4. Нейраминидаза

Полипептид нейраминидазы (NA) является гликопротеидом, субъединицы которого имеют относительную молекулярную массу в пределах от 5000 до 65000. Величина относительной молекулярной массы NA зависит как от штамма вируса, так и от условий выделения, принятых в различных лабораториях (Haslam et al., 1970b; Webster, 1970; Skehel, Schild, 1971; Gregoriades, 1972; Lazdins et al., 1972). Были обнаружены два различных вида полипептидов NA при ее изоляции из одного типа вирионов (Webster, 1970; Skehel, Schild, 1971; Bucher, Kilbourne, 1972; Lazdins et al., 1972). Lazdins и соавт. (1972) обнаружили мажорную компоненту с относительной молекулярной массой 63 000 и минорный полипептид в 56 000, однако при обработке препарата вируса трипсином они обнаружили только одну компоненту с низкой молекулярной массой. Это указывает на то, что меньший по молекулярной массе полипептид был получен из большего с помощью протеолитического расщепления. Меньший по размерам полипептид не агрегировал. Это означает, что при протеолитической обработке отщепляется гидрофобная область молекулы. Электронно-микроскопическое исследование Wrigley и соавт. (1973) показало, что при обработке трипсином удаляется «ножка» грибообразного нейраминидазного «шипа». Сохранение ферментативной активности при такой обработке указывает на то, что активный центр фермента находится на гантелеобразной «головке» «шипа» нейраминидазы. Как будет подробно изложено в гл. 3, имеется много доказательств того, что фермент присутствует в вирионе в форме тетрамера с относительной молекулярной массой 200 000— 250 000 (Kendal, Eckert, 1972; Bucher, Kilbourne, 1972; Lazdins et al., 1972; Wrigley et al., 1973).

5.Белок нуклеокапсида

Полипептид, обозначаемый символом NP, представляет собой белковые субъединицы нуклеокапсида (Duesberg, 1969; Joss et al., 1969; Pons et al., 1969). Оценки относительной молекулярной массы, проведенные во многих лабораториях для белка NP различных штаммов вируса гриппа, дали величины от 55 000 до 65 000. Величина 60 000 обычно принимается за среднюю относительную молекулярную массу этого белка. Он не содержит углеводов и является типоспецифическим антигенам, на свойствах которого основана классификация вируса гриппа на типы А, В и С (см. .гл. 12). Аминокислотный анализ белка NP, выделенного из штамма вируса гриппа типов А и типа В, дал существенно различные результаты (Laver, Baker, 1972). Белок NP обладает аффинным сродством как к вирионной РНК, так и к комплементарным к ней цепям (Scholtissek, Becht, 1971).

7. Количество полипептидов в вирионе

В связи с тем что вирионы гриппа гетерогенны по своим размерам, а также в связи со штаммовой вариабельностью очень трудно точно определить число молекул различных полипептидов, входящих в состав отдельной вирусной частицы. Кроме того, число молекул полипептида НА, а также продуктов их расщепления — полипептидов HAi и НАг — может существенно зависеть от степени расщепления НА, которая, как было описано ранее, в свою очередь зависит от многих условий. И, наконец, общее число молекул гликопротеидов НА и NA в вирионе одного штамма вируса может меняться в зависимости от типа клетки-хозяина (Lazarowitzetal., 1973а; Choppin et al., 1975). Таким образом, любой расчет числа полипептидов в вирионе гриппа можно считать лишь приблизительным и справедливым только для усредненного вириона при определенном наборе условий. В табл. 7 приведены предельные значения для числа полипептидов в вирионе, полученных в различных лабораториях с довольно хорошим совпадением результатов. Для более детальной информации о значениях, «полученных разными авторами, изучавшими различные штаммы вирусов, читатель может обратиться к подробному обзору White (1974), где сведены данные о белках вируса гриппа.