Определение подлинности

1. ИК-, УФ -спектрофотометрия

2. Реакции на пиридиновый цикл

Для испытания препаратов на подлинность ГФ Х рекомендует общую реакцию на производные пиридина с 2,4-динитрохлорбензолом. Как и другие соединения третичного азота, эти препараты образуют окрашенные осадки с раствором фосфорномолибденовой кислоты и некоторыми другими осадительными (общеалкалоидными) реактивами.

• Реакции с общеалкалоидными реактивами

• Реакция Цинке

3. Реакции на производные гидразина (с n-диметиламинобензальдегидом после щелочного гидролиза)

Гидразин, образующийся при щелочном гидролизе изониазида, обнаруживают цветной реакцией с n-диметиламинобензальдегидом в кислой среде. Возникает желто-оранжевая окраска, обусловленная конденсацией альдегида и гидразина с образованием хиноидного катиона:

желто-оранжевая окраска

4. Реакции, основанные на восстановительных свойствах

Для испытания подлинности изониазида и ниаламида используют восстановительные свойства, обусловленные у изониазида и ниаламида наличием остатка гидразина в молекуле препарата.

При взаимодействии изониазида с аммиачным раствором нитрата серебра выделяется желтый осадок, а при нагревании на стенках сосуда осаждается серебро, т.е. происходит реакция «серебряного зеркала»:

• Реакция «серебряного зеркала»

5. Цветная реакция с раствором сульфата меди (II)

Вначале образуется медная соль изониазида (голубого цвета), а затем происходит гидролиз и окисление гидразида солью меди (II), что сопровождается изменением окраски раствора от голубой до изумрудно-зеленой и грязно-желтой. Наблюдается выделение пузырьков газа (азота), а ион меди (II) восстанавливается до оксида меди (I):

Кроме того, изониазид дает цветную реакцию со щелочным раствором нитропруссида натрия. Появляется оранжевое окрашивание, которое после добавления соляной кислоты переходит в вишневое.

6. Фтивазид способен образовывать под действием растворов кислот и щелочей соединения, имеющие различную окраску. Так, спиртовой раствор фтивазида от добавления раствора щелочи приобретает оранжево-желтое окрашивание. Последующее постепенное прибавление раствора соляной кислоты приводит вначале к ослаблению, а затем к усилению окраски до оранжево-желтой (за счет образования четвертичной соли с атомом азота в пиридиновом цикле):

7. Реакция гидролиза фтивазида

При нагревании раствора фтивазида в разведенной соляной кислоте происходит его гидролиз с образованием гидразина, изоникотиновой кислоты и ванилина. Ванилин легко обнаружить по характерному сильному запаху:

Доброкачественность

При испытании доброкачественности препаратов изоникотиновой кислоты обнаруживают наличие в них примесей исходных продуктов синтеза. В изониазиде методом ТСХ обнаруживают примесь свободного гидразина (не более 0,02%). Во фтивазиде определяют примеси гидразида изоникотиновой кислоты нитритометрическим методом и ванилина (нейтрализацией).

Количественное определение

1. Фтивазид

• Неводное титрование (титрант - 0,1 н. раствор хлорной кислоты, индикатор - кристаллический фиолетовый). Фтивазид предварительно растворяют в смеси муравьиной кислоты и уксусного ангидрида (2:30):

• Йодатометрия (после предварительного гидролиза в солянокислой среде). Выделяющийся при гидролизе гидразин окисляют йодатом калия в присутствии хлороформа. Образующийся йод извлекают хлороформом. При последующем титровании йод превращается в бесцветный хлорид йода (слой хлороформа обесцвечивается):

5H₂N-NH₂ + 4KIO₃ + 4HCl → 5N₂↑ + 2I₂ + 4KCl + 12H₂O

KIO₃ + 2I₂ + 6HCl → 5ICl + KCl + 3H₂O

• Нитритометрия с внутренними индикаторами, (Л.Н. Гусева)

• УФ-спектрофотометрия

• Фотометрия