3.5. Какова правильная процедура взятия крови для коагулологических исследовании?

Место: Кровь забирается из переферической, обычно кубитальной, вены Антикоагулянт: Венозная кровь забирается в 0.105 М (3,2%) цитрат на­трия в соотношении 1:10 (1 часть цитрата на 9 частей крови). В настоящее время широко используется также 0.129 М (3,8%) цитрат натрия, но пока не доказано, что он пригоден для всех видов коагулологических исследований.

Методы забора-

• "бабочкообразная " игла- кровь забирается в силиконизированную градуи­рованную стеклянную центрифужную пробирку, или градуированную пласти­ковую пробирку, содержащую антикоагулянт, с использованием "бабочко-образной" иглы.

• Шприц - кровь берется в градуированный пластиковый шприц, содержащий антикоагулянт.

• Моноветт (аспирационный метод) коммерческая аспирационная система (градуированный шприц), содержащая раствор цитрата натрия.

• Вакутейнер (вакуумный метод) коммерческая система (пробирка с опреде­ленным отрицательным давлением), содержащая раствор цитрата натрия.

Процедура

• Компрессия - Для венозной компрессии жгут или манжетка налагается не более чем на 60 сек. Потенциальные источники ошибок: если жгут наложен на слишком длительное время или с избыточным давлением, это может ве­сти к локальной активации фибринолиза и, таким образом, к возрастанию активности факторов свертывания (3 12)

• Венопунктура - после дезинфекции кожи вена пунктируется канюлей, соот­ветствующей технике забора. Потенциальные источники ошибок: в случае "трудных" вен и длительных попыток пунктирования. в канюлю попадает большое количество тканевой жидкости.

• Выбрасывание первой порции крови - первая порция крови после прокола вены должна быть выброшена, или должна использоваться для других ви­дов исследования. Источники ошибок: содержащаяся в первой порции крови тканевая тромбокиназа может влиять на результаты исследований.

• Ток крови - важно убедиться, что канюля находится в вене так, что ничего не препятствует свободному току крови. Кровь должна течь быстро и само теком. Потенциальные источники ошибок: если кровь аспирируется слишком быстро, это может повредить тромбоциты (ведет к их функциональным изменениям и высвобождению БАВ) или эритроциты (гемолиз); если кровь аспирируется слишком медленно, может иметь место частично свертыва ние крови с образованием как видимого, так и невидимого сгустка; если аспирируется слишком мало крови, то не соблюдается соотношение кровь/цитрат, и результаты будут неправильными.

• Перемешивание - кровь должна быть перемешана с цитратом сразу же после взятия.

3.6. Что является исследуемым образцом для коагулологических тестов?

Цитратная кровь - без последующей обработки цитратная кровь используется в настоящее время только для определения времени рекальцификации или активированного времени рекальцификации.

Цитратная плазма получается центрифугированием из цитратной крови

• Цитратная плазма богатая тромбоцитами - кровь центрифугируется в тече­ние 5 мин. при 100 g, что равно примерно 800 об/мин стандартной на стольной центрифуги. Торможение центрифуги должно быть плавное, чтобы не допустить перемешивания. Супернатант используется для исследования функции тромбоцитов.

• Цитратная плазма, бедная тромбоцитами кровь центрифугируется 10 мин при 1500-2000g, (примерно 3000 об/мин). Этот материал, называемый плазмой, используется для большинства коагуляционных тестов. В такой плазме тромбоциты еще содержатся, но в малых количестах. • Бестромбоцитная плазма - центрифугирование 30 мин. (или 20 мин для

плазмы, бедной тромбоцитами) не менее чем при 2500g (примерно 4000 (об/мин). Используется для тех же целей. Если необходимо морозить мате­риал, то нужно замораживать бестромбоцитную плазму.

Капиллярная кровь (см.п. 3.8)

Сыворотка (п. 3.3)

ЭДТА кровь используется для гематологических исследований, подсчета тромбоцитов.