- •I. Введение. Грипп — заболевание с неизменяющейся симптоматикой, вызываемое изменяющимся вирусом
- •II. Таксономия вирусов гриппа
- •IV. Структурное и функциональное родство вирусов гриппа с другими рнк-содержащими вирусами
- •V. Антигенная изменчивость вируса гриппа и ее отличие от антигенной изменчивости других инфекционных агентов
- •VI. Нерешенные вопросы
- •Структура вируса гриппа
- •I. Введение
- •1. Число и функции полипептидов
- •4. Нейраминидаза
- •5.Белок нуклеокапсида
- •7. Количество полипептидов в вирионе
- •8. Вирусы гриппа в и с
- •1. Гемагглютинин
- •2. Нейраминидаза
- •IV. Сборка вирионов
- •V. Заключение. Модель вириона гриппа
- •Биологически активные белки вируса гриппа. Гемагглютинин
- •II. Реакция гемагглютинации
- •1. Количественное определение гемагглютинации
- •2. Гемадсорбция
- •3. Ингибирование гемагглютинации
- •III. Структура гемагглютинина
- •1. Химический состав изолированных гликопептидов
- •2. Антигенные свойства гликопептида hAt
- •4. Структура субъединицы на
- •5. Антигенная гомогенность субъединиц на
- •1. Моновалентный гемагглютинин
- •2. Агрегация и диссоциация моновалентного гемагглютинина
- •IV. Функции гемагглютинина
- •V. Заключение
- •Биологически активные белки вируса гриппа. Нейраминидаза
- •II. Специфичность нейраминидазы
- •III. Субстраты для нейраминидазы
- •IV. Химические свойства нейраминидазы
- •V. Содержание нейраминидазы в оболочке вируса
- •1. Использование протеолитических ферментов
- •2. Использование детергентов
- •VI. Свойства изолированной нейраминидазы а. Состав аминокислот
- •VII. Структура нейраминидазы
- •VIII. Антигенные свойства нейраминидазы
- •IX. Лектины и нейраминидазы
- •X. Ингибиторы активности нейраминидазы
- •XI. Роль нейраминидазы
- •Биологически активные белки вируса гриппа. Активность транскриптазы в клетках и вирионах гриппа
- •I. Введение
- •II. Активность рнк-полимеразы в инфицированных клетках
- •IV. Заключение
- •Рибонуклеиновые кислоты вирусов гриппа
- •I. Введение
- •II. Методы
- •1. Экстракция рнк из вирионов
- •1. Анализ экстрагированной рнк с помощью градиентного центрифугирования
- •2. Анализ экстрагированной рнк с помощью электрофореза в полиакриламидном геле (паагэ)
- •IV. Комплекс рнк с белком (рнп) а. Физические и химические свойства
- •2, Созревание и упаковка рнк в вирионы
- •1. Внутриклеточная локализация вкРнк
- •2. Кинетика синтеза вкРнк
- •3. Физические свойства информационной рнк (мРнк)
- •VI. Действие ингибиторов на синтез рнк
- •VII. Заключение
- •Генетика вируса гриппа
- •I. Введение. Исторический обзор
- •1. Исследования по генетике, проведенные Burnet и сотрудниками
- •2. Исследования по генетике, проведенные Hirst и Gotlieb
- •II. Геном вируса гриппа
- •III. Мутации, изменчивость, адаптация
- •1. Модификация вирусных гликопротеидов
- •2. Модификация вирусной оболочки
- •3„ Модификации с помощью протеолитических ферментов
- •1964) Или к гуанидвнгидрохлориду (David-West, 1973) явля
- •2. Фенотипы, относящиеся к нейраминидазе
- •3. Морфология вириона
- •1. Чувствительность к клетке-хозяину
- •2. Патогенность
- •3. Механизм рекомбинации
- •10% От выхода вируса при разрешающей температуре. Шля1
- •V!. Фенотипическое смешение и гетерозигозис
- •VII. Изучение функции генов с помощью ts-мутантов
- •VIII. Заключение
- •Репликация вируса гриппа
- •I. Введение
- •II. Адсорбция, проникновение, «раздевание» вируса
- •III. Транскрипция а. Последовательность синтеза рнк
- •2. Циклогексимид
- •3. Глюкозамин
- •IV. Синтез вирусных белков
- •2. Белок нуклеокапсида
- •3. Неструктурные белки
- •4. Мембранный м-белок
- •5. Гемагглютинин
- •VI. Синтез липидов
- •VII. Сборка (см. Также гл. 2)
- •IX. Неправильные формы размножения
- •Культивирование вирусов гриппа человека в лабораторных условиях, круг хозяев среди лабораторных животных и выделение вируса из клинического материала
- •I. Введение
- •II. Культивирование вирусов в лабораторных условиях
- •1. Продуктивная инфекция
- •2. Абортивная инфекция
- •3. Персистентная инфекция
- •4. Параметры инфекции
- •IV. Выделение вируса
- •Антигенная изменчивость вируса гриппа
- •I. Введение
- •II. Грипп в историческом аспекте (см. Также гл. 15)
- •III. Свойства генома вируса гриппа
- •IV. Субъединицы гемагглютинина
- •V. Механизм антигенного дрейфа
- •1955, 1956; Magill, 1955; Hamre et al., 1958). Эпидемиологиче
- •1956, 1957; Takatsy, Furesz, 1957), антигены постепенно за
- •VI. Механизм антигенных сдвигов (значительных антигенных изменении)
- •VII. Дополнительные доказательства,
- •2. Естественная передача вируса и селекция
- •3. Селекция и передача «нового» вируса гриппа в системе in vivo
- •1. Антигенные соотношения между вирусами гриппа человека, низших млекопитающих и птиц
- •2. Круг хозяев
- •Иммунология гриппа
- •I. Введение
- •II. Проявления иммунитета
- •1. Устойчивость к инфекции
- •2. Изменение заболевания
- •3. Передача вируса
- •2. Изменение заболевания
- •3. Передача вируса
- •4. Механизм действия антител к na
- •V. Влияние антигенного дрейфа на иммунитет
- •VII. «первородный антигенный грех»
- •VIII. Клеточный иммунитет и грипп
- •IX. Заключение
- •Грипп у человека
- •2. Инфекция, вызываемая вирусом гриппа а
- •3. Инфекция, вызываемая вирусом гриппа в
- •7. Изменения бактериальной флоры
- •8. Функция легких при неосложненном гриппе
- •9. Выделение больными вируса в окружающую среду
- •10. Интерферон
- •11. Продукция антител
- •1. Пневмония
- •2. Острые заболевания нижних дыхательных путей у детей
- •3. Обострение хронического бронхита
- •III. Экспериментальная гриппозная инфекция у человека
- •3. Продукция интерферона при заболевании
- •IV. Выводы и заключение
2. Естественная передача вируса и селекция
Описанные исследования показали, что два различных штамма вируса гриппа А могут рекомбинировать in vivo, если они одновременно введены одному и тому же животному.
Одновременное введение животным больших доз двух различных вирусов гриппа А представляет собой, однако, искусственную систему, которой, вероятно, нет в природе. Для того чтобы выяснить, может ли рекомбинация происходить при более естественных условиях, двум различным вирусам гриппа А позволили одновременно распространяться в стае чувствительных к вирусам птиц следующим образом: двух индеек, зараженных ВГИ (А/и-ндкж/Виеконсин/66 {Hav6N2]), подселили к стае из 30 чувствительных охраняемых индеек. Спустя 2 дня в ту же стаю ввели еще двух индеек, зараженных ВЧП. Ежедневно забивали по 2 индейки из стаи и образцы легких исследовали на наличие каждого из родительских и аятигенно-гибридных вирусов в оболочках аллантоиса, а также путем выделения бляшек и идентификации вирусов (Webster et al., 1971). ВЧП быстро распространялся среди охраняемых птиц и обнаруживался через 3 дня после введения; ВГИ не определялся до 9-го дня после введения в стаю зараженных птиц (Webster et al., 1973). Антигенно-гибридные вирусы, несущие ВЧП (Н)-ВГИ(N), выявлялись на 10-й день после начального воздействия и составляли основную часть вирусной популяции в суспензии лепких одной из исследованных птиц. Опыты такого рода проводились трижды, и в каждом опыте на 9—10-й день выделялись антигенные гибриды; эти гибриды обладали ВЧП (Н)-ВГИ(N), но обратных -гибридов выделено не было. Выделяемый рекомбинантный 1вирус имел, вероятно, преимущество в росте перед родительскими вирусами; в каждом опыте этот вирус выделяли как доминирующий от одной или более птиц. Для того чтобы «новый» штамм вируса гриппа появился в природе путем такого рода рекомбинации и стал эпидемическим штаммом, необходимо, чтобы «новый» вирус имел некоторое селективное преимущество. Это селективное преимущество может состоять в обладании антигенами, к которым популяция в большинстве своем не является иммунной, но вирус должен также обладать способностью переходить к чувствительным хозяевам. Обе возможности были изучены в приведенных опытах. Так, например, ко времени, когда рекомбинантный вирус уже присутствовал, в стаю вводили нормальных птиц, «о рекомбинанты не сумели стать доминантным штаммом, и все нормальные контактирующие птицы погибли от инфекции, вызванной родительским ВЧП.
3. Селекция и передача «нового» вируса гриппа в системе in vivo
Если мы предполагаем, что новые штаммы вирусов гриппа типа А могут возникать >в пр'ироде путем рекомбинации, важно показать, .как эти вирусы могут селектироваться и стать доминирующими или новыми эпидемическими штаммами. Возможный механизм селекции может состоять в том, что рекомбинация и селекция имеют место <в иммунных животных. Опыты Webster и Campbell (1974) показали, что рекомбинация и селекция «нового» штамма -вируса гриппа может происходить у индеек с низкими уровнями антител к НА одного родительского вируса и к NA другого родительского вируса (45).
Индеек, обладающих низкими уровнями антител к НА ВГИ (А/индкж/Висконсин/бб [Hav6N2]) .и к NA ВЧП, подвергали смешанной инфекции ВЧП и ВГИ. Через 1—2 дня после смешанной инфекции в трахеях индеек присутствовали как оба родительских вируса, так и рекомбинантный вирус гриппа, несущий ВЧП (Н)-ВГИ (N). На 6-й день после смешанной инфекции присутствовал только рекомбинантный вирус B4n(H)iBrH(N). На 7-й день 'после смешанной инфекции индейки погибали, и выделялись лишь рекомбинантные вирусы гриппа, обладающие ВЧП (Н)-ВГИ (N). Все вирусы выделяли при предельных разведениях из оболочек аллан-тоиса или из эмбрионов, и не использовали антител для селекции рекомбинантных вирусов. Все неиммунные птицы, введенные в стаю на 5-й день, погибли от скоротечной инфекции и от «их выделяли лишь (рекомбинантные вирусы гриппа.
После смешанной инфекции неиммунных или гипериммунных индеек селенции рекомбинантного вируса гриппа не происходило. Таким образам, смешанная инфекция птиц, которые имеют низкий уровень антител к НА одного вируса и к NA другого, обеспечивает идеальные условия для селекции рекомбинантов. Вслед за инфекцией в ограниченной степени реплицируются оба родительских вируса, стимулируя тем са-мььм иммунную систему, которая элиминирует родительские вирусы. Таким путем могут быть селектированы рекамбиная-ты и при условии, что они обладают необходимыми свойствами вирулентности и способностью к передаче другим особям, эти рекомбинанты могут вызвать эпидемическое заболевание.
Эти эксперименты показывают, что при относительно естественных условиях имеется рекомбинация между различными вирусами гриппа А и что новые вирусы могут и^меть селективное преимущество перед обоими родительскими штаммами. Эти опыты не доказывают, что все новые вирусы гриппа низших млекопитающих, птиц и человека возникают по такому механизму, но они устанавливают, что этот механизм является одним из способов, 'благодаря которым появляются новые 'вирусы.
В. ДАННЫЕ ПО РЕКОМБИНАЦИИ ВИРУСОВ ГРИППА В ПРИРОДЕ
Приведенные опыты не оставляют сомнений в том, что новые штаммы вируса гриппа могут быть 'получены in vitro и in vivo, и позволяют предположить, что подобные процессы могут иметь место и в природе. Имеются ли, однако, какие либо доказательства того, что рекомбинация в природе происходит? Эти доказательства косвенные и включают: 1) антигенные соответствия между вирусами гриппа, выделенными от людей и от низших млекопитающих 'и птиц; 2) отсутствие строгого круга хозяев вирусов гриппа.