3. Лабораторная диагностика клещевого боррелиоза

Прямые методы:

• обнаружение боррелий с помощью темнопольной микроскопии (применяется для определения спонтанной инфицированности клещей боррелиями (исследуется гемолимфа и содержимое кишечника клеща));

• культивирование боррелий на питательных средах;

• полимеразная цепная реакция для обнаружения специфической ДНК (чувствительность не превышает 20%).

Косвенные методы – направлены на определение антител в организме больного:

• ИФА

• РНИФ (диагностический титр – 1:64)

• вестерн-иммуноблоттинг (Western-blot)

Результативность диагностических тестов зависит от модификации, используемого антигена (геновида), от формы и стадии болезни, от предшествующего лечения антибиотиками.

Следует внимательно подходить к интерпретации полученных результатов (табл. 1, 2).

Таблица 1

Причины ложноположительных результатов

Перекрестные антигены	Инфекционные причины: - сифилис - лептоспироз - возвратный тиф - лихорадка Скалистых Гор - инфекции, вызванные ЦМВ, ВЭБ, VZV - туберкулез - представители нормальной микрофлоры полости рта
	Неинфекционные причины: - аутоиммунные заболевания: ревматоидный артрит, диффузные заболевания соединительной ткани - рассеянный склероз - неопрастические процессы - саркоидоз

Неопределенные (сомнительные) результаты возможны при взаимодействии белков боррелий с белками Y.enterocolitica O3, E.coli, C.jejuni, N.meningitidis, H.influenze, пневмококков, стафилококков, M.tuberculosis.

Причины ложноотрицательных результатов:

• иммунодепрессивные состояния (неопрастические процессы, СПИД);

• ранние стадии КБ (на первой стадии антитела методом РНИФ выявляются только у 20%) или поздняя стадия (в 3-й стадии, как и при сифилисе, антитела (АТ) могут не обнаруживаться);

• использование диагностических тест-систем с ограниченным набором антигенов (только, OspA), а у боррелий, персистирующих в организме человека, эти белки отсутствуют

Таблица 2

Характеристика гуморального иммунного ответа при КБ

Стадия	Иммунный ответ
I – ранняя/локализованная инфекция	Начальный ответ IgM (с третьей недели с момента инфицирования) с последующим появлением IgG антител (с 6-й недели с момента инфирования). Часто выявляется серонегативность. IgM антитела часто не определяются при короткой длительности инфекции
II – ранняя диссеминированная инфекция	Иммунный ответ аналогичен таковому на стадии I, с преобладанием IgG антител. Продукция интратекальных антител при нейроборрелиозе.
III – поздняя/персистирующая инфекция	Как правило высокие титры IgG антител при артрите и акродерматите. IgM антитела обычно не выявляются. Продукция интратекальных антител при хроническом нейроборрелиозе.

Если у пациента при неоднократных исследованиях постоянно обнаруживаются IgM (без сероконверсии), то это следует расценивать как ложноположительный результат. Причина этого явления часто остается невыясненной.