Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
praktikum-po-bx-versiya-3.doc
Скачиваний:
6
Добавлен:
07.05.2019
Размер:
5.91 Mб
Скачать

Эталоны ответов на ситуационные задачи Задача 1.

Ответ. Аминокислотный состав пептида отличается высоким содержанием диаминомонокарбоновых кислот – лизина и аргинина, в то же время, в структуре пептида отсутствуют ароматические и гетероциклические аминокислоты - фенилаланин, тирозин, гистидин и триптофан, дающие положительную ксантопротеиновую реакцию.

В частности, тирозин с концентрированной азотной кислотой реагирует по следующей схеме:

желтая окраска

Оранжевая окраска

Задача 2.

Ответ. В сильнокислой и щелочной среде осаждению белков препятствует заряд (отрицательный в кислой и положительный в щелочной). Поэтому, если рН исследуемой мочи не соответствует слабокислой реакции, можно получить ложно отрицательный результат.

Задача 3.

Ответ. В живой клетке процесс укладки синтезируемой полипептидной цепи - фолдинг регулируется особыми белками шаперонами, называемыми также белками теплового шока. Эти белки контролируют формирование стабильной и биологически активной конформации, предотвращая образование из полипептидной цепи неспецифических клубков и агрегатов, а также участвуют в доставке белков к субклеточным мишеням.

Занятие 3. Методы выделения и очистки белков.

Цель занятия. Освоить некоторые методы выделения и очистки белков, используемые для дальнейшего изучения их химического состава и строения. В результате освоения темы студент должен ознакомиться с методом электрофоретического разделения белков и научиться анализировать протеинограмму.

Содержание занятия: Студентам предстоит ответить на вопросы тест-контроля и вопросы преподавателя; ознакомиться с методами электрофореза белка на бумаге, очистки раствора белка от низкомолекулярных примесей методом диализа и гельфильтрации на молселекте, проанализировать полученные данные и сделать выводы.

УИРС - решение ситуационных задач, обсуждение рефератов. Темы реферативных сообщений:

1. Методы определения молекулярной массы белков.

2. Электрофоретические методы разделения белков и пептидов.

Методические указания к самоподготовке

Методы препаративной химии белков основаны на их физико-химических свойствах, поэтому при подготовке к занятию следует повторить физико-химические свойства белков. Особое внимание следует уделить коллоидным свойствам белков, таким понятиям как амфотерность аминокислот и белков, зависимость электрических свойств белков от аминокислотного состава и свойствам белков в изоэлектрическом состоянии. Для лучшего усвоения материала занятия, используя учебник, лекции и дополнительную литературу, выполните следующие задания.

Таблица 6

п/п

Задание

Указания к выполнению задания

1.

Изучите методы выделения индивидуальных белков.

1. Перечислите методы разделения белков, позволяющие получить индивидуальный белок.

2. Кратко сформулируйте, на чем основаны перечисленные методы.

2.

Изучите, почему белки обладают свойствами коллоидов.

1.Выпишите способы определения молекулярной массы белков.

2.Перечислите данные, подтверждающие высокую молекулярную массу белков.

3.Дайте определение кристаллоидов и коллоидов.

4.Чем можете подтвердить способность белков образовывать коллоидные растворы?

5.Охарактеризуйте принцип метода диализа. Какое практическое значение имеет диализ?

3.

Вспомните электрические свойства белков.

1. Повторите механизм возникновения электрического заряда. Что такое изоэлектрическая точка?

2.Охарактеризуйте явление электрофореза белков. Запомните виды электрофореза.

3.Укажите факторы, от которых зависит скорость перемещения белковых молекул в поле постоянного электрического тока.

4. Напишите, на какие фракции разделяют белки сыворотки крови при электрофорезе на бумаге. Выпишите протеинограмму – соотношение белковых фракций - здорового ребенка и взрослого человека.

5. Изучите возможности электрофоретического разделения белков на полиакриламидном геле, принцип диск-электрофореза и его значение для разделения белков сыворотки крови.

4.

Повторите растворимость белков.

1. Выясните, чем определяется растворимость белков, и какие факторы стабилизируют белковую молекулу в растворе.

5.

Изучите метод хроматографии белков.

1.Выпишите классификацию методов хроматографического разделения белков по механизму разделения и технике проведения. Сформулируйте принцип метода адсорбционной, ионнообменной, афинной, и распределительной хроматографии. Кратко опишите процедуру гельфильтрации и газожидкостной хроматографии.

2. Опишите и запомните метод очистки белков от низкомолекулярных примесей методом гельфильтрации на молселекте.

Подготовьте к предстоящему занятию протокол, в котором отразите принцип метода и ход работы. Не забудьте оставить достаточно места для выводов после выполнения каждой работы.

Тут вы можете оставить комментарий к выбранному абзацу или сообщить об ошибке.

Оставленные комментарии видны всем.

Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]