2. Исследование гуморальных факторов неспецифической резистентности:

• уровень комплемента в сыворотке крови (по 50 или 100% гемолизу эритроцитов барана);

• содержание лизоцима в слюне или сыворотке крови (по способности лизировать культуру Micrococcus lisodeictikus);

• титры сывороточных β-лизинов (по способности лизировать культуру Bacillus subtilis);

• С-реактивный белок в сыворотке крови (в реакции преципитации);

• сывороточный интерферон (в реакции нейтрализации).

Оценка иммунного статуса.

1. Исследование т-системы иммунитета.

   1. Количественное определение Т-лимфоцитов:

• в реакции розеткообразования с бараньими эритроцитами (ЕРОК) (устаревший метод) – розеткой считается лимфоцит, прикрепивший не менее 3 эритроцитов (N=50-76%);

• по кластерам дифференцировки CD-2 (неиммунный Т-лимфоцит), CD-3 (зрелый Т- лимфоцит), CD4 (Т-хелперы) и CD8 (цитотоксические Т-лимфоциты) с диагностическими меченными моноклональными антителами в непрямых вариантах РИФ и ИФА (N CD4=31-46%, CD8+=30-35%, соотношение CD4/CD8=1,0 : 2,2-1,0 : 1,5).

1. Функциональная активность Т-лимфоцитов:

• реакция бластной трансформации (РБТ) – способность Т-лимфоцитов под воздействием фитогемагглютинина (ФГА) превращаться в большие бластоподобные клетки с большим рыхлым ядром (N=20-100%);

• цитотоксическая функция Т-клеток в реакциях с клетками-мишенями;

• реакция торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ) под влиянием соответствующих антигенов.

2. Исследование в-системы иммунитета.

   1. Количественное изучение В-лимфоцитов:

• в реакции розеткообразования с эритроцитами мышей (ЕАРОК);

• в реакция розеткообразования с бараньими эритроцитами, сенсибилизированными антителами и комплементом (ЕАС-РОК) (N=10-20%);

• по кластерам дифференцировки CD-19, 20, 22 в непрямой РИФ и ИФА.

1. Определение функциональной активности В-лимфоцитов:

• РБТ;

• уровень нормальных антител в реакции агглютинации (РА) с эритроцитами барана и с микробными антигенами (E.coli, стафилококки);

• содержание сывороточных иммуноглобулинов классов G, М, А методом Манчини (реакция преципитации в геле), непрямым ИФА и РИА (N IgM=109, IgG=233 и IgA=147 МЕ/мл).

Практическое использование методов исследования иммунной системы:

1. Оценка иммунного статуса;

2. Серотипирование бактериальных и вирусных культур;

3. Серодиагностика инфекционных болезней;

4. Выявление иммунопатологических состояний;

5. Определение антигенов тканей человека: групп крови, Rh-фактора, HLA;

6. Выявление в организме человека или во внешней среде любых веществ, обладающих антигенными свойствами (гормонов, ферментов, ядов, лекарств, наркотических средств).

В настоящее время в практической деятельности часто используется рациональный подход к изучению иммунитета, когда исследования распределены на 2 этапа.

Оценка иммунного статуса:

1. этап – клиническая долабораторная диагностика иммунопатологических состояний:

• оценка иммунологического анамнеза (частота инфекционных заболеваний, характер их течения, выраженность температурной реакции, наличие очагов хронической инфекции);

• оценка общего анализа крови (содержание лейкоцитов, в т.ч. лимфоцитов, моноцитов, сегментоядерных);

• исследование на бактерио(вирусо-)носительство.

2. этап предусматривает применение тестов 2 уровней.

Тесты первого уровня позволяют выявить грубые нарушения функций иммунной системы:

• процентное содержание и абсолютное количество Т- и В-лимфоцитов;

• уровень иммуноглобулинов сыворотки крови классов М, G, А, Е;

• фагоцитарная активность нейтрофилов.

Тесты второго уровня включают углубленное иммунологическое обследование для установления регуляторных нарушений и дисфункций иммунитета:

• определение субпопуляций Т-лимфоцитов (CD4, CD8), их соотношения;

• функциональной активности Т- и В-лимфоцитов в РБТ и РТМЛ;

• цитотоксическая активность лейкоцитов;

• кожные тесты.

При диагностике различных иммунопатологических состояний перечень диагностических исследований может изменяться. Например, диагностические мероприятия при аллергических заболевания проводятся с учетом механизмов аллергической реакции, направлены на идентификацию причинного аллергена и должны включать:

• аллергологический анамнез (наличие аллергических реакций на антибиотики, пищевые продукты, пыльцу растений и т. д.);

• данные клинико-лабораторных исследований (лейкоцитоз, эозинофилия);

• определение содержания общего и специфических JgE в сыворотке крови при аллергических реакциях I типа;

• определение содержания аутоантител (антиэритроцитарные, антилейкоцитарные, антитромбоцитарные…) в сыворотке крови при аллергических реакциях II типа;

• определение содержания комплексов АГ-АТ, циркулирующих в крови или фиксированных на тканях, при аллергических реакциях III типа;

• проведение кожно-аллергических проб.