- •Гоу впо «московский государственный медико-стоматологический университет федерального агенства по здравоохранению и социальному развитию»
- •Тема 3. Барьерные функции организма и их нарушения 18
- •Тема 4. Патофизиология острого повреждения клетки
- •Тема 5. Острое воспаление ........25
- •Тема 6. Нарушение течения раневого процесса .......31
- •Тема 11. Гипоксия 50
- •Часть II. Частная патофизиология 53
- •Тема 12. Патофизиология системы крови 53
- •Тема 13. Патофизиология свертывающей системы крови gj
- •Тема 14. Патофизиология внешнего и тканевого дыхания 68
- •Тема 15. Недостаточность сердца и нарушение электрогенеза миокарда 73
- •Тема 16. Патофизиология желудочно-кишечного тракта 85
- •Тема 17. Патофизиология печени 8?
- •Часть I. Общая патофизиология
- •Тема 1. Моделирование болезней и патологических процессов
- •Тема 2. Патологическая физиология периферического кровообращения
- •Занятие 1. Артериальная и венозная гиперемия
- •Тема 3. Барьерные функции организма и их нарушения
- •Внутренние (гистогематические) барьеры (ггб)
- •Тема 4. Патофизиология острого повреждения клетки
- •Тема 5. Острое воспаление
- •Особенности воспалительных процессов в челюстно-лицевой области
- •Воспаление пульпы зуба (пульпит)
- •Занятие 1. Сосудистые изменения при воспалении
- •Занятие 2. Нарушение обмена веществ и механизмы защиты при воспалении
- •Тема 6. Нарушение течения раневого процесса
- •Занятие. Нарушение заживления кожной раны
- •Тема 7. Аллергия
- •Занятие 1. Патогенез аллергии немедленного типа
- •Тема 8. Патофизиология злокачественного роста
- •Тема 9. Лихорадка
- •Тема 10. Патофизиология водного обмена. Отек
- •Занятие. Патогенез отеков
- •Тема 11. Гипоксия
- •Занятие. Патогенез гипоксической гипоксии
- •Часть II. Частная патофизиология
- •Тема 12. Патофизиология системы
- •Класс морфологически дифференцированных клеток гранулопоэза
- •Плазматические клетки
- •Периферическая кровь при гиперхромных анемиях
- •Костный мозг при гиперхромных анемиях
- •Содержание гемоглобина (в процентах по Сали) / удвоенные две цифры числа эритроцитов
- •Тема 13. Патофизиология свертывающей системы крови
- •Воспроизведение механической желтухи
- •Опыт I. Определение времени рекальцификации плазмы
- •Тема 14. Патофизиология внешнего и тканевого дыхания
- •Тема 15. Недостаточность сердца и нарушение электрогенеза
- •Миокарда
- •Занятие 1. Экспериментальная недостаточность сердца
- •Занятие 3. Патология сердечного ритма
- •Изучение типических электрокардиограмм
- •Нарушение автоматизма
- •Нарушение возбудимости
- •Нарушение проводимости
- •Мерцание и трепетание предсердий
- •Желудочковым комплексом)
- •Тема 16. Патофизиология желудочно-кишечного тракта
- •Занятие. Патогенез острого гастрита
- •Занятие 2. Патогенез острого энтерита
- •Тема 17. Патофизиология печени
- •Занятие. Нарушения функции печени при экспериментальном гепатите. Патогенное действие желчи
- •Тема 18. Патофизиология почек
- •Тема 19.Патофизиология нервной системы
- •Тема 20. Патофизиология зубочелюстной системы. Патология пародонта
- •Занятие. Экспериментальный пародонтоз
- •Тема 21. Клеточные механизмы антимикробной защиты полости рта
- •Тема 22.Патофизиология эндокринной
лизания
любого типа может быть определена по
отношению к самым
различным аллергенам:
бактериальным,
лекарственным, пищевым, бытовым и др.
Для
постановки реакции бласттрансформации
in
vitro
у больного
в асептических условиях берут 5-10
мл
крови в пробирку, содержащую 100-200
ЕД
гепарина, осторожно перемешивают и
помещают на 60
мин
в термостат при температуре 37°С
для осаждения эритроцитов. После
инкубации надосадочный слой плазмы,
обогащенный лимфоцитами отсасывают в
стерильную пробирку. Определяют число
лимфоцитов в 1
мкл.
Затем
взвесь лимфоцитов разводят питательной
средой 199
таким
образом, чтобы в 1
мл
содержался 1-2
млн
лимфоцитов. Приготовленную лимфоцитарную
взвесь
разливают в стерильные флаконы
по 1
мл,
добавляют 0,1
мл
предварительно оттитрованного аллергена.
Флаконы закрывают пробирками и помещают
в термостат при температуре 37°С
на
72
часа.
Затем
готовят мазки, фиксируют и окрашивают
по Романовскому. Интенсивность
бласттрансформации оценивается
путем подсчета бластных клеток на 1000
клеток
и определения их процентного содержания.
Реакция
оценивается как положительная, если
число бластных форм не менее 4%
от
общего
числа
культивируемых клеток; максимальное
число бластных клеток при действии
специфического аллергена может
достигать 35%.
Студенты
на занятиях получают готовые мазки,
которые изучают под микроскопом с
иммерсионной системой (об. X
90), подсчитывают
100-200
клеток
и
определяют
процентное содержание бластных
форм. Результаты анализируют и делают
выводы.
В
развитых странах злокачественные
новообразования стоят на втором месте
по причине смертности людей, уступая
только сердечно-сосудистым заболеваниям.
Опухоль
представляет
собой
не координированное патологическое
очаговое разрастание клеток, выходящее
за пределы нормального плана построения
организма. Отличительная особенность
опухоли заключается в том, что разрастание
опухолевой ткани продолжается и после
прекращения действия вызвавших его
причин. Этим опухоль отличается от
других форм патологии тканевого
роста, таких, как гипертрофия, гиперплазия
и
регенерация.
Кроме того, опухолевый рост не
координирован с организмом, не
соответствует его запросам и потребностям.
Рост
числа злокачественных новообразований
обусловлен многими причинами: во-первых,
совершенствованием диагностики,
во-вторых, более тщательным учетом
онкологических больных, в-третьих,
увеличением средней продолжительности
жизни и
в-четвертых,
загрязнением окружающей среды
канцерогенами.
Важнейшими
биологическими особенностями, присущими
опухолям, являются:
-
относительная автономность и
нерегулируемость роста опухоли.
Нормальные ткани имеют «лимит»
клеточного деления, т. е. предел возможной
кратности удвоения клеточной массы,
после чего деление прекращается, и
клетки
погибают. Опухолевые клетки размножаются
бесконечно («ускользают от старения»).
У
опухолевых
клеток понижено свойство контактного
торможения со стороны
соседних
клеток.
-
снижение уровня дифференцировки
опухолевой ткани, сближение ее по ряду
признаков с эмбриональной тканью.
Различают морфологическую, биохимическую,
биофизическую, функциональную и
иммунологическую анаплазию.
-
наследуемость изменений: передача
клеткой, подвергшейся опухолевой
трансформации, этих свойств дочерним
клеткам, что приводит к образованию
клона опухолевых клеток.
-
инвазийный и деструктивный рост -
основной критерий злокачественности
опухоли. Это свойство опухоли связано
с выделением токсических веществ и
протеолитических ферментов.
-
метастазирование, или появление новых
очагов опухолевого роста.
-
прогрессия опухолей, т. е. способность
в процессе развития постоянно менять
свои признаки: морфологическую
структуру, биохимические характеристики
и антигенный спектр.
Вместе
с тем, опухолевый очаг возникает
из
одной
трансформированной
клетки. Прогрессия характеризуется
повышением независимости опухоли от
организма и усилением злокачествен*
ности.
Причиной
развития опухоли являются химические,
физические и биологические факторы.
Химические канцерогены делятся на
экзогенные и эндогенные. Их канцерогенный
эффект j
зависит
от химической структуры, дозы, метаболизма
в организме. К типичным химическимТема 8. Патофизиология злокачественного роста
канцерогенам,
вызывающим рак в челюстно-лицевой
области, относятся продукты возгонки
табака
при курении, вредные привычки (жевание
листьев бетеля с известью и др.).
К
физическим факторам в этиологии опухолей
относится рентгеновское излучение,
радиоактивное облучение, ультрафиолетовое
облучение.
К
биологическим факторам возникновения
опухолей относятся онкогенные вирусы.
ДНК-содержащие вирусы, как правило,
индуцируют инфекционные процессы и,
кроме того, они способствуют превращению
нормальных клеток в злокачественные.
В настоящее время установлено, что
в клеточном геноме животных и человека
находятся также потенциальные онкогены
- протоонкогены. Реализация действия
в клетке онкогена (клеточного, вирусного
или мутационного) происходит при
дополнительном действии на клетку
канцерогенов, которые выступают в
качестве
инициирующих факторов. Имеются и
дополнительные условия развитая
опухолей: характер питания, наследственность
и другие.
Между
развивающейся опухолью и целостным
организмом существует тесная взаимосвязь.
В
патогенезе
опухолевой болезни большое значение
имеют регуляторные системы организма:
нервная, эндокринная и иммунологическая,
от которых зависит не только вероятность
развития опухоли, но и ее прогрессирование,
а также изменения в органах и системах,
обусловленных системным воздействием
новообразования.
Занятие.
МЕТОДЫ
ТРАНСПЛАНТАЦИИ, ВОСПРОИЗВЕДЕНИЯ И
МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА
ОПУХОЛЕЙ
Цель
занятия: познакомиться с методами
трансплантации и воспроизведения
злокачественных
опухолей
и изучить
морфофункциональную
характеристику опухолевых клеток.
Трансплантация
является важным методом изучения
злокачественного роста в эксперименте.
К
основным
правилам трансплантации относятся: 1
- клетки перевиваемой опухоли должны
быть живыми; 2 - пересадка проводится
только в
пределах
одного
вида животных; 3
- молодой возраст реципиента; 4
-
соблюдение правил асептики и антисептики;
5 - небольшое повреждение тканей
реципиента; 6 -маленькие кусочки
трансплантируемой опухоли.
Виды
трансплантации и другие методы
воспроизведения опухолей
Трансплантация
используется прежде всего для изучения
вопросов, связанных с метаста-зированием
опухоли. С этой целью берется взвесь
клеток или кусочек опухоли и переносится
на другое место того же животного,
затем изучается рост опухоли в месте
введения.
Изотрансплантация
- перевивка опухоли от одного животного
другому одной и той же инбредной
(«чистой») линии. Животные инбредной
линии отличаются одинаковыми
наследственными свойствами.
Гомотрансплантация
(аллотрансплантация) - это пересадка
опухоли в пределах одного и того же
вида.
Гетеротрансплантация
(ксенотрансплантация) - перевивка
опухоли от животного одного вида
животному другого вида. Такая перевивка
требует предварительного преодоления
межви
дового
барьера
(облучение, введение
больших доз кортизона), что является
трудной задачей. В лаборатории
Г.Я.Светмолдавского таким путем удалось
перевить опухоль человека крысе и
хомяку.
Методами
трансплантации изучаются разнообразные
биологические, биохимические,
морфологические и другие вопросы
канцерогенеза, разрабатываются новые
методы лечения.
Кроме
трансплантации в
экспериментальной онкологии используются
также методы индуцирования опухолей
путем длительного воздействия на
организм химических соединений и
физических факторов. Этот метод является
основным для оценки канцерогенной
активности химических веществ,
воздействий факторов окружающей среды,
пищевых продуктов, лекарственных
препаратов и для изучения других
вопросов онкологии.
Методом
экспериментальной онкологии является
также эксплантация опухолей, что
представляет собой выращивание вне
организма опухоли в специальных сосудах
с питательной средой.
Выращивание
культуры опухолевой ткани является
ценным методическим приемом для решения
важных
теоретических и практических задач
онкологии, прежде всего для изучения
патогенеза и разработки методов лечения.
Метод эксплантации используется также
для иссле-
лования
этиологических
факторов. Для этого используется
культура
здоровых тканей человека
и
животных,
на которую воздействуют
канцерогенными
факторами, В отличие от индукции метод
эксплантации позволяет изучить влияние
самих онкологических факторов, а также
различных
условий возникновения опухолей вне
организма при отсутствии влияния
интегрирующих регулятором систем
организма.
Опыт
1.
Воспроизведение
опухолей путем перевивки клеточной
взвесью (трансплантация опухолевой
ткани)
Для
успешной перевивки опухоли клеточной
взвесью требуется соблюдение
определенных
условий: 1
—
асептика; 2
—
использование жизнеспособных клеток
опухоли (без явлений некроза); 3
-
проводится в пределах одного вида
животных.
Работу
выполняют на мышах. Для перевивки
опухоли используют быстрорастущие
штаммы опухолей. Животное с не
распавшейся опухолью, наркотизируют
гекссналом, фиксируют, выстригают
шерсть над опухолью, протирают место
спиртом и смазывают йодной настойкой,
разрезают кожу и извлекают опухоль.
Вырезают кусочек опухоли, промывают
стерильным физиологическим раствором
в чашке Петри и затем измельчают
ножницами кусочек опухоли в небольшом
количестве физиологического раствора
до получения гомогенной массы. Полученную
взвесь клеток набирают в шприц и вводят
1-2
мл
взвеси под кожу интактной мыши, у
которой
предварительно в месте инъекции
выстригают шерсть, до и после инъекции
кожу смазывают йодной настойкой. Через
несколько дней после трансплантации
под кожей у мышей с привитой опухолью
прощупывается уплотнение ткани, которое
в дальнейшем увеличивается в размерах,
затем размягчается и животное погибает.
Опыт
2. Перевивка асцитной
карциномы Эрлиха мышам
Фиксируют
мышь с асцитной формой карциномы Эрлиха,
брюшную стенку смазывают йодной
настойкой. Берут шприц с иглой и
прокалывают брюшную полость, насасывают
примерно 0,2
мл
асцитической жидкости с раковыми
клетками.
Для
перевивки используют интактную мышь,
которой вводят внутрибрюшинно
асцитичес-кую жидкость с раковыми
клетками. Примерно через 10
дней
у
интактной
мыши из-за размножения раковых клеток
накапливается асцитическая жидкость.
Через три недели мышь погибает от
раковой кахексии.
На
разных сроках развития раковых клеток
можно брать асцитическую жидкость,
готовить мазки, окрашивать их и
исследовать под микроскопом.
Опыт
3. Морфофункциональная атипия
малигнизнрованных клеток
В
работе используют готовые гистологические
препараты злокачественных опухолей.
На препарате находят злокачественные
клетки, зарисовывают их, обращая внимание
на следующие 1 характерные признаки:
1 -
гиперхромию и увеличение размеров ядра
в результате усиленного
синтеза ДНК;
-
гипертрофию и увеличение числа ядрышек
вследствие интенсивного синтеза РНК;
-
выраженную базофилию цитоплазмы из-за
повышения содержания белков;
-
частые, а иногда и атипичные митозы;
-
полиморфизм опухолевых клеток
(рис. 12).
На
препаратах
подсчитывают 50-100 клеток и вычисляют
«индекс злокачественности» -
отношение
числа малигнизнрованных клеток к
общему
количеству
клеточных элементов.
Результат вносят в протокол, делают
выводы.