Определение содержания гемоглобина крови (гемоглобинометрия)

Существует несколько методов гемоглобинометрии: а) колориметриче­ский; б) газометрический; в) по содержанию железа в крови; г) по относительной плотности. Из них клиническое применение получил лишь колориметрический метод, разработанный в XIX веке Сали, Говерсом и Велькером. Он основан на способности гемоглобина крови при хи­мическом взаимодействии с хлористоводородной кислотой и другими реактивами давать цветные производные. При этом сравнивают интен­сивность полученной окраски с цветом стандарта и на этой основе.су­дят о концентрации гемоглобина крови.

В настоящее время гемоглобинометрия обычно производится при по­мощи гемометра ГС-3 (Сали). В среднюю часть гемометра ставят гра­дуированную пробирку, с обеих сторон которой находятся запаянные пробирки со стандартным окрашенным раствором. В градуированную пробирку вливают исследуемую кровь (20 мкл), смешивают ее с деци- нормальным раствором хлористоводородной кислоты, отчего образуется солянокислый гематин, дающий бурое окрашивание (на это уходит 5мин). Затем в пробирку добавляют дистиллированную воду до мо­мента совпадения по цвету раствора гемина с цветом стандарта в за­паянных ампулах. Концентрацию гемоглобина в крови учитывают по делениям шкалы градуированной пробирки в единицах по Сали или в г % (г/л).

В нашей стране принято такое исчисление; 100 % гемоглобина по Сали соответствует величине 16,7 г%. Иными словами, 1 г% гемо­глобина равен 6% по Сали (коэффициент пересчета — 6). В соответ­ствии с СИ концентрацию гемоглобина крови пересчитывают таким образом: (г %) X 0,6206 = (ммоль/л)

(ммоль/л) X 1,611 = (г %).

По СИ концентрацию гемоглобина в крови можно выражать в еди­ницах г/л. Пересчет тогда производится из соотношения:

1. г % = 10 г/л, или 1 г/л = 0,1 г %.

В норме содержание гемоглобина в цельной крови на первом месяце жизни составляет 11—17 г% (6,83—10,55 ммоль/л или 110—170 г/л); от 1 мес до 14 лет—11—15,5 г% (6,83—6,92 ммоль/л или 110— 155 г/л).

Фетальный гемоглобин от общего количества гемоглобина крови со­ставляет в период новорожденности 50—85 %, от 2 до 11 мес—15%. от 1 года до 2 лет — не более 5%, от 3 до 14 лет — менее 2%.

Кроме гемометра Сали для определения концентрации гемоглобина крови применяют другие колориметрические методы с использованием фотоэлектрического эритрогемометра, фотоэлектроколориметров (ФЭК-М, ФЭК-56 и др.), фотоэлектрических гемометров с проточными кюветами (ГФ-1, ГФ-2, ГФ-3), колориметра «Линсон Юниор» (Швеция).

Определение среднего содержания гемоглобина в одном эритроците

Среднее содержание гемоглобина в одном эритроците обозначается в пикограммах (пг). Следует учитывать, что 1 пг = 1 • 10^-12г. Чтобы определить практически содержание гемоглобина в одном эритроците, необходимо воспользоваться одной из формул:

Нв в г % х10_____________.

Число миллионов эритроцитов в 1 мкл крови ’

Нв в г /л _______________

Число миллионов эритроцитов в 1 мкл крови

Например: Нв в г % равен 16,3 г %, число эритроцитов в 1 мкл крови— 5 000 000, тогда среднее содержание гемоглобина в одном эритроците будет составлять (по формуле «а»): 16х10= 32,6 пг.

5

В норме среднее содержание гемоглобина в одном эритроците составляет 33 пг (с колебаниями от 27 до 33,4 пг).

В гематологии есть понятие «абсолютное насыщение эритроцита гемоглобином». Эта величина определяется по формулам:

Нв в г % х100_____________

Гематокритное число в объемных процентах

Нв в г/л__________

Гематокритное число в л/л х10

В норме показатель абсолютного насыщения эритроцитов колеблется в пределах 32—36 %. При патологии он никогда не превышает 36%, что свидетельствует о невозможности абсолютной гиперхромии эритроцитов в крови больных с заболеваниями крови.