Перепонку отмывают водой и после восстановления кровотока наносят на нее 5% раствор НО. Через 20-30 сек. кислоту смывают водой и вновь действуют на перепонку адреналином. От­мечают отсутствие эффекта адреналина на сосуды в зоне воспаления. Анализируют результаты, делают выводы.

Опыт 4. Паралич сосудодвигателыгых нервов воспаленной ткани. Демонстрация.

У кролика (лучше белой масти) с обеих сторон на шее отпрепаровывают сосудисто-нервные пучки, симпатические нервы берут на лигатуры и перерезают. Возникает артериальная нейро-паралитическая гиперемия обоих ушей. Затем одно ухо опускают в стакан с горячей водой (60-70"С), развивается острое воспаление. Отмечают, что воспалительная гиперемия отличается от артериальной нейропаралитической гиперемии - при воспалительной

гиперемии резче выражено расширение сосудов и рисунок их смазан вследствие расширения капиллярной сети.

Поочередно раздражают индукционным током (или пощипывая пинцетом) периферические концы перерезанных симпатических нервов с той и другой стороны, наблюдая за изменением окраски ушей. Раздражение симпатического нерва со стороны неповрежденного уха вызывает сужение сосудов и побледнение уха. Раздражение симпатического нерва со стороны воспален­ного уха не приводит к изменению просвета сосудов, поскольку при воспалении происходит выключение вазоконстрикторов.

Затем кролику внутривенно вводят 0,2 мл 0,1% раствора адреналина. Контрольное ухо ста­новится бледным из-за спазма сосудов (сосудосуживающий эффект адреналина). Воспаленное ухо остается по-прежнему красным, так как в очаге воспаления снижается чувствительность со­судов к адреналину.

Занятие 2. Нарушение обмена веществ и механизмы защиты при воспалении

Опыт 1. Определение рН гнойного и ихорозного экссудата электрометрическим методом с помощью лабораторного рН-метра

Принцип электрометрического метода определения рН и регистрации электродвижущей силы основан на измерении силы, зависящей от активности ионов водорода в испытуемом растворе. При погружении электрода рН-метра в исследуемую жидкость между поверхностью электрода и раствором происходит ионный обмен и возникает разность потенциалов, которая регистрируется по шкале прибора, градуированного в единицах рН.

Правила работы на рН — метре изложены в специальной инструкции.

Подготовив прибор к работе, определяют рН исследуемых жидкостей - фильтратов гнойно­го и ихорозного экссудата, а также сыворотки крови. После каждого определения необходимо тщательно промывать электроды в дистиллированной воде. После окончания работы электроды отмывают и выключают рН-метр.

Анализируют полученные результаты, делают выводы.

Опыт 2. Определение протеолитической активности гнойного экссудата

В 8 пронумерованных пробирок наливают по 1 мл 0,1% раствора яичного альбумина. В пер­вые 7 пробирок прибавляют свежеприготовленный фильтрат гнойного экссудата в возрастаю­щем количестве: в первую пробирку - одну каплю, в каждую последующую на две капли больше. Физиологическим раствором выравнивают объемы во всех пробирках. В восьмую (контроль­ную) пробирку наливают только 13 капель физиологического раствора (см. схему).

Схема определения протеолитической активности гнойного экссудата

компонент	№ пробирки
	1	2	3	4	5	6	7	Ц
0,1% р-р яичного альбумина	I	I	I	I	I	1	I	1
фильтрат гнойного экссудата	1	3	5	7	9	11	13	_
физиологический раствор	12	10	оо	6	4	2	-	13

Содержимое пробирок встряхивают и ставят в термостат (37°С) на 30 минут. Затем во все пробирки прибавляют по одной-две капли 20% раствора сульфосалициловой кислоты (реактив на белок).

По степени выпадения осадка судят о переваривающей способности гнойного экссудата. В контрольной пробирке № 8 отмечается осаждение альбумина (раствор мутный). В пробирках, где произошло полное расщепление альбумина, осадка нет (раствор прозрачный). Определяют протеолитическую активность гнойного экссудата, выраженную в количестве капель гноя, не­обходимого для полного расщепления 1 мл 0,1 % альбумина в течение 30 минут при 37°С. Анали­зируют результаты, делают выводы.

Опыт 3. Макрофагоцитоз. Фагоцитоз птичьих эритроцитов в брюшной полости морской свинки

За 24-48 часов до опыта в брюшную полость морской свинки вводят 15 мл стерильного мясо-пептонного бульона, который вызывает асептическое воспаление брюшины. Развивается харак­терное для серозных оболочек экссудативное воспаление и в брюшной полости накапливается экссудат, содержащий большое количество подвижных фагоцитов (макрофагов). Свинку при­вязывают брюшком кверху и вводят в брюшную полость 5 мл 2% взвеси птичьих эритроцитов в физиологическом растворе, подогретом до 37-38°С. Через 15-20 мин делают пункцию брюшной полости и пастеровской пипеткой набирают перитонеальную жидкость, состоящую из смеси экссудата и взвеси птичьих эритроцитов. Каплю этой жидкости помещают на предметное стек­ло, делают мазок, высушивают его на воздухе и фиксируют в 50% смеси спирта и эфира в те­чение трех минут. После фиксации мазок подсушивают на воздухе и красят по Романовскому (азур-эозин) в течение 20-25 минут. Препарат тщательно промывают проточной водой и про­сушивают фильтровальной бумагой. Подготовленный мазок рассматривают под микроскопом с иммерсионной системой (ок. X 90). В препарате обнаруживают значительное количество фа­гоцитов - макрофагов (в случае развития гнойного воспаления - нейтрофилов) и птичьих эрит­роцитов, которые хорошо видны благодаря наличию в них ядра. В препарате находят все стадии фагоцитоза, начиная с аттракции и частичного поглощения эритроцита фагоцитом и кончая об­наружением в фагоците остатков ядра, что указывает на завершение фагоцитоза. (Рис.8). Под­считывают фагоцитарное число. Для этого находят в мазке 100 макрофагов и сосчитывают чис­ло поглощенных ими эритроцитов. Полученное количество эритроцитов, разделенное на число

1 2 3 4

подсчитанных фагоцитов (100) и составляют фагоцитарное число. При подсчете фагоцитарного

числа следует сосчитать все фагоциты, попадающие в поле зрения.

Результаты опыта записывают. Зарисовывают стадии фагоцитоза. Обсуждают и делают вы­воды.

Опыт 4. Барьерная функция воспалительного очага

Фагоцитоз, нарушения микроциркуляции, повышение проницаемости стенок сосудов и сорбционных свойств поврежденных тканей формируют барьерные функции воспалительного очага, в котором скапливаются и обезвреживаются циркулирующие в крови различные токси­ческие вещества, микробы, продукты их жизнедеятельности.

Для демонстрации этого эффекта за несколько дней до опыта крысе вводят под кожу бед­ра 0,5-1 мл стерильной 50% эмульсии скипидара в вазелиновом или растительном масле, в ре­зультате чего в месте введения развивается острое гнойное асептическое воспаление. Вторая крыса служит контролем. За 24-48 часов до занятия обеим крысам внутривенно вводят 2-3 мл 1% раствора коллоидной краски - три Пановой сини на физиологическом растворе. На занятии наблюдают, что у опытной крысы свободные от шерсти участки тела почти не окрашены, т. е, вся краска скопилась в зоне воспаления в результате повышения проницаемости биологических мембран в очаге воспаления, венозного застоя, лимфостаза и фагоцитоза. Свободные от шерсти участки тела контрольной крысы равномерно окрашены в синий цвет. Обсуждают результаты, делают выводы.

Занятие 3. СИСТЕМНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ В ОРГАНИЗМЕ ПРИ ВОСПАЛЕНИИ

Опыт 1. Изменения в периферической крови при развитии острого воспалительного процесса у кролика

Для опыта берут двух кроликов: одному из них за три-пять дней до занятия вводят под кожу бедра 3 мл стерильной 50% эмульсии скипидара в растительном масле, в результате чего разви­вается гнойное асептическое воспаление. Второй кролик используется в качестве контроля. У обоих кроликов измеряют ректальную температуру и берут кровь из краевой вены уха для опре­деления количества лейкоцитов и СОЭ.

Методика подсчета лейкоцитов. В смеситель для лейкоцитов набирают кровь до метки 0,5; кончик смесителя вытирают ваткой и заполняют его 2% раствором подкрашенной уксусной кислоты до метки «II» (уксусная кислота разрушает эритроциты). Смеситель встряхивают в те­чение 1-2 мин. Первую каплю из смесителя сбрасывают, а следующую небольшую каплю вносят в предварительно подготовленную камеру Горяева.