3.1.8 Сравнение эффективности антагонистов гамка и гамкс рецепторов на устойчивые к пикротоксину токи, опосредованные гамКергическими рецепторами

Для подтверждения того, что ионотропные ГАМКергические рецепторы в интернейронах str.radiatum поля CA1 срезов гиппокампа обладают свойствами как ГАМК_А, так и ГАМК_Срецепторов, мы решили проверить эффект специфических антагонистов этих двух типов рецепторов на ТПСТ и ионтофоретически вызываемые токи в присутствии пикротоксина (100 μМ). В качестве антагониста ГАМК_Арецепторов был выбран бикукуллин (10 μМ), а в качестве антагониста ГАМК_Срецепторов - TPMPA (200 μМ). Если эти токи гетерогенны, то компонент, опосредуемый ГАМК_Срецепторами, будет подавляться TPMPA, но будет нечувствительным к бикукуллину. Компонент, опосредованный ГАМК_Арецепторами, должен подавляться бикукуллином, но быть нечувствительным к TPMPA. На рисунке

Рис. 3.1.10 ТПСТ и ионтофоретические ГАМК-, CACA- и изогувазин -токи в интернейронах, в присутствии 100 μМ пикротоксина, подавляются как антагонистом ГАМК_Срецепторов TPMPA, так и ГАМК_А– бикукуллином

(см. подписи на следующей странице)

Мы сравнили эффекты специфических антагонистов ГАМК_Си ГАМК_Арецепторов: TPMPA (200 µМ; буквы с индексом₁) и бикукуллина (10 µМ; буквы с индексом₂), соответственно. ТПСТ (а₁,а₂), ионтофоретические токи в ответ на аппликацию ГАМК (б₁,б₂), CACA (в₁,в₂) и изогувазин (г₁,г₂), полученные в присутствии пикротоксина 100 µМ, подавлялись в значительной степени обоими антагонистами. Данные показаны для одного интернейрона в каждом случае. Оригинальные токи (в каждом случае усреднение по 10 последовательным регистрациям) расположены над графиками динамики ответов и показывают ток до, во время и после добавления антагониста.д, Усредненные ответы, полученные по нескольким клеткам (статистические данные представлены в таблице 3.1.2).е, Относительная степень подавления ответов TPMPA и бикукуллином была сходной для всех четырех типов токов и могла быть линейно аппроксимирована.

3.1.10а,д показано, что ТПСТ в интернейронах, регистрируемые в присутствии пикротоксина, подавляются в значительной степени обоими антагонистами (23 ± 7 % от базовых значений; n=5; p=0,01 при аппликации TPMPA и 3 ± 3 %; n=4; p=0,002 при аппликации бикукуллина). Столь значительное подавление синаптических токов обоими антагонистами указывает на то, что они не могут состоять частично из ГАМК_Аи ГАМК_Скомпонентов. Этот результат свидетельствует в пользу существования одной популяции рецепторов, обладающей свойствами обоих типов рецепторов. В подтверждение этому, токи, полученные в ответ на ионтофорез ГАМК или САСА, также в значительной степени подавлялись обоими антагонистами и (для ГАМК: 54 ± 3 % от базовых значений; n=4; p=0,02 при аппликации TPMPA и 15 ± 4 %; n=7; p=0,008 при аппликации бикукуллина; Рис. 3.1.10б,д; для САСА: 32 ± 4 % от базовых значений; n=4; p=0,015 при аппликации TPMPA; 8 ± 1 %; n=4; p=0,0007 при аппликации бикукуллина; Рис. 3.1.10в,д). Однако, ГАМК является эндогенным агонистом как ГАМК_А, так и ГАМК_Срецепторов. Для подтверждения фармакологического профиля ГАМК_Арецепторов, мы использовали для ионтофореза специфический агонист этих рецепторов – изогувазин (100 мМ) (Kusama et al. 1993; Woodward et al. 1993). Ток, вызываемый изогувазином, также подавлялся как TPMPA,

Таблица 3.1.2 Эффект TPMPA и бикукуллина на ГАМКергические токи в интернейронах в присутствии пикротоксина (% от контроля)
	TPMPA, %	(n)	бикукуллин, %	(n)	отношение
ТПСТ	23 ± 7	4	3 ± 3	5	6.96
ГАМК ионт.	54 ± 3	4	15 ± 4	7	3.67
CACA ионт.	32 ± 4	4	8 ± 0.5	4	4.23
изогувазин ионт.	45 ± 8	5	12 ± 2	5	3.78

так и бикукуллином (45 ± 8 % от базовых значений; n=5; p=0,02 при аппликации TPMPA и 12 ± 2 %; n=5; p=0,017 при аппликации бикукуллина; Рис. 3.1.10г,д).

Относительная степень подавления всех вышеописанных токов (соотношение эффектов TPMPA/бикукуллин) была сходной (Рис. 3.1.10е и Таблица 3.1.2), что говорит о сходстве их природы. Таким образом, полученные данные указывают на наличие в интернейронах поля СА1 гиппокампа одной популяции ионотропных ГАМКергических рецепторов, но обладающей свойствами двух различных типов.