2 – Б,В; 3 –Б; 4 – Б,Г; 5 – А,В; 6– Б; 7 –А,В. 5: 2,4,5. 6: 1,2,3,4. 7 – С. 8 – А.

Эталоны ответов на ситуационные задачи

Задача 1.

Экскреция с мочой пролина и оксипролина свидетельствует о нарушении метаболизма коллагена.

Задача 2.

Если при повторном анализе результаты подтвердились, глюкозурию без гипергликемии следует рассматривать как результат «почечного диабета», при котором нарушена реабсорбция глюкозы в процессе образования вторичной мочи.

Модуль 9. Фармацевтическая биохимия.

Занятие 33. Биотрансформация лекарственных веществ.

Определение активности монооксигеназ клеток печени.

Цель занятия. В результате освоения темы студент должен уметь провести оценку результатов определения активности монооксигеназ эндоплазматического ретикулума клеток печени по выделению метаболитов амидопирина с мочой, активности алкогольдегидрогеназы сыворотки крови.

Содержание занятия. На занятии студентам предстоит ответить на вопросы тест-карт программированного контроля, вопросы преподавателя; провести определение активности монооксигеназ клеток печени, алкогольдегидрогеназы сыворотки крови и полученные результаты занести в протокол.