1964) Или к гуанидвнгидрохлориду (David-West, 1973) явля

ется, вероятно, свойством НА*. Но стабильность по отноше

нию к обработке трипсином, т. е. ж протеолитическому отщеп

лению шипов НА* от оболочки, по-видимому, не определяет

ся одним только НА*, так как это свойство может -быть отделено

■от серотипа НА* ('Kilbourne, 1963; Kilbourne et al., 1972).

г) Сродство к рецептору. Способность вируса агглютини

ровать эритроциты различных видов животных или эритро

циты, обработанные RDE, определяется главным образом

■сродством НА* к рецептору. Однако видимая гемагглютина-

ция, будучи комбинацией процессов прикрепления вируса к

рецептору и последующей элюции в процессе ферментативного расщепления вещества рецептора, может обусловливаться и NA*. Это можно видеть на примере Х7 (НОШ)-реком-бинанта между штаммами NWS (H0N1) и A/RI/5+/57 (H2N2). Несмотря на неспособность обоих родительских вирусов элюировать с куриных эритроцитов, рекомбинант Х7 быстро элюирует с них. Этот «новый» фенотип, приобретаемый в ходе генетического взаимодействия, получается, по-видимому, из соединения низкого по сравнению с Н2 сродства НО к рецепторам эритроцитов с высокой нейраминидазной активностью N2 (Laver, Kilbourne, 1966). Сродство НА* к определенным рецепторным веществам обнаруживается иногда по чувствительности « этим веществам реакции торможения гемагглютинации. Прогретые препараты WSE были чувствительны к муцину слюнных желез овец, а прогретые препараты Mel нечувствительны. Эти свойства были связаны с ■серотилом НА* соответствующих вирусов (раздел IA, 1в). Имеются два противоположных типа штаммов вируса H2N2, выделенных в 1957 г., которые резко отличаются по чувствительности к ингибитору, содержащемуся в нормальной лошадиной сыворотке (Choppin, Tamm, 1960). Косвенные данные указывают на то, что это различие присуще НА*, а не NA*, вероятно, вследствие различного сродства гемагглютининов ■к ингибитору (Choppin, Tamm, 1960; Sugiura et al., 1961; McCahon, Schild, 1971). Интенсивная попытка отделить в процессе генетической рекомбинации чувствительность к ингибитору от серотипа НА* оказалась тщетной (Kiibourne, неопубликованные данные).

Поскольку НА* является продуктом одного гена, то в случае мутации можно наблюдать совместное изменение приведенных выше маркеров (а, Ь, с и d), что подтверждается примером мутации М+ к M+d (раздел IA, 1в).

2. Фенотипы, относящиеся к нейраминидазе

Хотя не решено, состоит NA* из одного или двух типов полипептидо'В, до сих пор нет генетических данных, предполагающих ее двойной генетический контроль. Заметные различия в количествах NA*, приходящихся на вир ион, будут описаны далее (см. раздел IVA, 2г).

а) Серотип. Серотип может быть идентифицирован по ре

акции ингибирования NA*, уменьшению размеров бляшек

или по иммунодиффузии. Иногда его можно выявить также

по торможению реакции гемагглютинацин.

б) Стабильность. Термостабильность может быть провере

на непосредственно in vitro (Drzeniek et al., 1966; Palese

■et al., 1974). До разработки нейраминидазной реакции in vit

ro в основном для определения термостабильности NA* в ка

честве маркера часто использовали способность фермента

переходить в индикаторное состояние под действием определенного ингибитора прл условии, что /гемагтлютинирующая активность не разрушается при нагревании и что гемагглю-тинил действительно не имеет сродства к упомянутому ингибитору. Было показано, что стабильность по отношению к гуанидингидрохлориду (коррелирует с серотипом NA* (David-West, 1973).

в) Активность фермента. Низкую активность NA* штаммов NWS и WSN, резко отличающуюся от высокой активности других штаммов вируса, часто использовали в качестве маркера (Burnet, Edney, 1951; Appleby, 1952; Burnet, Lind, 1955a, b; Hobson <et al., 1968). Однако активность фермента определяется также субстратами. NA* штамма WSN, активность которой была низка при использовании в качестве субстрата фетуина, оказалась столь же активной, как и у N2-co-держащих штаммов вируса, при испытании ее на низкомолекулярном синтетическом субстрате — метоксифенилацетил-а-нейраминовой кислоте (Palese et al., 1973). Скорость элюции вируса с эритроцитов частично определяется активностью NA*, но, кроме того, другим вовлеченным в этот процесс фактором является сродство НА* к рецепторам эритроцита. Биохимические параметры активности NA*, такие, как оптимум рН, Км и специфичность к субстрату, также могут служить генетическими маркерами. NA* штамма NWS по сравнению с NA* штамма WS -проявляла ограниченный диапазон специфичности к субстрату. Фермент NWS был активен на а-гликопро-теине человека или овомуцине, но был неспособен .отщеплять сиаловую кислоту от муцина подчелюстной железы свинья. WS был активен на всех трех субстратах. Поскольку муцин подчелюстной железы свиньи содержит главным образом ]\[-гли|Колил1нейраминовую кислоту, предполагалось, что WS может высвобождать как N-ацетил-, так и N-гликолилнейр-аминовую кислоту, тогда как NWS может освобождать только N-ацетюювую форму (Jameson, Levine, 1965).

г) Количество нейраминидазы, вмещаемой вирионом. Существует ряд данных, указывающих на то, что имеется различие в количествах NA*, синтезируемой в зараженных клетках и включаемой в вирион (Webster et al., 1968; Webster, Campbell, 1972; Palese, Schulman, 1974; Mowshowitz, Kilbourne, 1974). Очевидно, это является генетически детерминированным свойством штамма. Удовлетворительного объяснения этого озадачивающего феномена с точки зрения генетики в настоящее время нет.