Методична розробка по підготовці та роботі на лабораторному занятті №2 з мікробіології, вірусології, імунології для студентів медичного факультету.

Тема: Морфологія бактерій. Виготовлення препаратів з бактеріальних культур. Простий спосіб забарвлення.

1.1. Актуальність теми.

В мікробіологічній діагностиці інфекційних хвороб одним із перших використовують мікроскопічне дослідження матеріалу від хворого. Виявлення в ньому мікроорганізмів та вивчення їх морфології дозволяє орієнтовно визначити збудника і надалі провести чітку ідентифікацію за допомогою інших методів мікробіологічної діагностики. Морфологічні ознаки бактерій можна вивчати за допомогою мікроскопічного методу дослідження, тобто методу, який включає в себе роботу по виготовленню мазка з патологічного матеріалу або культури мікроба та його забарвлення, з наступним мікроскопічним дослідженням. Можливе вивчення морфології збудника і в нативному стані, але в більшості випадків використовують забарвлені або контрастовані препарати.

1.2. Цілі вивчення теми.

Вміти провести мікроскопічне дослідження культур бактерій.

1.2.1. Мета загальна.

Вміти використовувати морфологічні властивості бактерій для диференціації їх в мікроскопічній діагностиці інфекційних захворювань.

1.2.2. Мета конкретна:

1. Вміти приготувати мазки-препарати із бактеріальних культур, зафіксувати їх.

2. Вміти пофарбувати препарат простим способом.

3. Вміти розпізнати основні форми бактерій, морфологічні групи.

1.3. Забезпечення вихідного рівня знань-умінь:

1. Вміти визначити вимоги до препаратів для мікроскопічного дослідження (кафедра гістології).

2. Вміти вибрати спосіб мікроскопії, виходячи з величини досліджуваного об’єкта (заняття №1).

3. Вміти використовувати імерсійну систему світлового мікроскопа (заняття №1).

1.3.1. Завдання.

Приклад. Вивчаючи форми бактерій, для мікроскопії зафарбованих препаратів використовують імерсійну систему світлового мікроскопа. Чому необхідно користуватись нею?

Відповідь. При імерсійній мікроскопії об’єктив занурюють в олію, показник заломлення світла якої близький до показника заломлення скла. В цьому випадку потік світла, що вийшов за межі предметного скла, не розсіюється і промені, не змінюючи свого напрямку, потрапляють в об’єктив. Крім того, імерсійний об’єктив має вищу роздільну здатність.

1.4. Зміст навчання:

1. Вивчення основних форм бактерій.

2. Виготовлення препаратів із культури бактерій на щільному середовищі.

3. Фарбування простим методом.

4. Виявлення бактерій в препараті мікроскопічним методом.

5. Визначення морфологічних форм.

1.4.1. Граф логічної структури змісту.

Світ бактерій → поділ на морфологічні групи → вивчення морфології бактерій мікроскопічним методом.

1.4.2. Перелік теоретичних питань.

1. Основні морфологічні групи бактерій. Форми та розміри клітин, їх розташування в полі зору.

2. Правила роботи в мікробіологічній лабораторії.

3. Етапи приготування мазка-препарата із бактеріальних культур.

4. Класифікація фарб, які використовуються в мікробіологічній практиці.

5. Прості методи забарвлення мікробіологічних препаратів.

1.4.3. Джерела навчальної інформації.

Література теоретична основна:

К.Д. Пяткін, Ю.С. Кривошеїн. Мікробіологія. В.Ш. 1992, ст. 20-27

А.А. Воробьев и соавт. Микробиология. М. Медицина, 1994, стр. 16-18, 26-30

В.Д. Тимаков и соавт. Микробиология. М., Медицина, 1993, стр. 21-28

Крок-1. Загальна лікарська підготовка. Київ, Медицина, 2005

Л.Б. Борисов и соавт. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология. М. Медицина, 1994, стр. 25-31

Г.К. Палій і співавт. Мікробіологія, вірусологія, імунологія, інфекційні хвороби.

Література теоретична додаткова:

А.А. Воробьев. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология. М., МИА, 2004, стр. 29-35

А.И. Коротяев, С.А. Бабичев. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология. С.Петербург. Спецлит., 2002, стр. 18-33

В.И. Покровский. Медицинская микробиология. ГЭОТАР-МЕД, М., 2002, стр. 28-31, 47-54.

И.Л. Дикий и соавт. Микробиология. Харьков, изд. Укр ФА, 1999, стр. 18-19, 26-27

В.И. Покровский, О.К. Поздеев. Медицинская микробиология. ГЭОТАР Медицина, Москва, 1998, стр. 17

К.М. Векірчик. Мікробіологія з основами вірусології. К., Вища школа, 1973. ст. 23-24

Література практична основна:

Л.Б. Борисов и др. Руководство к практическим занятиям по микробиологии. М., 1984, стр. 20-24

С.І. Климнюк і співавт. Практична мікробіологія. Тернопіль, "Укрмедкнига", 2004, ст. 19-27

Література практична додаткова:

М.Н. Лебедева. Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии. М., Медицина, 1973, стр. 22-36

В.В. Тец Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии. М., Медицина, 2002, стр. 16-22

Л.Г. Бранцевич и соавт. Микробиология. Практикум. К., Вища школа, 1987, стр. 77-98

Ф.К. Черкес. Руководство к практическим занятиям по микробиологическим исследованиям. М., Медицина, 1980, стр. 14-23

К.Д. Пяткин и соавт. Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии. М., Медицина, 1969, стр. 17-25

А.Ю. Вершигора та інші. Практичний посібник з медичної мікробіології. К., 1963, стор. 26-30

1.5. Орієнтовна основа дії.

Культура бактерій → виготовлення та фіксація мазка → фарбування мазка простим методом → мікроскопічне дослідження мазка з використанням імерсійної системи → виявлення бактерій за морфологією → вивчення форми, розташування бактерій → визначення морфологічних груп в препаратах.

1.7. Короткі методичні вказівки для роботи студентів на лабораторному занятті.

Використовуючи техніку виготовлення препаратів з агарової культури, приготувати мазки з культури стафілокока та кишкової палички, зафіксувати їх в полум’ї пальника і пофарбувати простим способом. Для фарбування мазків стафілокока використовувати генціанвіолет за Синьовим, кишкової палички – фуксин Пфейффера. За допомогою імерсійної системи промікроскопувати мазки, мікроскопічну картинку замалювати в протокольному зошиті. Дати морфологічну характеристику культурам, яку дозволяє простий спосіб фарбування. Зробити висновок про його диференційні можливості. Після завершення роботи привести робоче місце в порядок і завершити вивчення морфології бактерій дослідженням різних морфологічних груп в демонстраційних препаратах. Замалювати мікроскопічну картинку, зробити висновки.

1.7.1. Методика проведення заняття.

- Інструктаж студентів з техніки безпеки при роботі з газовим паяльником з відміткою у відповідному журналі.

- Контроль вихідного рівня знань.

- Контроль знань теми, що вивчається.

- Самостійна робота студентів по освоєнню методик виготовлення мазка і фарбування простим способом.

- Мікроскопічне дослідження виготовлених та демонстраційних мазків. Вивчення морфології бактерій та диференціації їх на морфологічні групи.

- Оформлення протоколу.

Автор: доцент, кандидат медичних наук Мруг Валентина Максимівна