2, Созревание и упаковка рнк в вирионы

Механизм, согласно которому РНК (или РНП) упаковывается в вирусную частицу, до настоящего времени неизвестен. Ясно, что имеет место процесс отбора, в результате которого во вновь формируемые вирусные частицы включаются только РНП, содержащие молекулы вРНК (но не вкРНК). Можно предположить, хотя в настоящее время и нет прямых доказательств этого утверждения, что на ранних этапах созревания вирионов в сборке участвуют какие-то полимерные молекулы (вероятно, .молекулы М-белка), содержащие места для «узнавания» вРНК- Если такой инициатор-ный механизм имеет место, то молекулы других полипептидов или субъединицы того же белка конденсируются вокруг РНП и начинается процесс самосборки, который заканчивается отпочкованием цельных вирусных частиц от тех специфических участков клеточных мембран, которые ранее претерпели изменения и содержат вирусные компоненты.

Выяснение вопроса о том, как полный набор фрагментов вирусной PiHK (в виде РНП) упаковывается в отдельную1 вирусную частицу,—сложная задача, особенно при учете фрагментарности вирусного генома. Хотя мы и не можем исключить возможность «выстраивания» фрагментов РНК или связывания их упорядоченным образом на непрерывном белковом остове, в настоящее время нет достаточных доказательств этого утверждения. Compans и соавт. (1970) рассчитали, что если для формирования полного вирусного генома требуется 5 фрагментов и если в действительности упаковывается случайным образом 7 фрагментов, около 22% вирусных частиц будут содержать полный набор из пяти необхо-

димых фрагментов РНП. В настоящее -время обнаружено, что в каждом вирионе содержится по .крайней мере шесть или семь фрагментов. Таким образом, если признать правильной приведенную схему, необходимо предположить, что в процессе упаковки в каждую вирусную частицу должно лопасть 9—10 фрагментов РНП. Хотя это и немного завышенная величина, если основываться на данных химического анализа содержания РНК в одной вирусной частице, эту возможность нельзя исключить. Такой механизм созревания вместе со способностью вирионов ж агрегации и увеличения за счет этого своей инфекционное™ (Hirst, Pons, 1973) дает вирусу гриппа преимущества в борьбе за существование в природе. Один экспериментальный подход к данному вопросу крайне полезен, но на практике он очень сложен в техническом отношении. Если предположить, что репликация фрагментов РНП осуществляется случайно, можно ожидать следующее. Случайный, или неупорядоченный, синтез фрагментов РНП должен привести к избыточной продукции меньших по размерам фрагментов. Это предположение основано на том, что молекула полимеразы каждого фрагмента РНП (Bishop et al., 1972) реплицирует РНК с одинаковой скоростью. Вследствие этого самый маленький по размерам фрагмент РНП, длина (которого составляет 7з длины наибольшего из фрагментов, будет реплицироваться в 3 раза большем количестве. Полученные нами данные не подтверждают это предположение Bishop и соавт. (1972). Соотношение между количеством разных фрагментов 'было равно 2:1:1:1:2 — от самого .большого по размерам фрагмента к самому малому (Pons, неопубликованные данные). Отсюда можно сделать вывод, что, хотя яри формировании зрелых вирионов фрагменты вирусспецифических РНК « могут включаться в вирусную частицу случайно, их репликация или транскрипция каким-то образом регулируется или контролируется. Если включение фрагментов РНП в вирлон подчиняется законам случайных процессов, то их относительное распределение должно быть одинаковым как при выделении из вирионов, так и при изоляции из внутриклеточного пула. Предварительно полученные данные были неоднозначны в связи с большими техническими трудностями при постановке опытов, заключающимися в присутствии в популяции неполного вируса и отсутствии синхронности инфекционного процесса в разных клетках.

Б. КОМПЛЕМЕНТАРНАЯ ИЛИ ИНФОРМАЦИОННАЯ РНК {вкРНК)