Морфофункциональная атипия малигнизированных клеток на примере опухолей мочевого пузыря. 1 - нейтрофильный лейкоцит; 2 — опухолевая клетка с выраженными вакуолями в цитоплазме и гипертрофированным ядром; 3 - полиморфизм опухолевых клеток; 4 — многоядерная клетка; 5 - базофилия цитоплазмы; 6 — атипичный митоз опухолевых клеток.

Тема 9. Лихорадка

Лихорадка — типовой патологический процесс, развивающийся у высших гомойотермных животных и человека на воздействие пирогенных раздражителей, который характеризуется из­менением терморегуляции и стойким повышением температуры тела. Лихорадка является ти­пичным симптомом различных болезней.

К пирогенным агентам, т. е. факторам, вызывающим лихорадочную реакцию, относят мик­робы и вирусы, продукты их распада и вещества, становящиеся в организме объектом фагоци­тоза или пиноцитоза, а также любые воздействия, повреждающие ткани и вызывающие воспа­ление. Лихорадка бывает инфекционного и неинфекционного происхождения. Инфекционная лихорадка обусловлена экзогенными пирогенами, которые стимулируют в организме образова­ние гранулоцитами и моноцитами эндогенных (лейкоцитарных) пирогенов. Неинфекционная лихорадка (при инфаркте, аллергии и т. д.) связана с образованием эндогенных пирогенов.

Эндогенные пирогены действуют на нейроны терморегулирующего центра через специфи­ческие циторецепторы, что приводит к активации их аденилатциклазной системы, увеличению количества циклического АМФ, который изменяет чувствительность нейронов центра термо­регуляции к Холодовым сигналам: к Холодовым чувствительность повышается, к тепловым — снижается. В перестройке теплорегулирующего центра играет роль также простагландин Е, секретируемый клетками гипоталамуса под влиянием лейкоцитарного пирогена и накапливаю­щийся при лихорадке в спинномозговой жидкости.

Лихорадочный процесс протекает в три стадии. Первая стадия - подъем температуры характеризуется преобладанием теплопродукции над теплоотдачей. Теплоотдача уменьшается в результате сужения периферических сосудов и уменьшения притока теплой крови к тканям торможения потоотделения и снижения испарении. Увеличение теплопродукции происходит за счет повышения тонуса мышц и мышечной дрожи (сократительный термогенез) и активации обмена веществ (несократительный термогенез), что сопровождается повышением основного обмена.

Вторая стадия - стояние повышенной температуры — характеризуется относительным умень­шением теплопродукции за счет снижения сократительного термогенеза и увеличением теплоотдачи благодаря расширению периферических сосудов. Теплоотдача уравновешивается с теплопродукцией на новом, более высоком уровне. Основной обмен сохраняется на повышенном

уровне.

Третья стадия - снижение температуры - обусловлено прекращением действия пирогенов на теплорегулирующий центр и характеризуется относительным преобладанием теплоотдачи над теплопродукцией. Усиливается потоотделение, расширяются периферические сосуды, особен­но при быстром (критическом) падении температуры. Основной обмен нормализуется.

При лихорадке возникают метаболические нарушения и ряд функциональных изменений ¹ сердечно-сосудистой системы (изменения артериального давления, гемодинамики, тахикар­дия), нервной системы, выделительной функции почек, желудочно-кишечного тракта, эндок­ринной и других систем, а также активируются защитно-приспособительные реакции организма, что послужило предпосылкой для разработки методов пиротерапии (лечение искусственно вызванной лихорадкой). Основной обмен при лихорадке повышен, хотя прямой связи между активацией обмена и повышением температуры нет.

При лихорадке могут развиваться патологические изменения в полости рта, обусловленные снижением секреторной функции слюнных желез. Количество выделяемой слюны и содержа­ние в ней а-амилазы и других ферментов уменьшается, реакция слюны часто становится кис­лой. При инфекционной лихорадке язык сухой с обильным налетом, часто растрескивается. Не­редко наблюдается отек, гиперемия слизистой полости рта, развиваются гингивиты, стоматиты, глосситы.

Занятие. ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ

ЛИХОРАДКЕ

Цель занятия: изучить роль пирогенов в развитии лихорадки и показать изменения основного обмена

Опыт 1. Определение основного обмена при лихорадке

Крысу (массой 150—200 г) взвешивают и измеряют ректальную температуру электротермо­метром (или максимальным термометром). Для этого конец термодатчика смазывают вазелином и вводят в прямую кишку на глубину 15—20 мм. Затем определяют основной обмен по методу Брина. Установка для определения основного обмена представляет замкнутую систему опреде­ленного объема, состоящую из герметически закрывающегося эксикатора, соединенного сис­темой трубок с v-образным манометром, заполненным подкрашенной жидкостью (водой). Щ

дно эксикатора предварительно наливают 50 мл свежеприготов­ленного 20% раствора едкого калия (для поглощения выделяе­мой углекислоты). Борт эксикатора и край крышки смазывают

8

Рис. 13.

5

Схема установки для измерения основного обмена у крысы.

4

1

открытое колено манометра, 2 - закрытое колено маномет-3 - измерительная шкала, 4 - корпус эксикатора, 5 - крышка

эксикатора, б - фарфоровая сетка -7-раствор КОН, 8-зажим, 9 - термометр, W-винтовой зажим, регулирующий уровень жидкости в манометре.

герметизирующей смазкой (ланолин или смесь ланолина и вазелина 1:1) и, поместив крысу в эксикатор, тщательно притирают крышку. Устанавливают отметки на манометре соответствен­но уровню жидкости (Рис.13). Резиновую трубку, отходящую от тройника закрывают зажимом и, как только уровень манометрической жидкости начинает снижаться, включают секундомер. Через 3 мин отмечают изменение уровня манометрической жидкости в мм водного столба - Н. Опыт повторяют 3 раза, вычисляют среднее значение Н. Затем эксикатор открывают, извлекают крысу и вводят внутрибрюшинно пирогенал из расчета 0,3—0,5 мкг/кг.

Через 20—30 мин измеряют ректальную температуру и повторяют определение основного обмена. В интервале между определениями основного обмена крышка эксикатора должна быть приоткрыта

Производят расчет основного обмена до и после введения пирогенала. Расчет основного обмена. Объем поглощенного крысой кислорода за 3 мин. определяют по формуле

Vэ=НС,

где Н— средняя величина изменения давления воздуха в мм рт.ст. (1мм рт. ст.==13,6 мм вод­ного столба);

С —константа эксикатора определяется по формуле:

Уэ • (T/T+t)+Vf*a

С= —,

Ро

где Уэ —объем газового пространства эксикатора, включая часть закрытого колена манометра; Т — значение абсолютной температуры 273; t — температура окружающей среды; Vf — объем 20% раствора едкого калия;

РО — 760 мм рт. ст., выраженное в см манометрической жидкости (76x13,6-1033,6).

а — растворимость кислорода в растворе едкого калия (0,027).

Найденное количество кислорода, потребленной крысой за 3 мин, пересчитывают на объем

кислорода, потребленного за сутки (умножить на 480); полученное значение выражают в литрах.

Для расчета обмена в ккал необходимо средний тепловой эквивалент 1 л кислорода (4,8 ккал/л)

умножить на объем кислорода (в л), израсходованный за сутки.

Затем вычисляют основной обмен на 1 м² поверхности тела. Поверхность тела определяется по формуле:

где Q— поверхность тела (см²);

К — константа (для крысы 9,1);

g — масса тела животного (г). Величину поверхности тела крысы можно найти в прилагаемой таблице (стр. 84-85). Сравнивают показатели ректальной температуры до и после введения пирогенала и величи­ны основного обмена. Анализируют результаты и делают выводы.

Опыт 2. Действие пирогенала на фоне угнетения сократительного термогенеза

Крысу взвешивают, измеряют ректальную температуру термометром и определяют исходную величину основного обмена по методу Брина (см. опыт I). Затем подкожно ей вводят диплацин в дозе 2 мг/кг для миорелаксации без выключения дыхания; через 5—10 мин на фоне миорелаксации внутрибрюшинно вводят пирогенал из расчета 0,3—0,5 мкг/кг. Через 20—30 мин вновь измеряют ректальную температуру, определяют и вычисляют основной обмен.

Сравнивают показатели ректальной температуры и основного обмена до и после введения пирогенала на фоне миорелаксации. Анализируют результаты и делают вывод о роли сократи­тельного термогенеза в развитии лихорадки.

Опыт 3. Изменение содержания лейкоцитов крови при лихорадке

У крысы после измерения ректальной температуры (до введения пирогенала) и на высоте развития лихорадки берут кровь для определения содержания лейкоцитов. Крысу помещают в камеру (домик) с отверстием для хвоста, подогревают хвост в стакане с теплой водой (40 — 50°С), обсушивают его, слегка массируют и надсекают кончик. Набирают кровь в смеситель для лей­коцитов до метки «0,5», кончик смесителя вытирают ваткой, заполняют его 3% подкрашенной уксусной кислотой до метки «11».

Смеситель встряхивают в течение 2—3 мин, сбрасывают каплю содержимого и заполняют предварительно подготовленную камеру Горяева. Подсчитывают количество лейкоцитов в 25 больших квадратах, полученное число умножают на 200.

Полученные данные сравнивают, анализируют, делают выводы.

Опыт 4. Изменение поглотительной способности системы мононуклеарных макрофагов после введения пирогенала.

Опыт ставят на двух мышах массой 25 — 30 гр. Одной мыши за час до постановки опыта вво­дят внутрибрюшинно пирогенал из расчета 0,3 - 0,5 мкг/кг, вторая мышь - контрольная.

Поглотительная способность клеток системы мононуклеарных макрофагов определяют по интенсивности фиксации соли железа купферовскими клетками печени, макрофагами селезен­ки. Для этого животных наркотизируют 1 % гексеналом (0,8 — 1,0 мл на 100 г массы); фиксируют на препаравальных дощечках и медленно вводят в сердце по 0,3 — 0,5 мл 3% раствора хлорного железа. Животных забивают декапитацией через 10 мин, вскрывают брюшную полость, берут кусочки печени и селезенки, тщательно отмывают их от крови физиологическим раствором. С помощью двух лезвий от безопасной бритвы с проложенными между ними тремя слоями писчей бумаги делают срезы печени и селезенки, помещают их в чашки Петри с 5% раствором соляной кислоты на 1 мин, и затем на 2 мин в 5% раствор желтой кровяной соли.

В результате реакции между хлорным железом, фиксированным макрофагами и желтой кро­вяной солью в срезах печени и селезенки образуется берлинская лазурь (голубая окраска). Срезы промывают дистиллированной водой и рассматривают под стереоскопическим микроскопом (МБС-1) или лупой; сравнивают степень окраски в опыте и контроле. Анализируют полученные результаты и делают вывод об увеличении поглотительной способности клеток системы моно­нуклеарных макрофагов после введения пирогенала.