1.2. Лабораторные методы исследования

Помимо клинической симптоматики, в диагностике инфекционных болезней большое значение имеют различные лабораторные методы исследования (бактериологические, серологические, вирусологические, биохимические и др.). Данные лабораторных методов используются также для оценки тяжести болезни, для контроля за процессом выздоровления, а также для определения сроков выписки больного из инфекционного стационара.

Бактериологические методы. Для выделения возбудителя путем посева на питательные среды могут быть использованы различные материалы – кровь, моча, испражнения, спинномозговая жидкость, гной, желчь, мокрота, а также остатки пищи, с которой может быть связано инфицирование больного. При выделении возбудителя определяется не только вид микроорганизма, но и некоторые его свойства (серологический вариант, фаготип, чувствительность к антибиотикам). Иногда определяют количество микроорганизмов в 1 г (мл) субстрата (мокроты, испражнений), что имеет значение при оценке этиологической роли выделенного микроба. Для проведения бактериологического исследования важно точно соблюдать правила взятия материала, доставки его в лабораторию и проведения посевов.

Бактериоскопические (паразитоскопические) методы. Для бактериологического исследования требуется 3-5 дней (при некоторых болезнях ответ можно получить лишь через 2-3 нед). Бактериоскопические методы, т.е. обнаружение возбудителей с помощью микроскопии, позволяют получить ответ в тот же день. Этот метод широко используется для диагностики паразитарных болезней. В частности, при малярии это основной метод подтверждения диагноза. При микроскопии окрашенного мазка или толстой капли крови обнаруживают малярийные плазмодии. Паразитоскопия используется для диагностики и других протозойных болезней. При амебиазе дизентерийные амебы (эритрофаги) обнаруживают в испражнениях (микроскопируют в течение 15 мин после взятия материала). Для диагностики лямблиоза микроскопируют дуоденальное содержимое или испражнения. Для распознавания пневмоцистной пневмонии микроскопируют мокроту. Паразитоскопия используется при диагностике различных гельминтозов.

Микроскопия может быть использована и для определения бактериальных агентов. Например, при микроскопии окрашенных мазков спинномозговой жидкости могут быть обнаружены диплококки (это менингококки или пневмококки), палочки (листерии или гемофильные палочки), а также возбудитель туберкулеза. Это имеет большое значение для проведения терапии. Если при микроскопии материала, взятого с миндалин, обнаруживают веретенообразные палочки и спирохеты, то это является подтверждением ангины Симановского-Плаута-Венсана. Для ранней диагностики лептоспироза используют микроскопию (в темном поле) крови или осадка мочи, что позволяет обнаружить лептоспиры. Возможности микроскопии значительно повышаются, если использовать специфические сыворотки, меченные флюорохромом (иммунофлюоресцентные методы). Метод позволяет обнаруживать не только бактерии (сальмонеллы, возбудители сибирской язвы), но и вирусы (аденовирусы, вирусы гриппа, парагриппа и др.). В последние годы для верификации бактериальных инфекций начали использовать полимеразную цепную реакцию (ПЦР).

Вирусологические методы. Выделение и идентификацию вирусов осуществляют в специализированных лабораториях. Большое значение имеют правильный забор, хранение и доставка материала для вирусологических исследований.

Серологические методы. Эти методы основаны на обнаружении в сыворотке крови антител к возбудителям болезней (бактерий, вирусов, простейших, гельминтов и др.). Для обнаружения антител используют различные реакции. Широко используют реакцию агглютинации – РА (реакция Видаля при брюшном тифе и паратифах, реакция Райта и Хеддельсона при бруцеллезе, реакции агглютинации риккетсий и др.), реакция непрямой геммагглютинации (РНГА), реакция торможения геммагглютинации (РТГА). Для диагностики вирусных и риккетсиозных болезней чаще используют реакцию связывания комплемента (РСК), реже – реакцию нейтрализации (РН), реакцию преципитации в геле (РПГ), радиоиммунологический метод (РИМ), реакцию энзиммеченных антител (РЭМА), иммуноферментный анализ (ИФА). Диагностическое значение имеют или высокие титры антител, или нарастание титра антител в 4 раза и более при исследовании парных сывороток, взятых с интервалом в 7-14 дней.

Аллергологические методы. Для диагностики некоторых инфекционных болезней используются внутрикожные пробы со специфическими аллергенами (бруцеллин, тулярин, токсоплазмин, орнитозный аллерген, сибиреязвенный аллерген и др.). Используют также лабораторные аллергологические методы (реакция торможения нейтрофилов, реакция бласттрансформации с аллергенами и др.).

Биохимические методы. Эти методы используются для оценки функционального состояния различных органов и систем, для определения тяжести состояния. Особенно большое значение биохимические методы, как неспецифические, имеют в диагностике болезней печени. Здесь можно выделить две группы методов: одна характеризует выраженность повреждения печеночных клеток (цитолиза), другая – холестаза. В 1-й группе основным тестом является повышение активности аланинаминотрансферазы (АлАТ). Этот фермент находится в цитоплазме гепатоцита и при повреждении его поступает в кровь, что может быть обусловлено различными факторами (вирусные гепатиты, лептоспироз, мононуклеоз, токсические повреждения печени и др.). Другим ферментом, свидетельствующим о повреждении печеночной клетки, является аспартатаминотрансфераза (АсАТ), которая располагается преимущественно в митохондриях, и повышение ее активности в сыворотке крови указывает на глубокий цитолиз. Из других признаков цитолиза следует отметить снижение протромбинового индекса и синтеза альбумина.

2-я группа включает ряд методов. О наличии холестаза можно судить по увеличению активности экскреторных ферментов, т. е. таких ферментов, которые в норме выделяются в желчные пути, а при возникновении в них препятствий попадают в кровь. К таким ферментам относят щелочную фосфатазу (ЩФ), 5-нуклеотидазу (5НУК) и др.

Копрологический метод. Этот метод используют для оценки функционального состояния органов пищеварения, обнаружения воспалительных изменений в толстой кишке (шигеллез, эшерихиоз, сальмонеллез и др.), а также для диагностики гельминтозов и протозойных колитов.