10.2.7. Производство вакцин и их контроль

Вакцины производятся на специализированных предприятиях Министерства здравоохранения, на биофабриках (например, акционерных обществ «Иммуноген», «Биопрепарат»), на базе институтов РАМН РФ и других ведомств. Технология и условия производства, качество вакцин определяются промышленными регламентами, техническими условиями, наставлениями и ин­струкциями, утвержденными официальными государственными органами. Принципы технологии изготовления вакцин изложе­ны в главе 6 Каждая серия вакцины проходит контроль на производстве и выборочно контролируется в Государственном контрольном институте медицинских биологических препаратов им.Л.А.Тарасевича.

3. Бактериофаги

Бактериофаги относят к иммунобиологическим препаратам, в которых в качестве активного начала используются фаги, т.е. вирусы, поражающие бактерии путем лизиса и инактивации. Препараты бактериофагов получают путем инфицирования фагом выращенной в производственных условиях культуры бактерий, чувствительной к данному фагу Затем их выделяют из куль­туральной жидкости фильтрата фага, концентрируют, проводят очистку и лиофильную сушку. Бактериофаги выпускают в виде таблеток, в жидком виде, дозируют числом вирусных частиц в

1. мл или в одной таблетке, хранят при 4—8 °С для предотв­ращения инактивации.

Бактериофаги применяют для профилактики и лечения ряда бактериальных, чаще всего кишечных инфекций (холера, брюш­ной тиф, дизентерия). Препарат назначают перорально, а в случаях раневых инфекций (газовая гангрена, стафилококковые) им орошают раны.

Лечебный и профилактический эффект фагов умеренный, поэтому их применяют в комплексе с другими лечебными и профилактическими мероприятиями. Фаги используют также в диагностике бактериальных инфекций с целью их фаготипиро- вания.

4. Эубиотики

Эубиотики относятся к иммунобиологическим препаратам. Они получили широкое применение в медицинской практике для профилактики и лечения дисбактериозов. Эубиотики входят в более обширную группу препаратов пробиотиков, т.е. препара­тов, влияющих на состав и качество микрофлоры человека. К ним, кроме эубиотиков, относятся некоторые антибиотики, ферменты, фармацевтические вещества.

Эубиотики представляют собой живую культуру не­патогенных бактерий, относящихся к нормальным представителям микрофлоры человека. Эубиотики получают путем выращивания бактерий на искусст­венных питательных средах, концентрирования, суш­ки, стандартизации и изготовления готовой формы в виде порошка или таблеток.

В качестве бактерий в эубиотиках чаще всего используют наи­более распространенные в организме человека кишечную палоч­ку, бифидумбактерии, лактобациллы или их комбинации. От­сюда препараты эубиотиков имеют названия «колибактерин», «бифидумбактерин», «лактобактерин», «бификол» и др. Одна доза эубиотиков составляет 10⁷—10® микробных клеток. В последнее время налажен выпуск кисломолочных продуктов (кефир, ря­женка, йогурт), содержащих эубиотики. Как и другие иммуно­биологические препараты, эубиотики готовят и контролируют по утвержденной нормативно-технической документации.

Эубиотики назначают по указанию врача после бактериоло­гического исследования материала (содержимого кишечника, урогенитального тракта, верхних дыхательных путей) и выяв­ления характера нарушений нормальной микрофлоры (дисбак­териоза). Эубиотики используют при заместительной терапии и профилактике, так как они восполняют видовой и количествен­ный состав бактерий, нарушенный в результате дисбактериоза.

Препараты эубиотиков применяют перорально 2—3 раза в день длительными курсами (1—6 мес). Профилактика и лечение дисбактериозов с помощью эубиотиков довольно эффективны и безвредны. В России создана крупная промышленная база по производству коммерческих препаратов эубиотиков.

5. Иммуноглобулины и иммунные сыворотки

Вакцинация обеспечивает выработку специфического активного искусственного иммунитета спустя 2—3 нед после первичной прививки и через 2—7 сут после ревакцинации, т.е. вторичного введения вакцины. При необходимости экстренного создания иммунитета, а также для лечения уже развивающейся инфек­ции используют иммунные сыворотки и иммуноглобулины, со­держащие уже готовые антитела.

Иммунные сыворотки получают или от иммунизированных животных (гетералогичные сыворотки), или переболевших, а также вакцинированных людей {гомологичные сыворотки). Гетерологич- ные сыворотки готовят путем гипериммунизации чаще всего лошадей, т.е. путем многократного введения животным больших доз антигена по разработанной схеме. На пике антителообразо- вания у иммунных животных забирают кровь, освобождают ее от форменных элементов и фибрина, фильтруют и стандарти­зируют по концентрации антител (антитоксинов, агглютини­нов, вируснейтрализующих антител и т.д.), содержанию белка и другим свойствам. Полученная таким образом нативная им­мунная сыворотка содержит много балластных белков и имеет относительно низкую концентрацию антител. Поэтому из нее получают иммуноглобулины путем выделения, очистки и кон­центрирования их ферментативным способом в сочетании с диализом (метод «Диаферм»), осаждением спиртом на холоде, хроматографией или иными способами. Иммуноглобулины со­держат меньше балластного белка и имеют более высокую концентрацию антител.

Разработаны также методы получения активных фрагментов иммуноглобулинов, т.е. /^-фрагментов, активных центров (де­терминант) иммуноглобулинов (так называемые доменные им­муноглобулины). Их преимущество заключается в незначительной белковой нагрузке, более высоких специфичности и эффектив­ности препаратов.

Для получения гомологичных иммуноглобулинов и их активных фрагментов используют кровь иммунных (переболевших, вак­цинированных) людей или специально вакцинированных доно­ров, а также плацентарную и абортную кровь.

Иммунные сыворотки, иммуноглобулины и их фрагменты подразделяются на антитоксические, антибактериальные и про­тивовирусные. К антитоксическим относят сыворотки против дифтерии, столбняка, ботулизма, газовой гангрены, т.е. сыво­ротки, содержащие в качестве антител антитоксины, которые нейтрализуют специфические токсины. К антибактериальным сывороткам относят сыворотки, содержащие агглютинины, преципитины, комплементсвязывающие и другие антитела к воз­будителям таких болезней, как брюшной тиф, дизентерия, чума, коклюш и др. Противовирусные сыворотки (коревая, гриппоз­ная, антирабическая и др.) содержат вируснейтрализующие, комплементсвязывающие и другие противовирусные антитела.

Активность иммунных сывороточных препаратов выражают в единицах, определяемых в серологических реакциях нейтрали­зации, агглютинации, преципитации и т.д. Профилактическое и лечебное действие оценивают в опытах на экспериментальных животных (белые мыши, кролики, морские свинки). Например, активность антитоксических сывороток выражают в междуна­родных антитоксических единицах (ME): 1 ME — это количе­ство антител, нейтрализующее определенное количество Dim специфического токсина. Например, 1 ME противостолбнячной сыворотки — это количество антитоксина, нейтрализующее 100 Dim токсина для белой мыши. Противостолбнячная сыворот ка обычно содержит 3000 МЕ/ил.

Иммунные сыворотки и иммуноглобулины созда­ют пассивный специфический иммунитет практи­чески сразу же после их введения.

Этот иммунитет сохраняется при введении гомологичных сыво­роток до 1—1,5 мес и гетерологичных — до 10—20 сут (в ор­ганизме чужеродные белки быстрее разрушаются). Иммунные сывороточные препараты вводят, как правило, внутримышечно в больших дозах и как можно раньше после вероятного инфи­цирования. Разработаны препараты и для внутривенного введе­ния. Перед инъекцией сывороточных препаратов, как гетероло­гичных, так и гомологичных, обязательна постановка внутри- кожной пробы на чувствительность (сенсибилизацию) к препа­рату.

В случае положительной пробы иммунные сыворот­ки вводят по Безредке.

Пассивную иммунопрофилактику применяют в случае необхо­димости экстренного создания иммунитета у лиц, контактиро­вавших с больными в инфекционных очагах, или при подозре­нии на возможное инфицирование. Сывороточные препараты используют также для иммунотерапии инфекционных болезней в сочетании с антибактериальными, антивирусными препарата­ми и другими способами терапии.

6. Иммуномодуляторы

В медицине широкое применение нашла большая группа лекар­ственных средств, влияющих на функции иммунной системы. Эти препараты объединены в группу под названием иммуномо­дуляторов.

К иммуномодуляторам относятся различные веще­ства химической и биологической природы, кото­рые влияют на иммунокомпетентные клетки (7-, В-, /4-системы) и их кооперативное взаимодействие, а также на течение иммунологических процессов, активируя, подавляя или нормализуя их. В зависи­мости от этого иммуномодуляторы делят на 3 груп­пы: а) иммуностимуляторы; б) иммуносупрессанты; в) средства иммунозаместительной терапии.

Действие иммуномодуляторов может быть специфическим и неспецифическим. Иммуномодуляторы по происхождению делят на гетерологичные и гомологичные. К гомологичным относят природные, вырабатываемые самим организмом вещества, уча­ствующие в естественном процессе осуществления и регулиро­вания иммунных процессов. Поэтому гомологичные иммуномо­дуляторы называют эндогенными. К ним относятся вырабатыва­емые в организме человека так называемые регуляторные пеп­тиды: интерлейкины, интерфероны, миелопептиды, гормоны тимуса, фактор некроза опухолей. Эндогенные иммуномодуляторы имеют белковую природу (олигопептиды) и четко присущую функциональную направленность действия. Они регулируют (ак­тивируют, супрессируют или нормализуют) работу отдельных этапов и весь процесс иммуногенеза в целом (см главу 9).

К гетерологичным иммуномодуляторам относятся разнообраз­ные по природе, источникам получения и принципам действия на иммунную систему вещества, которые, однако, не являются естественными, т.е. свойственными организму человека. Гетеро­логичные иммуномодуляторы действуют на иммунокомпетент­ные клетки (7-, В-, /4-системы), течение биологических и биохимических процессов организма, активируя или подавляя функцию клеток или процессов, что в конечном итоге отра­жается на функции иммунной системы в целом.

К гетерологичным иммуномодуляторам относятся некоторые антибиотики (циклоспорин /4), такие химические вещества, как левамизол и мурамилдипептид (фармакологический препарат ликопид), левакадин (2-карбамоплазипирид), нуклеинат натрия, полисахариды и ЛПС микробного происхождения (пирогенал, продигиозан, сальмазан и др.). К иммуномодуляторам следует отнести также антилимфоцитарную сыворотку, подавляющую активность лимфоцитов, и гормоны (адренокортикостероидные), оказывающие общеспецифическое действие на иммунную сис­тему.

Иммуномодуляторы в зависимости от их природы получают методами биотехнологии из растительного (женьшень), живот­ного (антилимфоцитарная сыворотка, гормоны) сырья, биосин­тезом при культивировании бактерий и грибов (антибиотики, полисахариды) или химическим синтезом (мурамилдипептид). Эн­догенные иммуномодуляторы (интерлейкины, интерфероны и другие регуляторные пептиды) получают, как правило, генно- инженерным методом (см. главу 6).

Иммуномодуляторы применяют при нарушениях функции иммунной системы той или иной этиологии: при первичных и вторичных иммунодефицитах, онкологических заболеваниях, ал­лергиях, иммунопатологических процессах, при трансплантации органов и тканей, инфекционных болезнях. Выбор того или иного иммуномодулятора определяется характером нарушения иммун­ной системы, а также механизмом и направленностью действия иммуномодулятора (см. главу 9).