3. Морфология вириона

Препараты аллантоисной жидкости штаммов вируса, которые не были адаптированы к выращиванию в полости ал-лантоиеа, часто содержат главным образом нитевидные ви-

рионы. Адаптация ж выращиванию в полости аллантоиса сопровождается переходом от нитевидных форм ж сферическим. Однако начальная нитевидная морфология может поддерживаться при пассаже в предельных разведениях (Burnet, Lind, 1957а). Эти данные позволяют-предполагать, что морфология является генетически обусловленной, подверженной частой мутации от нитевидной формы к сферической и что последняя форма по сравнению с первой обладает преимущественным выживанием в полости аллантоиса. Окончательное подтверждение того, что морфология является генетически детерминированной, было получено при проведении опытов по рекомбинации между сферическим штаммом PR8 и нитевидным штаммом вируса А2, приводящей «к появлению в потомстве серотипов: сферического А2 и нитевидного PR8 (Kilbourne, Murphy, 1960). Морфология не связана ни с серотипом НА*, ни с серотипом NA*, но изменение формы от нитевидной к сферической было ассоциировано с увеличенной способностью к росту в полости аллантоиса и более высокой латогенностью для легких мышей (Kilbourne, Murphy, 1960; Kilbourne et al., 1971). Неизвестно, какой вирусный белок (белки) определяет морфологию. На морфологию вириона, кроме того, что она обусловлена генетически, также воздействуют условия окружающей среды. Так, добавление алкоголята витамина А в полость аллантоиса приводит к образованию большого числа нитевидных вирионов PR8, которые были в основном сферическими в отсутствие витамина A (Blough, 1964).

Б. МАРКЕРЫ, ВЫЯВЛЯЕМЫЕ В РЕЗУЛЬТАТЕ РАЗМНОЖЕНИЯ ВИРУСОВ

Для вируса гриппа интенсивно применялись и такие маркеры, как круг хозяев, патогенность или тип бляшек, но они охарактеризованы менее полно, чем маркеры, основанные на фенотипах вирионов. Частично это обусловлено не совсем полным пониманием биохимических стадий репликации вируса, а частично — неизбежно лолигенной природой этих маркеров (в том смысле, что многоцикловый рост вируса требует участия и координации всех продуктов генома, что уже обсуждалось в разделе IA, 1д).

1. Чувствительность к клетке-хозяину

Вирус гриппа может прикрепляться, проникать и инициировать инфекцию в необычайно широком круге хозяев, в отношении как видов животных, так и культур клеток и органов. Однако в большинстве случаев это приводит к абортивной инфекции, т. е. РНК (как комплементарная, так и вирионная) и белки синтезируются, но инфекционного вируса

продуцируется очень мало (Schlesinger, 1950; Isaacs, Fulton, 1953; Henle et al., 1955; Lerner, Hodge, 1969; Haslam et al., 1970; Choppin, Pons, 1970; Sugiura, 1972). Причина абортивной инфекции, по-видимому, проявляет себя в относительно поздней стадии репликации вируса. Неизвестно, одна -и та же ли стадия 'блокируется во всех системах вирус—«летка, приводящих к абортивной инфекции. Абортивная инфекция, в которой миграция РНП-антигена из ядер в цитоплазму нарушена (Franklin, Breitenfeld, 1959; Hills et al., 1960; Loffler et al., 1962; Ter Meulen, Love, 1967; Ghandi et al., 1971), и абортивная инфекция, в которой эта миграция осуществляется нормально (Sugiura et al., 1962; Fraser, 1967; Pristasova et al., 1967; Zavadova et al., 1968; Fedova, Tumova, 1968), могут иметь дефекты в различных стадиях (см. также гл. 8).

Различие между продуктивной и абортивной инфекциями не абсолютно, ибо даже в абортивной инфекции образуется иногда небольшое число 'инфекционного вируса, хотя оно и недостаточно для непрерывного многоциклового роста (Chop-pin, Pons, 1970; Sugiura, Ueda, 1971).

Маркеры чувствительности к клетке-хозяину обычно выявляют по образованию на данных клетках бляшек. Образование бляишк, требующее продукции инфекционного вируса, в количествах, превышающих определенный уровень в каждом цикле многостадийного роста, может являться слишком жестким критерием для маркирования чувствительности к клетке-хозяину. Клоны вирусов, которые в процессе рекомбинации получили ген (гены), необходимый для продуктивной инфекции, 'будут давать различные количества инфекционного потомства, но обычно меньше, чем продуктивный родительский штамм. Это, вероятно, является причиной того, что признак бляшкообразования встречался существенно редко в потомстве, получаемом от скрещивания вирусов, образующих бляшки, с вирусами, не образующими таковых (Tobita, 1971). Сравнение выходов вируса в пересчете на клетку могло бы дать более подходящий критерий для маркирования чувствительности к клетке-хозяину.

При скрещивании FPV со штаммами вируса А2 1957 г. (H2N2) или со штаммом Гонконг (H3N2) для образования бляшек на клетках куриного эмбриона и для вирулентности по отношению к куриным эмбрионам 'был необходим, по-видимому, НА* (но не NA*) FPV (Tumova, Pereira, 1965; McCa-hon, Schild, 1971). FPV, инактивированный ультрафиолетовым облучением или этиленнминохиноном, реактивировался живыми вирусами H2N2 или H3N2. При отсутствии 'селекции в потомстве обычно превалировали маркеры живого родительского штамма. Тем не менее все клоны, выделенные из бляшек, образованных на клетках куриного эмбриона, имели НА* FPV. Наоборот, многие из этих клонов содержали NA*

типа N2, указывающую на то, что NA* EPV может 'быть заменена на N2 без нарушения способности образовывать бляшки (McCahon, Schild, 1973).