- •Министерство сельского хозяйства
- •Формы взаимодействия микро и макро организмов
- •Характерные особенности инфекционной болезни
- •Методы лабораторных исследований
- •Лабораторная диагностикакоринебактериозов
- •Выделение и идентификация коринебактерии
- •Питательные среды
- •Бактериологическое исследование
- •Микроскопическое исследование исходного материала
- •Бактериологическое исследование
- •Микроскопическое исследование исходного материала
- •Биопроба. Проводят с целью выделения культуры возбудителя из исследуемого мате риала и проверки патогенных свойств выделенной культуры.
- •Микроскопическое исследование исходного материала
- •Выделение и идентификация культуры возбудителя
- •Питательные среды такие же как и при лабораторной диагностике актинобациллезной пневмонии свиней.
- •Микроскопическое исследование исходного материала
- •Выделение и идентификация культуры возбудителя
- •Выделение и идентификация культуры возбудителя
- •Сывороточно-дрожжевой бульон. Готовят так же, как и сывороточно-дрожжевой агар, но на основе жидкой питательной среды.
- •Лабораторная диагностика бортелиоза
- •Бактериологическое исследование
- •Выделение и идентификация бордетелл
- •Бактериологическое исследование
- •Питательные среды
- •Лабораторная диагностика сапа
- •Биопроба. Проводят с целью обнаружения возбудителя в исследуемом материале и подтверждения патогенных свойств выделенной культуры на золотистых хомячках, морских свинках.
- •Выделение и идентификация культуры возбудителя
- •Микроскопическое исследование исходного материала
- •Микроскопическое исследование исходного материала
- •Выделение и идентификация культуры возбудителя
- •Питательные среды
- •Питательные среды
- •Микроскопическое исследование исходного материала
- •Выделение и идентификация кампилобактерии
- •Серологическая диагностика
- •Питательные среды
- •Биопроба. Проводят в случаях, когда микроскопическое исследование материала дает отрицательные результаты. Заражают молодых кур, кроликов, морских свинок, белых мышей, куриные эмбрионы.
- •Питательные среды
- •Определение потребности в холестерине. От стерола не зависят ахолеплазмы, требуют его для своего роста микоплазмы, уреаплазмы и спироплазмы.
- •Питательные среды для культивирования микоплазм
- •Лабораторная диагностика контагиозной плевропневмонии крупного рогатого скота
- •Выделение и идентификация культуры возбудителя
- •Серологическая диагностика
- •Выделение и идентификация культур возбудителей
- •Микроскопическое исследование исходного материала
- •Выделение и идентификация микоплазм от овец и коз
- •Серологическая диагностика
- •Лабораторная диагностика микоплазмозов свиней
- •Микроскопическое исследование исходного материала
- •Выделение и идентификация свиных микоплазм
- •Серологическая диагностика
- •Лабораторная диагностика микоплазмозов птиц
- •Микроскопическое исследование исходного материала
- •Выделение и идентификация культур микоплазм
- •Серологическая диагностика
- •Лабораторная диагностика Ку-лихорадки
- •Бактериологическое исследование
- •Серологическая диагностика
- •Бактериологическое исследование
- •Микроскопическое исследование материала
- •Выделение и идентификация культуры возбудителя
- •Лабораторная диагностика неориккетсиоза собак
- •Микроскопическое исследование материала
- •Биопроба. На собаках путем заражения кровью или тканью селезенки можно проводить серийные пассажи возбудителя. Инкубационный период 6-12 дней. Серологическая диагностика
- •Лабораторная диагностика анаплазмоза крупного и мелкого рогатого скота
- •Микроскопическое исследование материала
- •Серологическая диагностика
- •Микроскопическое исследование материала
- •Лабораторная диагностика гемабартонеллеза кошек
- •Микроскопическое исследование материала
- •Биопроба. При внутривенном, интраперитонеальном или оральном заражении материалом кошек воспроизводится клинически выраженное заболевание.
- •Микроскопическое исследование исходного материала
- •Выделение и идентификация хламидии
- •Серологическая диагностика
- •Лабораторная диагностика бешенства
- •Индикация и идентификация вируса
- •Серологическая идентификация
- •Лабораторная диагностика ящура
- •Серодиагностика и ретроспективная диагностика
- •Лабораторная диагностика ортомиксовирусных инфекций
- •Лабораторная диагностика гриппа птиц
- •Серологическая идентификация
- •Лабораторная диагностика классической чумы свиней
- •Серологическая идентификация
- •Серодиагностика и ретроспективная диагностика
- •Индикация и идентификация вируса
- •Серодиагностика и ретроспективная диагностика
Серологическая диагностика
Для ретроспективной диагностики хламидиозов животных используют РСК, РДСК, ИФА. Абортировавших животных исследуют на нарастание титра антител (положительный результат — увеличение титра антител в 4 раза и более). Животных, вакцинированных против хламидийного аборта, не исследуют в течение 12 месяцев.
РСК ставят в объеме 1 мл (по 0,2 мл каждого компонента) или в микроварианте по общепринятой схеме. Комплемент, разведенный 1:20, титруют с дозы 0,02 до 0,2 мл с интервалом 0,02 мл. Гемолизин используют в удвоенном титре, эритроциты в виде 2,5%-ной, а для РДСК — 3%-ной взвеси. Группоспецифический хламидийный антиген берут в рабочем титре, указанном на коробке. Сыворотки крови исследуют в разведениях 1:5 и 1:10. Предварительно испытуемые и контрольные сыворотки разводят 1:5, инактивируют при 56-60° С, в зависимости от вида животного, в течение 30 минут. Первую фазу РСК проводят в водяной бане при 37-38° С в течение 30 минут, вторую фазу — 20 минут.
Контроли главного опыта РСК: позитивная сыворотка в разведении 1:5 без антигена и с контрольным антигеном; в разведениях от 1:5 до предельного титра — со специфическим антигеном; негативная сыворотка в разведениях 1:5 и 1:10 со специфическим антигеном в разведении 1:5 с контрольным антигеном и без антигена; контроль антигенов на антикомплемен-тарность: специфический и контрольный антиген в двойной дозе + комплемент + гемсистема; контроль антигенов на гемотоксичность: специфический и контрольный антиген в двойной дозе + гемсистема, комплемент не добавляют.
При постановке РДСК первую фазу проводят при 2-6° С в течение 16-18 часов, вторую фазу — 20 минут при 37-38° С.
Комплемент используют в рабочем разведении 1:25 или 1:30.
Варьирующим компонентом является гемолитическая система, ее титруют на позитивной, негативной и одной из исследуемых сывороток. Для этого при проведении второй фазы РДСК гемсистему берут в дозах от 0,1 мл до 1 мл, с интервалом 0,1 мл. Сыворотки для титрования гемсистемы разводят и добавляют остальные компоненты одновременно с исследуемыми сыворотками.
При оценке результатов РСК и РДСК за положительный результат принимают задержку гемолиза на 2-4 креста в разведении сыворотки 1:10; сомнительный — задержка на 1 крест в сыворотке, разведенной 1:10, и на 1-4 креста в сыворотке, разведенной 1:5.
Для диагностики хламидиоза свиней из-за присутствия неполных (блокирующих) антител вместо классической РСК и РДСК рекомендуется применять реакцию непрямого связывания комплемента (РНСК, РПСК). В реакцию вводят дополнительный компонент (позитивная сыворотка, содержащая полные антитела) и поэтому общий объем компонентов реакции составляет не 1 мл, а 1,2 мл.
Иммуноферментный метод применяют с использованием коммерческого диагностического набора, включающего специфический хламидиозный антиген, специфическую хламидиозную сыворотку, отрицательную сыворотку, пероксидазный антивидовой конъюгат и необходимые химические реагенты. Реакцию проводят по общепринятой схеме. Исследуют парные сыворотки крови в разведениях 1:200-1:6000. Результат реакции учитывают через 30-40 минут после внесения стоп-раствора. При визуальном учете в положительном случае наблюдают оранжево-коричневое окрашивание, как и в позитивном контроле. В отрицательных пробах цвет реакционной смеси не меняется или имеет слабую желтую окраску, как в отрицательном контроле. При спектрофотомет-рическом учете используют специальные фотометры с вертикальным лучом при длине волны 490 нм. Результаты выражают в единицах оптической плотности (ОП490). Положительными считаются пробы, ОП490 которых в два и более раза превосходит уровень оптической плотности отрицательного контроля. Сомнительные пробы — пробы, у которых ОП490 составляет 0,150-0,1999 оптических единиц. Уровень оптической плотности ниже 0,150 единиц свидетельствует об отрицательной реакции. Основанием, согласно наставлению по диагностике хламидиозов, для постановки предварительного диагноза считается увеличение титра антител в парных сыворотках в 2-4 раза. Сыворотки, давшие сомнительный результат, исследуют повторно. Животных, с сыворотками крови которых получены положительные и сомнительные результаты, исследуют повторно прямыми методами диагностики для постановки окончательного диагноза.