- •Предисловие
- •Тема № 1. Правила работы и устройство микробиологической лаборатории. Методы микроскопии. Техника приготовления микроскопических препаратов. Простые и сложные методы окраски
- •Организация микробиологической лаборатории
- •Методы микроскопии. Техника приготовления микроскопических препаратов. Простые и сложные методы окраски
- •Исследование микроорганизмов в окрашенном состоянии
- •Окраска по Граму
- •Окраска кислотоустойчивых бактерий
- •Окраска спор
- •Окраска включений волютина
- •Обнаружение капсул у бактерий
- •Окраска по Романовскому – Гимзе
- •Тема № 2. Морфология бактерий. Ультраструктура бактериальной клетки
- •Морфология бактерий
- •Структура бактериальной клетки
- •Тема № 3. Физиология, биохимия бактерий. Питательные среды. Этапы выделения и идентификации чистых культур аэробных и анаэробных бактерий
- •Культивирование микроорганизмов в лабораторных условиях
- •Выделение и идентификация чистых культур аэробных и анаэробных бактерий
- •Особенности культивирования облигатно-анаэробных бактерий
- •Краткая характеристика питательных сред
- •Тема № 4. Асептика, антисептика, стерилизация
- •Стерилизация
- •Соотношение показаний манометра и температуры
- •Дезинфекция
- •Асептика
- •Антисептика
- •Классификация дезинфицирующих и антисептических средств
- •Тема № 5. Влияние факторов внешней среды на микроорганизмы
- •Изучение действия уф-света на микроорганизмы
- •Диско-диффузионный метод
- •Фитонциды
- •Тема № 6. Количественное определение микроорганизмов
- •Количественное определение микроорганизмов методом непосредственного (прямого) подсчёта
- •Определение количества дрожжевых клеток в 1 г прессованных хлебопекарных дрожжей с помощью камеры Горяева
- •Определение количества микробных клеток фотометрическим методом
- •Определение числа клеток высевом на плотные питательные среды (чашечный метод Коха).
- •Определение количества клеток высевом в жидкие среды (метод предельных разведений).
- •Наиболее вероятное количество клеток микроорганизмов в единице объёма исходной суспензии (по Мак-Креди)
- •Тема № 7. Возбудители бактериальных кишечных инфекций
- •Эшерихии
- •Сальмонеллы
- •Тема № 8. Основы санитарной микробиологии
- •Основные понятия и термины санитарной микробиологии
- •Общая характеристика санитарно-показательных микроорганизмов
- •Первая группа санитарно- показательных микроорганизмов
- •Вторая группа санитарно- показательных микроорганизмов
- •Санитарно-микробиологическое исследование почвы
- •Санитарно-микробиологическое исследование воды
- •100 Мл питьевой воды)
- •Санитарно-микробиологическое исследование воздуха
- •Тема № 9. Санитарная микробиология пищевых продуктов. Пищевые токсикоинфекции и интоксикации
- •Санитарная микробиология мясных продуктов
- •Бактериологическое исследование консервов
- •Санитарно-микробиологическое исследование молока и молочных продуктов
- •Санитарно-микробиологическое исследование смывов с объектов внешней среды
- •Пищевые токсикоинфекции и интоксикации
- •Тестовые задания
- •Литература.
- •Оглавление
Оглавление
Предисловие 3
ТЕМА № 1. Правила работы и устройство микробиологической лаборатории. Методы микроскопии. Техника приготовления микроскопических препаратов. Простые и сложные методы окраски 4
Организация микробиологической лаборатории 5
Методы микроскопии. Техника приготовления микроскопических препаратов. Простые и сложные методы окраски 8
Исследование микроорганизмов в окрашенном состоянии 24
Окраска по Граму 26
Окраска кислотоустойчивых бактерий 28
Окраска спор 29
Окраска включений волютина 30
Обнаружение капсул у бактерий 31
Окраска по Романовскому – Гимзе 31
ТЕМА № 2. Морфология бактерий. Ультраструктура бактериальной клетки 33
Морфология бактерий 34
Структура бактериальной клетки 35
Нуклеоид, ядерное вещество клетки, ее наследственный аппарат, состоит из двойной нити ДНК, сомкнутой в кольцо и свободно погруженное в цитоплазму, в отличие от эукариот. В молекуле ДНК закодирована генетическая информация клетки. 37
Мембранные структуры прокариот менее дифференцированы, чем органоиды эукариот. Бактерии имеют лишь аналоги некоторые из них. Например, аналогом митохондрий у прокариот являются мезосомы, которые образуются путём инвагинации цитоплазматической мембраны и содержат ферменты, необходимые для синтеза АТФ. 37
У некоторых видов микробов имеются пили (реснички, фимбрии, филаменты), представляющие собой образования, которые значительно короче и тоньше жгутиков. Они покрывают тело клетки. Полагают, что они не являются органами передвижения, а способствуют прикреплению микробных клеток к поверхности некоторых субстратов. 38
Жгутики предназначены для передвижения бактерий. Жгутики построены из специального белка –флагелина. Длина его составляет 20 мкм, диаметр 10-20 нм. 38
По расположению жгутиков подвижные микробы подразделяются на 4 группы (рис. 7): 38
монотрихи — бактерии с одним жгутиком на конце (холерный вибрион); 38
амфитрихи — бактерии с двумя полярно расположенными жгутиками или имеющие по пучку жгутиков на обоих концах; 38
лофотрихи — бактерии, которые имеют по пучку жгутиков на одном конце (палочки сине-зеленого молока); 38
перитрихи — бактерии, обладающие жгутиками по всей поверхности тела (кишечная палочка). 38
Рисунок 7. Жгутикование бактерий: 38
A — монотрихиальное, B — лофотрихиальное, C — амфитрихиальное, D — перитрихиальное. 38
Исследование микроорганизмов в живом состоянии 38
Тема № 3. Физиология, биохимия бактерий. Питательные среды. Этапы выделения и идентификации чистых культур аэробных и анаэробных бактерий 42
Культивирование микроорганизмов в лабораторных условиях 43
Особенности культивирования облигатно-анаэробных бактерий 54
Краткая характеристика питательных сред 62
ТЕМА № 4. Асептика, антисептика, стерилизация 74
ТЕМА № 4. Асептика, антисептика, стерилизация 74
Стерилизация 74
Дезинфекция 84
Асептика 85
Антисептика 85
ТЕМА № 5. Влияние факторов внешней среды на микроорганизмы 87
В процессе жизнедеятельности многие микроорганизмы образуют специ-фические продукты, которые обладают высокой физиологической активностью по отношению к другим микрорганизмам и вирусам, задерживая их рост или убивая их. Они называются антибиотиками. В промышленных масштабах антибиотики получают путём биосинтеза микроорганизмами-продуцентами и полусинтетически, трансформируя химическим путем молекулы природных антибиотиков. Знание химического строения природных антибиотиков позволяет получать некоторые из них, например левомицетин, путем химического синтеза. Антибиотики обладают способностью убивать или тормозить рост и развитие микроорганизмов. В связи с этим различают бактериостатическое и бактерицидное действие антибиотиков. В отношении противогрибковых антибиотиков говорят о их фунгистатической и фунгицидной активности. 90
Для количественного выражения биологической активности вещества введено понятие единицы действия (ЕD). За единицу действия антибиотика принимают минимальное количество вещества, которое задерживает рост и стандартного штамма микроорганизма в строго определенных условиях. Для большинства антибиотиков 1 ЕD соответствует 1 мкг химически чистого препарата. 91
Диско-диффузионный метод 93
ТЕМА № 6. Количественное определение микроорганизмов 96
ТЕМА № 6. Количественное определение микроорганизмов 96
Таблица 4 109
Наиболее вероятное количество клеток микроорганизмов в единице объёма исходной суспензии (по Мак-Креди) 109
Числовая характеристика 110
Наиболее вероятное 110
число микроорганиз- 110
мов при засеве парал-лельных пробирок 110
в числе 110
Числовая характеристика 110
Наиболее вероятное 110
число микроорганиз- 110
мов при засеве парал-лельных пробирок 110
в числе 110
Числовая характеристика 110
Наиболее вероятное 110
число микроорганиз- 110
мов при засеве парал-лельных пробирок 110
в числе 110
2 110
3 110
4 110
5 110
2 110
3 110
4 110
5 110
2 110
3 110
4 110
5 110
000 110
0,0 110
222 110
110 110
3,5 110
2,0 110
1,4 110
433 110
- 110
- 110
30,0 110
- 110
001 110
- 110
0,5 110
0,5 110
0,2 110
223 110
- 110
4,0 110
- 110
- 110
434 110
- 110
- 110
35,0 110
- 110
002 110
- 110
- 110
0,5 110
0,4 110
230 110
- 110
3,0 110
1,7 110
1,2 110
440 110
- 110
- 110
25,0 110
3,5 110
003 110
- 110
- 110
0,7 110
- 110
231 110
- 110
3,5 110
2,0 110
1,4 110
441 110
- 110
- 110
40,0 110
4,0 110
010 110
0,5 110
0,3 110
0,2 110
0,2 110
232 110
- 110
4,0 110
- 110
- 110
442 110
- 110
- 110
70,0 110
- 110
011 110
0,9 110
0,6 110
0,5 110
0,4 110
240 110
- 110
- 110
2,0 110
1,4 110
443 110
- 110
- 110
140,0 110
- 110
012 110
- 110
- 110
0,7 110
0,6 110
241 110
- 110
- 110
3,0 110
- 110
444 110
- 110
- 110
160,0 110
- 110
013 110
- 110
- 110
0,9 110
- 110
300 110
- 110
2,5 110
1,1 110
0,8 110
450 110
- 110
- 110
- 110
5,0 110
020 110
0,9 110
0,6 110
0,5 110
0,4 110
301 110
- 110
4,0 110
1,6 110
1,1 110
451 110
- 110
- 110
- 110
4,0 110
021 110
- 110
- 110
0,7 110
0,6 110
302 110
- 110
6,5 110
2,0 110
1,4 110
500 110
- 110
- 110
- 110
2,5 110
022 110
- 110
- 110
0,9 110
- 110
303 110
- 110
- 110
2,5 110
- 110
501 110
- 110
- 110
- 110
3,0 110
030 110
- 110
- 110
0,7 110
0,6 110
310 110
- 110
4,5 110
1,6 110
1,1 110
502 110
- 110
- 110
- 110
4,0 110
031 110
- 110
- 110
0,9 110
- 110
311 110
- 110
7,5 110
2,0 110
1,4 110
503 110
- 110
- 110
- 110
6,0 110
040 110
- 110
- 110
0,9 110
- 110
312 110
- 110
11,5 110
3,0 110
1,7 110
504 110
- 110
- 110
- 110
7,5 110
041 110
- 110
- 110
1,2 110
- 110
313 110
- 110
16,5 110
3,5 110
2,0 110
510 110
- 110
- 110
- 110
3,5 110
100 110
0,6 110
0,4 110
0,3 110
0,2 110
320 110
- 110
9,5 110
2,0 110
1,4 110
511 110
- 110
- 110
- 110
4,5 110
101 111
1,2 111
0,7 111
0,5 111
0,4 111
321 111
- 111
15,0 111
3,0 111
1,7 111
512 111
- 111
- 111
- 111
6,0 111
102 111
- 111
1,1 111
0,8 111
0,6 111
322 111
- 111
20,0 111
3,5 111
2,0 111
513 111
- 111
- 111
- 111
8,5 111
103 111
- 111
- 111
1,0 111
0,8 111
323 111
- 111
30,0 111
- 111
- 111
520 111
- 111
- 111
- 111
5,0 111
110 111
1,3 111
0,7 111
0,5 111
0,4 111
330 111
- 111
25,0 111
3,0 111
1,7 111
521 111
- 111
- 111
- 111
7,0 111
111 111
2,0 111
1,1 111
0,8 111
0,8 111
331 111
- 111
45,0 111
3,5 111
2,0 111
522 111
- 111
- 111
- 111
9,5 111
112 111
- 111
- 111
1,1 111
0,8 111
332 111
- 111
110,0 111
4,0 111
- 111
523 111
- 111
- 111
- 111
12,0 111
113 111
- 111
- 111
1,3 111
- 111
333 111
- 111
140,0 111
5,0 111
- 111
525 111
- 111
- 111
- 111
15,0 111
120 111
2,0 111
1,1 111
0,8 111
0,6 111
340 111
- 111
- 111
3,5 111
2,0 111
524 111
- 111
- 111
- 111
17,5 111
121 111
3,0 111
1,5 111
1,1 111
0,8 111
341 111
- 111
- 111
4,5 111
2,5 111
530 111
- 111
- 111
- 111
8,0 111
122 111
- 111
- 111
1,3 111
1,0 111
350 111
- 111
- 111
- 111
2,5 111
531 111
- 111
- 111
- 111
11,0 111
123 111
- 111
- 111
1,6 111
- 111
400 111
- 111
- 111
2,5 111
1,3 111
532 111
- 111
- 111
- 111
14,0 111
130 111
- 111
1,6 111
1,1 111
0,8 111
401 111
- 111
- 111
3,5 111
1,7 111
533 111
- 111
- 111
- 111
17,5 111
131 111
- 111
- 111
1,4 111
1,0 111
402 111
- 111
- 111
5,0 111
2,0 111
534 111
- 111
- 111
- 111
20,0 111
132 111
- 111
- 111
1,6 111
- 111
403 111
- 111
- 111
7,0 111
2,5 111
535 111
- 111
- 111
- 111
25,0 111
140 111
- 111
- 111
1,4 111
1,1 111
410 111
- 111
- 111
3,5 111
1,7 111
540 111
- 111
- 111
- 111
13,0 111
141 111
- 111
- 111
1,7 111
- 111
411 111
- 111
- 111
5,5 111
2,0 111
541 111
- 111
- 111
- 111
17,0 111
200 111
2,5 111
0,9 111
0,6 111
0,5 111
412 111
- 111
- 111
8,0 111
2,5 111
542 111
- 111
- 111
- 111
25,0 111
201 111
5,0 111
1,4 111
0,9 111
0,7 111
413 111
- 111
- 111
11,0 111
- 111
543 111
- 111
- 111
- 111
30,0 111
202 111
- 111
2,0 111
1,2 111
0,9 111
414 111
- 111
- 111
14,0 111
- 111
544 111
- 111
- 111
- 111
35,0 111
203 112
- 112
- 112
1,6 112
1,2 112
420 112
- 112
- 112
6,0 112
2,0 112
545 112
- 112
- 112
- 112
45,0 112
210 112
6,0 112
1,5 112
0,9 112
0,7 112
421 112
- 112
- 112
9,5 112
2,5 112
550 112
- 112
- 112
- 112
25,0 112
211 112
13,0 112
2,0 112
1,3 112
0,9 112
423 112
- 112
- 112
17,0 112
- 112
551 112
- 112
- 112
- 112
35,0 112
212 112
20,0 112
3,0 112
1,6 112
1,2 112
422 112
- 112
- 112
13,0 112
3,0 112
552 112
- 112
- 112
- 112
60,0 112
213 112
- 112
- 112
2,0 112
- 112
424 112
- 112
- 112
20,0 112
- 112
553 112
- 112
- 112
- 112
90,0 112
220 112
25,0 112
2,0 112
1,3 112
0,9 112
430 112
- 112
- 112
11,5 112
1,5 112
554 112
- 112
- 112
- 112
100,0 112
221 112
70,0 112
3,0 112
1,6 112
1,2 112
431 112
- 112
- 112
16,5 112
3,0 112
555 112
- 112
- 112
- 112
180,0 112
432 112
- 112
- 112
20,0 112
4,0 112
ТЕМА № 7. Возбудители бактериальных кишечных инфекций 112
Эшерихии 113
Сальмонеллы 115
ТЕМА № 8. Основы санитарной микробиологии 115
Основные понятия и термины санитарной микробиологии 116
Основные понятия и термины санитарной микробиологии 116
Общая характеристика санитарно-показательных микроорганизмов 118
Общая характеристика санитарно-показательных микроорганизмов 118
Первая группа санитарно- показательных микроорганизмов 119
Первая группа санитарно- показательных микроорганизмов 119
Вторая группа санитарно- показательных микроорганизмов 120
Вторая группа санитарно- показательных микроорганизмов 120
Санитарно-микробиологическое исследование почвы 120
Санитарно-микробиологическое исследование воды 125
Санитарно-микробиологическое исследование воздуха 132
ТЕМА № 9. Санитарная микробиология пищевых продуктов. Пищевые токсикоинфекции и интоксикации 136
Санитарная микробиология мясных продуктов 136
Бактериологическое исследование консервов 138
Санитарно-микробиологическое исследование молока и молочных продуктов 143
Санитарно-микробиологическое исследование смывов с объектов внешней среды 144
Пищевые токсикоинфекции и интоксикации 146
Литература. 159