- •Министерство сельского хозяйства
- •Формы взаимодействия микро и макро организмов
- •Характерные особенности инфекционной болезни
- •Методы лабораторных исследований
- •Лабораторная диагностикакоринебактериозов
- •Выделение и идентификация коринебактерии
- •Питательные среды
- •Бактериологическое исследование
- •Микроскопическое исследование исходного материала
- •Бактериологическое исследование
- •Микроскопическое исследование исходного материала
- •Биопроба. Проводят с целью выделения культуры возбудителя из исследуемого мате риала и проверки патогенных свойств выделенной культуры.
- •Микроскопическое исследование исходного материала
- •Выделение и идентификация культуры возбудителя
- •Питательные среды такие же как и при лабораторной диагностике актинобациллезной пневмонии свиней.
- •Микроскопическое исследование исходного материала
- •Выделение и идентификация культуры возбудителя
- •Выделение и идентификация культуры возбудителя
- •Сывороточно-дрожжевой бульон. Готовят так же, как и сывороточно-дрожжевой агар, но на основе жидкой питательной среды.
- •Лабораторная диагностика бортелиоза
- •Бактериологическое исследование
- •Выделение и идентификация бордетелл
- •Бактериологическое исследование
- •Питательные среды
- •Лабораторная диагностика сапа
- •Биопроба. Проводят с целью обнаружения возбудителя в исследуемом материале и подтверждения патогенных свойств выделенной культуры на золотистых хомячках, морских свинках.
- •Выделение и идентификация культуры возбудителя
- •Микроскопическое исследование исходного материала
- •Микроскопическое исследование исходного материала
- •Выделение и идентификация культуры возбудителя
- •Питательные среды
- •Питательные среды
- •Микроскопическое исследование исходного материала
- •Выделение и идентификация кампилобактерии
- •Серологическая диагностика
- •Питательные среды
- •Биопроба. Проводят в случаях, когда микроскопическое исследование материала дает отрицательные результаты. Заражают молодых кур, кроликов, морских свинок, белых мышей, куриные эмбрионы.
- •Питательные среды
- •Определение потребности в холестерине. От стерола не зависят ахолеплазмы, требуют его для своего роста микоплазмы, уреаплазмы и спироплазмы.
- •Питательные среды для культивирования микоплазм
- •Лабораторная диагностика контагиозной плевропневмонии крупного рогатого скота
- •Выделение и идентификация культуры возбудителя
- •Серологическая диагностика
- •Выделение и идентификация культур возбудителей
- •Микроскопическое исследование исходного материала
- •Выделение и идентификация микоплазм от овец и коз
- •Серологическая диагностика
- •Лабораторная диагностика микоплазмозов свиней
- •Микроскопическое исследование исходного материала
- •Выделение и идентификация свиных микоплазм
- •Серологическая диагностика
- •Лабораторная диагностика микоплазмозов птиц
- •Микроскопическое исследование исходного материала
- •Выделение и идентификация культур микоплазм
- •Серологическая диагностика
- •Лабораторная диагностика Ку-лихорадки
- •Бактериологическое исследование
- •Серологическая диагностика
- •Бактериологическое исследование
- •Микроскопическое исследование материала
- •Выделение и идентификация культуры возбудителя
- •Лабораторная диагностика неориккетсиоза собак
- •Микроскопическое исследование материала
- •Биопроба. На собаках путем заражения кровью или тканью селезенки можно проводить серийные пассажи возбудителя. Инкубационный период 6-12 дней. Серологическая диагностика
- •Лабораторная диагностика анаплазмоза крупного и мелкого рогатого скота
- •Микроскопическое исследование материала
- •Серологическая диагностика
- •Микроскопическое исследование материала
- •Лабораторная диагностика гемабартонеллеза кошек
- •Микроскопическое исследование материала
- •Биопроба. При внутривенном, интраперитонеальном или оральном заражении материалом кошек воспроизводится клинически выраженное заболевание.
- •Микроскопическое исследование исходного материала
- •Выделение и идентификация хламидии
- •Серологическая диагностика
- •Лабораторная диагностика бешенства
- •Индикация и идентификация вируса
- •Серологическая идентификация
- •Лабораторная диагностика ящура
- •Серодиагностика и ретроспективная диагностика
- •Лабораторная диагностика ортомиксовирусных инфекций
- •Лабораторная диагностика гриппа птиц
- •Серологическая идентификация
- •Лабораторная диагностика классической чумы свиней
- •Серологическая идентификация
- •Серодиагностика и ретроспективная диагностика
- •Индикация и идентификация вируса
- •Серодиагностика и ретроспективная диагностика
Бактериологическое исследование
Объектом исследования является ткань из гранулом, в том числе заключенная в 10%-ный формалин для гистологического изучения, образцы молока при маститах, экссудат, гной.
Микроскопическое исследование исходного материала
Из исследуемого материала готовят мазки, окрашивают их по Граму, для выявления кислотоустойчивости по модифицированному методу Циля— Нильсена. Молоко предварительно центрифугируют, препарат делают из осадка. При микроскопии окрашенных по Граму препаратов в положительных случаях обнаруживают грамположительные клетки нитевидной ветвящейся формы, палочки, кокки. В мазках, окрашенных по модифицированному методу Циля—Нильсена, находят аналогичные структурные элементы, но красного цвета. В гистологических препаратах из гранулом находят микроколонии возбудителя, состоящие из скопления ветвящихся грамположительных нитевидных форм.
Выделение и идентификация патогенных видов рода Nocardia
Культивирование. Посев материала проводят на кровяной агар, сердечно-мозговой кровяной агар, декстрозный агар Сабуро. Культивирование проводят при 25- 27° С в течение 7 суток в аэробных условиях.
N. asteroides обычно формирует колонии на кровяном и сердечно-мозговом агарах на 4-5-е сутки культивирования, на агаре Сабуро — несколько позднее. Колонии диаметром 1-2 мм прочно соединены с питательным субстратом. Цвет колоний от белого до желтовато-розового, розового или темно-оранжевого, с редким воздушным мицелием.На колонии N. asteroides весьма похожи колонии непатогенных видов рода Streptomyces. Образующиеся воздушные гифы можно обнаруживать микроскопией. Обычно на воздушных, реже на вегетативных конидиях могут наблюдаться короткие и длинные цепи конидий.
Морфология клеток нокардий в культуре. Из подозрительных колоний готовят мазки, которые окрашивают по Граму и модифицированному методу Циля-Нильсена. В положительных случаях находят грамположительные нити, распадающиеся со временем (2-7 суток) на палочковидные формы и коккобактерии. В мазках из молодых культур, окрашенных по Цилю-Нильсену, находят ветвящиеся клетки красного цвета.
Идентификация нокардий на уровне рода. Дифференциацию нокардий от сходных видов родов Actynomyces, Streptomyces, Dermatophilus проводят после определения признаков, представленных в таблице 59 (см. «Лабораторная диагностика актиномикоза»). К нокардиям относят культуры, типичные по морфологии колоний, клеток для рода Nocardia, являющиеся строгими аэробами, обладающие каталазной активностью, растущие на декстрозном агаре Сабуро, имеющие на колониях воздушные гифы, образующие споры (конидии), проявляющие склонность к фрагментации нитевидных структур на палочковидные и кокковидные формы, расщепляющие в тесте Хью-Ляйфсона глюкозу путем оксидации (в аэробных условиях), а также при отсутствии острого специфического запаха у культур.
Идентификация нокардий на уровне вида. При наличии у животных характерных для нокардиоза патологоанатомических изменений и выделении культур, типичных по вышеперечисленным признакам для нокардий, диагноз, в принципе, может быть установлен. Определенные затруднения представляет дифференциация кроличьего нокардиоза от актиномикоза. Лабораторные критерии дифференциации возбудителей представлены в таблице 67.
Питательные среды
Культивирование этой группы микроорганизмов не представляет трудностей. Для их выделения из патологического материала можно использовать теллуритовую среду, декстрозный агар Сабуро, сердечно-мозговой агар и среду Левенштейна-Иенсена. Для подавления посторонней микрофлоры рекомендуется при выделении N. asteroides добавлять в питательную среду диметилхлортетрациклин (5 мкг/мл) или метилтетрациклин (10 мкг/мл) и противогрибные антибиотики.
Таблица 67 - Дифференцирующие признаки видов Nocardia
Признаки |
N.amarae |
N.asteroides |
N.brasilliensis |
N.brevicatena |
N.carnea |
N.farcinica |
N.nova |
N.otitidiscaviarum |
N.pinensis |
N.seriolae |
N.transvalensis |
N.vaccinii |
Разложение | ||||||||||||
Казеина |
- |
- |
+ |
- |
- |
- |
|
- |
- |
- |
- |
- |
Эластина |
- |
- |
+ |
- |
- |
- |
|
- |
|
|
- |
- |
Эскулина |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
|
+ |
- |
+ |
+ |
+ |
Гипоксантина |
- |
- |
+ |
- |
- |
- |
|
+ |
- |
- |
+ |
- |
Тестостерона |
- |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
|
- |
|
|
- |
- |
Тирозина |
- |
- |
+ |
- |
- |
- |
|
- |
- |
- |
- |
- |
Ксантина |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
|
+ |
- |
- |
d |
- |
Рост за счет использования как единственного источника углерода (%, масса/объем) | ||||||||||||
Адонитола (1,0) |
- |
- |
- |
+ |
- |
- |
|
- |
|
|
+ |
- |
L-арабинозы (1,0) |
- |
- |
- |
- |
+ |
- |
- |
- |
|
|
- |
d |
Мезоинозитола (1,0) |
+ |
- |
+ |
+ |
- |
- |
- |
+ |
|
- |
- |
+ |
D-маннитола (1,0) |
+ |
- |
+ |
+ |
- |
- |
- |
+ |
|
- |
- |
+ |
L-рамноза (1,0) |
+ |
- |
+ |
- |
- |
+ |
- |
- |
|
- |
- |
+ |
Адипиновой к-ты (0,1) |
+ |
- |
- |
- |
d |
- |
|
- |
|
- |
+ |
- |
Изобутанола |
- |
- |
d |
- |
+ |
+ |
+ |
- |
|
|
|
- |
Пимелиновой к-ты (0,1) |
+ |
|
|
|
|
|
|
- |
|
|
- |
+ |
Себациловой к-ты (0,1) |
+ |
+ |
- |
- |
d |
d |
|
+ |
|
|
- |
- |
Образование | ||||||||||||
Кислой фосфатазы |
- |
+ |
+ |
|
+ |
- |
- |
+ |
|
- |
|
+ |
а-эстеразы |
- |
- |
- |
|
- |
- |
+ |
- |
|
- |
|
+ |
(3-эстеразы |
- |
- |
+ |
|
+ |
+ |
+ |
d |
|
- |
|
+ |
Нитратредуктазы |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
+ |
+ |
+ |
- |
|
+ |
+ |
Уреазы |
+ |
+ |
+ |
- |
- |
+ |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
+ |
Устойчивость к лизоциму |
- |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
|
+ |
- |
+ |
+ |
+ |
11-89% штаммов положительные.
Лабораторная диагностика бруцеллёза
Род Brucella содержит шесть видов бактерий, из которых пять вызывают заболевания сельскохозяйственных и домашних животных. Для В. abortus основным хозяином является крупный рогатый скот; восприимчивы также овцы, козы, свиньи, лошади, человек. Вид подразделяется на девять биотипов, из которых биотипы 1 и 2 распространены повсеместно, третий - в Индии, Египте, Восточной Африке, пятый - в Германии и Британии, другие биотипы относятся к категории редко встречающихся. В. melitensis поражает овец и коз, также восприимчив крупный рогатый скот, человек. Этот вид бруцелл распространен везде, где разводят мелкий рогатый скот. В. suis включает четыре биовара, из которых первые три поражают свиней, а четвертый выделяют от северных оленей. Первый биотип распространен повсеместно, второй — в Центральной и Восточной Европе, третий — в США, Аргентине, четвертый (олений) — в арктической зоне. В. ovis поражает овец, обуславливая эпидидимиты и спорадические аборты, распространен повсеместно в регионах овцеводства.
Основным хозяином для В. canis являются собаки, восприимчив также человек. В. neotomae выделяют в А от крыс; случаи изоляции этого вида бруцелл от других видов животных известны.
Согласно последней реклассификации представителей рода Brucella дложено рассматривать как биовары В. melitensis: биовары melitensis, suis, ovis, canis, neotomae и maris. Биовар maris адаптирован к морским животным.
Лабораторная диагностика бруцеллеза основана на результатах бактериологического и серологического исследований.