2. Какая группа микроорганизмов может быть использована для промышленного получения субстанции тиамина бромида.

В аптеке глазная мазь с тиамина бромидом 0,5% и 1% по 10,0 изготавливается как внутриаптечная заготовка. Предложите оптимальный вариант технологии в количестве 30 доз 0,5% мази. Обоснуйте выбор основы, правила введения лекарственного вещества, укажите срок годности этой мази.

Для промышленного получения субстанции тиамина бромида (группа витаминов В, в частности – В₁). Могут быть использованы дрожжи, бактерии, мицелярные грибы, актиномицеты, метановые и другие виды бактерий.

Для расширения производства витаминов группы В используют микроорганизмы – продуценты (сверхсинтетиков) и специальные режимы культивирования.

Согласно приказа МЗ РФ № 214 от 16 июля 1997 г. «О контроле качества лекарственных средств, изготовляемых в аптечных организациях (аптеках)». Приложение 2.

Мази глазные, как внутриаптечную заготовку можно готовить 0,5% и 1% мазь глазную тиаминовую.

Состав: Тиамина бромида 0,05 или 0,1

Основы для глазных мазей 10,0

Основу для глазных мазей, согласно приказа № 214 получают путем сплавления ланолина безводного и вазелина сорта для глазных мазей в фарфоровой чашке при нагревании на водяной бане. Расплавленную основу процеживают через несколько слоев марли, фасуют в сухие простерилизованные стеклянные банки, обвязывают пергаментной бумагой и стерилизуют в воздушном стерилизаторе при температуре 180С в течение 30-40 минут или при температуре 200С в течение 15-20 минут в зависимости от массы мази.

Состав основы для глазных мазей на 100 г.:

ланолина безводного 10 г

вазелина сорта для глазных мазей 90 г

Срок хранения основы для глазных мазей 30 суток, в защищенном от света месте.

Технология 0,5% мази глазной тиаминовой 10,0 №30 как внутриаптечной заготовки.

Необходимо изготовить мягкую лекарственную форму – глазную мазь, представляющую собой мазь – эмульсию на липофильной основе.

Оборотная сторона

паспорта письменного контроля

тиамина бромида 0,05х30=1,5 г

основы для глазных мазей 300,0 (10,0х30,0)

В асептических условиях в стерильной ступке растворяют 1,5 г тиамина бромида в минимальном количестве воды (тиамин бромид легко растворим в воде очищенной, поэтому его предварительно растворяют), добавляют 300,0 стерильной основы для глазных мазей, тщательно перемешивают. Готовую мазь в асептических условиях дозируют по 10,0 в простерилизованные стеклянные банки, которые укупоривают навинчиваемыми пластмассовыми крышками с простерилизованными прокладками. Оформляют этикетками розового цвета «Глазная мазь», предупредительная надпись «Хранить в защищенном от света месте» (приказ №214, приказ №120).

Лицевая сторона

паспорта письменного контроля.

Дата № треб.

Thiamini bromidi 1,5

Basis pro ocilis 10,0

Общая масса 300,0 10,0 №30

Срок хранения мази 30 суток.

К билету №40

В условиях биотехнологического производства лекарственных средств:

1. Укажите, какие ферменты имеют коферментами производные рибофлавина.

2. Назовите микроорганизмы, которые могут быть продуцентами его в промышленных маштабах.

Рибофлавин или витамин В₁₂ содержится в клетках различных микроорганизмов, будучи ферментом в составе флавопротеинов (прежде всего – соответствующих из класса асидоредуктаз – ФМН, ФАД). Флавиновыми ферментами называют окислительно восстановительные ферменты в простеническую группу, которая входит рибофлавинными витамин В₂. Вследствие этого они имеют желтую окраску. Флавопротеины обнаруживают, кроме того характерную флуореценцию. Важнейшей функцией флавиновых ферментов является дегидрирование (окисление) восстановленных форм никотинамид аценин динуклеопидов (НАД Н₂ и НАДР Н₂). При этом простетическая группа флавинового фермента восстанавливается и фермент обесцвечивается.

Флавин – аденин – динуклеотсид (ФАД) простетическая группа ряда флавиновых ферментов.

Флавиновые ферменты широко распространены в тканях особенно в печени, сердце, почках, а также в дрожжах. Белковая часть у разных флавоновых ферментов не одинакова, специфичность их зависит от строения белковой части.

Флавоновые ферменты принимают активное участие в процессах тканевого дыхания, например НАД Н₂ убихиноноксиредуктаза – она занимает сложное место в цепи биологического оксисления, дегидрируя НАДН₂ и восстанавливая коэнзим Q. При этом простетическая группа (куда и входит рибофлавин) фермента играет роль промежуточного акцептора-донатора водорода. Продуцентами рибофлавина (флавопротеинов) могут быть бактерии, дрожжи и нитчатые грибы. Однако наиболее перспективными являются те штаммы, которые образуют на жидких среда 0,5 г и более рибофлавины в 1 литре среды. К подобным организмам относятся Ashbyii gossypii.

Учитывая изменчивость активных продуцентов названных видов по способности синтезировать витамин В₂, необходим систематический поддерживающий отбор культур в процессе их эксплуатации на производстве. Обычно активные продуценты первых двух видов формируют яркооранжевые колонпи на агаризованных средах. Методами генной инженерии удалось получить штаммы сенной палочки, образующей около 6 г рибофлавина в 1 литре среды, включающей мелассу, белково-витаминный концентрат и его гидролизат.

Для Candida guilliermondii важно регулировать содержание железа в питательной среде. Оптимальные концентрации колеблются в среднем от 0,05 до 0,05 мкг/мл. При этом определенные штаммы дрожжей могут образовывать за 5-7 дней до 0,5 г/л и более витаминов. Однако для целей промышленного производства рибофлавина предпочитают более продуктивные виды и штаммы грибов – Еremothecum ashbyii и Ashleyii gossypii.