Матеріал для дослідження: кров, сеча, кістковий мозок, синовіальна рідина,

Методи діагностики:

Рання при гострій формі інфекції – виділення гемокультури, мієлокультури, урінокультури (проводять тільки в лабораторіях діагностики особливо-небезпечних інфекцій)

Бактеріологічний метод

1. посів крові у печінковий МПБ або за методом Кастанеда із рідким середовищем і скошеним агаровим середовищем у 2 флакони (в одному з флаконів створюють підвищену концентрацію вуглекислого газу для росту B.abortus);

2. пересів підозрілих колоній на скошений печінковий агар;

3. диференціація виділених бруцел (проба на сірководень, бактеріостатичну дію анілінових барвників, лізис фагом RTD);

4. орієнтовна РА на склі з А і М-сироватками

Тести для ідентифікації бруцел

Види	Лізис фагом RTD	Потреба в СО2	H2S	Уреаза	Ріст в присутності
					тіоніну	сафраніну	фуксину
B.melitensis	-	-	-	+	+	+	+
B.abortus	+	+	+	+	-	+	+
B.suis	-	-	+	+	+	-	-

Біологічна проба (рідко використовується в зв’язку з тривалістю дослідження)– зараження білих мишей або морських свинок (в черевну порожнину або підшкірно в пахвинній ділянці). Розтин через 20-30 діб

Пізня (з другого тижня захворювання при гострій формі), при хронічних формах інфекції (основний метод), ретроспективна діагностика

Серологічний метод (при хронічних формах інфекції – основний)

Матеріал для дослідження: сироватка крові

- орієнтовна РА Хеддельсона на склі (пластинкова РА для масових обстежень)

- Розгорнута ра Райта (діагностичний титр 1:100 і вище)

- непряма реакція імунофлюоресценції

- реакція Кумбса (визначення неповних антитіл)

- опсоно-фагоцитарна реакція

- ІФА, РНГА, РЗК

Алергічна проба (проба Бюрне) внутрішньо шкірне введення бруцеліну. Позитивна з 15-20 дня захворювання.

Схема мікробіологічної діагностики сибірки

Матеріал для дослідження залежить від форми інфекції: вміст карбункулу, везикул (шкірна форма); харкотиння (легенева форма); випорожнення (кишкова форма); кров (септична форма).

Бактеріоскопічний метод (попередня діагностика)

1. мазки за Грамом,

2. мазки за Романовським-Гімзе.

3. РІФ.

Бактеріологічний метод (остаточна діагностика)

5. посів матеріалу на МПА, кров’яний агар, у МПБ;

6. через 18-20 год. підозрілі колонії пересівають на скошений агар;

7. ідентифікацію чистої культури проводять на підставі результатів :

   1. біологічної проби (зараження білих мишей, визначення в мазках-відбитках капсульованих бацил)

   2. тесту «перлинного намиста» (висів у середовище зпеніциліном, де збудник сибірки утворює L-форми);

   3. фаголізабельністі сибірковим бактеріофагом;

   4. здатності утворювати капсулу на середовищах з додаванням нативного білка (сироватковий агар)

   5. відсутності гемолітичної активності;

   6. відсутності рухливості

Диференційні ознаки бацил

Ознака або тест	B.anthracis	B.anthracoides	B.subtilis	B.megaterium	B.cereus
Капсула	+	-	-	-	-
Патогенність для білих мишей	+	-	-	-	-
Лізис специфічним фагом	+	-	-	-	-
Тест «перлинного намиста»	+	-	-	-	-
РІФ з проти сибірковою сироваткою	+	-	-	-	-
Рухливість	-	+	+	+	+
Гемоліз	-	+	+	-	-
лецитиназа	-	+	+	+	+
Фосфатаза	-	+	+	+	+