Тема лекции: «Возбудители дифтерии и коклюша.»

Дифтерия (от греч. diphtheria – кожа, пленка) – острое инфекционное заболевание, характеризующееся токсическим поражением сердечно-сосудистой и нервной систем, а также специфическим фибринозным (дифтеритическим) воспалением в месте входных ворот.

Историческая справка.

Возбудитель дифтерии был открыт в 1883 г. Э. Клебсом в срезах дифтерийных пленок. В 1884 г. Ф. Леффлер выделил его в чистой культуре. В 1888 г. Э. Ру и А. Йерсен получили дифтерийный

токсин, а в 1895 г. Э. Беринг и Э. Ру независимо друг от друга получили противодифтерийную сыворотку, которую впервые для лечения дифтерии применил в 1897 г. П. Эрлих. В 1923 г. Г. Рамон разработал технологию получения дифтерийного анатоксина. В России Г.Н. Габричевский применил противодифтерийную сыворотку с лечебной целью и организовал ее производство.

Таксономия.

Семейство – Corynebacteriaceae

Род – Corynebacterium

Вид – C. diphtheriae

Помимо возбудителя дифтерии в род Corynebacterium входят 20 видов, которые широко распространены в окружающей среде – воздухе, почве, воде, пыли, пищевых продуктах, а также большинство из них являются облигатными паразитами кожи, слизистых оболочек верхних дыхательных путей, ЖКТ и мочеполового тракта, условно-патогенными для человека и животных. Наиболее часто со слизистой оболочки носоглотки, с эпителия влагалища, а также из различных ран выделяют следующие виды: C. pseudodiphthericum (палочка Хофманна), С. хerosis и C. ulcerans (общее название дифтероиды=ложные дифтерийные палочки).

Морфология и тинкториальные свойства.

Прямые или слегка изогнутые палочки размером 0,3-0,8×1-6 мкм, спор не образуют, неподвижны, имеют микрокапсулу (в ее состав входит корд-фактор). Характерно взаимное расположение бактерий в мазке – под углом друг к другу в виде букв V, X, L, Y (неполное расхождение при делении). Ложные дифтерийные палочки располагаются параллельно друг другу. В толстых мазках располагаются в виде «пучка булавок» (от сюда произошло название коринебактерий: от греч. kоryne – булава). Булавидные утолщения на концах связаны с наличием зерен волютина (тельца Бабеша-Эрнста) – гранулы полиметафосфата. Могут образовывать фильтрующиеся и L-формы.

Грамположительные микроорганизмы. При окраске по методу Нейссера цитоплазма окрашивается в желтый цвет, а зерна волютина – в синий. По методу Леффлера (метиленовым синим) цитоплазма – голубая, зерна волютина – синего цвета. Также используется окраска флюорохромом – корифосфином с последующей люминисцентной микроскопией (цитоплазма дает желто-зеленое свечение, а зерна волютина – коричнево-красное).

Культуральные свойства.

Возбудители дифтерии – факультативные анаэробы, оптимальная температура их культивирования 37⁰С, рН 7,3-8,0, длительность (8)12-24 часа.

Требовательны к питательным средам (не способны расщеплять белки до аминокислот), для роста необходимо наличие аминокислот, минеральных веществ и металлов.

Для культивирования применяются следующие среды:

• Среда Ру (свернутая лошадиная сыворотка) и Леффлера (свернутая лошадиная сыворотка с добавлением глюкозы) – рост в виде серовато-кремовых сухих морщинистых колоний по типу

«шагреневой кожи».

• Среда Бучина с хинозолом – рост в виде плоские темно-синие колонии.

Дифференциально-диагностическими являются среды с теллуритом (растут медленнее – 24-48 часов):

• Наиболее часто используют глицериновокровяную среду с теллуритом (Клауберг II).

• Сывороточно-теллуритовый агар с цистином (Тиндаль) и другие.

На теллуритовых средах C. diphtheriae образует серовато-черные колонии, что обусловлено восстановлением теллурита до металлического теллура, имеющего черный цвет. Дифтероиды теллурит не восстанавливают.