Граф логічної структури теми: “мікробіологічна діагностика менінгококової інфекції”

МЕТОДИ ДІАГНОСТИКИ

ЕКСПРЕС-МЕТОД

БАКТЕРІОЛОГІЧНИЙ

СЕРОЛОГІЧНИЙ

МІКРОСКОПІЧНИЙ

МІКРОСКОПІЯ

ДОСЛІДНОГО МАТЕРІАЛУ

ВИЯВЛЕННЯ АНТИТІЛ

В РПГА, РІФ (непряма), ІФА З ГРУПОСПЕЦИФІЧНИМИ ПОЛІСАХАРИДНИМИ АНТИГЕНАМИ

РІФ

ДОСЛІДНИЙ МАТЕРІАЛ

ВИДІЛЕННЯ

ЧИСТОЇ КУЛЬТУРИ

ОЦІНКА РЕЗУЛЬТАТІВ

ОЦІНКА РЕЗУЛЬТАТІВ

ВЛАСТИВОСТІ ВИДІЛЕНОЇ ЧИСТОЇ КУЛЬТУРИ

КУЛЬТУРАЛЬНІ

БІОХІМІЧНІ

АНТИГЕННІ

ОЦІНКА РЕРЕЗУЛЬТАТІВ

ВИЗНАЧЕННЯ ВИДУ, ПАТОГЕННОСТІ

ВСТАНОВЛЕННЯ МІКРОБІОЛОГІЧНОГО ДІАГНОЗУ

Контрольні питання

1. Який матеріал використовується для мікробіологічних досліджень при менінгококовій інфекції ?

2. Які особливості мікроскопічного методу діагностики менінгококової інфекції?

3. Яке значення має бактеріологічний метод у діагностиці менінгококової інфекції?

4. Які особливості культуральних властивостей менінгококів?

5. У чому полягає серологічний метод діагностики менінгококової інфекції?

6. У чому полягає експрес-діагностика менінгококової інфекції?

Тестові завдання

Тест 1

До мікробіологічної лабораторії доставлено спинномозкову рідину хворого з підозрою на менінгококову інфекцію. Проведено мікроскопічне дослідження мазків. Які морфологічні ознаки мікробів можуть підтвердити діагноз?

1. Диплококи бобовидної форми, що знаходяться в лейкоцитах

2. Тетракоки

3. Мікрококи в цитоплазмі лейкоцитів

4. Стрептококи

5. Стафілококи

Тест 2

Бактеріальну культуру нанесли петлею на поверхню фільтрувального паперу, змоченого тетраметилпарафенілендіаміном. Слід посіву набув червоного кольору, що свідчить про позитивну реакцію. Назвіть цю реакцію.

1. Оксидазна реакція

2. Реакція на H₂S

3. Реакція на індол

4. Реакція Фогеса-Проскауера

5. Реакція на аміак

Тест 3

При мікроскопічному дослідженні препарату виявили парно розташовані мікроорганізми синього кольору, що нагадували зерна кави. Назвіть спосіб фарбування препарату.

1. За Грамом

2. За Леффлером

3. За Нейссером

4. За Бурі

5. За Цілем-Нільсеном

Тест 4

З чистої добової культури менінгококів різних серогрупп виготували мазки на предметних скельцях. Після фіксації препаратів, на них на 30 хвилин нанесли сироватку, яку досліджували, промили й обробили флуоресціюючою сироваткою проти глобулінів людини. Препарати вивчили в люмінесцентному мікроскопі. Назвіть реакцію, яку використовували в даному випадку.

1. ПЦР

2. ІФА

3. РА

4. РІФ (пряма)

5. РІФ (непряма)

Тест 5

Досліджувану сироватку двократно послідовно розвели в лунках планшета й внесли в кожну лунку завись еритроцитів, сенсибілізованих специфічним полісахаридом менінгокока. Назвіть цю реакцію.

1. Реакція гемолізу

2. Реакція гемаглютинації

3. Реакція пасивної гемаглютинації

4. Реакція зворотної пасивної гемаглютинації

5. Реакція зв’зування компліменту

Завдання. Розташуйте за допомогою цифр та стрілок послідовність етапів (означено цифрами) бактеріологічного методу діагностики менінгококової інфекції

Мікробіологічна діагностика

гонококової інфекції

Збудник – Neisseria gonorrhoeae входить до родини Neisseriaсеае, роду Neisseria. Для мікробіологічного дослідження використовують гнійне виділення з уретри, вагіни, шийки матки, передстатевої залози та інших органів, уражених гонококами, а також осад сечі. Матеріал із уретри беруть при натискуванні на задню стінку каналу, видавлюючи краплину гною. Секрет передстатевої залози отримують шляхом масажування. Виділення з слизової оболонки шийки матки добувають тампоном. Мікробіологічну діагностику гонококової інфекції проводять мікроскопічним, бактеріологічним, серологічним методами.

Мікроскопічний метод. З матеріалу, який досліджують готують 2 препарати та фарбують метиленовим синім і за Грамом. При мікроскопії гонококи мають вид бобовидних грамнегативних диплококів, розташованих позаклітинно або в середині клітини (нейтрофільних гранулоцитів). Фарбування за Грамом дозволяє диференціювати гонококи.

Для виявлення гонококів в препараті також використовують пряму РІФ (див. додаток) у зв'язку з тим, що в матеріалі можуть знаходитися східні грамнегативні бактерії. При прямій РІФ мазки оброблюють флюоресцуючими антитілами проти гонококів і вивчають антигенні властивості збудника. Поєднання антигену з антитілом стає видимим при використанні люмінесцентного мікроскопа. Гонококи при додаванні специфічної флюоресциюючої сироватки у люмінесцентному світлі візуалізуються як зелено-жовте світіння.

Бактеріологічний метод. Використовується в тих випадках, коли гонококи в препаратах не виявляють, або знаходять нетипові, змінені форми. Метод включає виділення чистої культури гонококів на спеціальних живильних середовищах, її ідентифікацію з врахуванням характерних для гонококів ознак.

Слід враховувати особливу чутливість гонококів до температури та дезінфікуючих засобів, тому дослідний матеріал повинен досліджуватися зразу ж без відстрочення. За 1-2 дні до висіву необхідно припинити застосовування хворим антибіотиків. Висів роблять безпосередньо після отримання матеріалу на асцитичний агар, або «середовище для культивування гонококів». Перед висівом живильне середовище слід нагріти в термостаті. Для кращого росту гонококів чашки з висівами вміщують в ексикатор, де створюється необхідна концентрація СО_2. Через добу інкубації при температурі 37° С на живильному середовищі з'являються прозорі, з рівними краями, опуклі, слизової консистенції колонії гонококів, що нагадують краплі роси.

Серологічний метод. Використовується при хронічній формі гонореї, коли у хворого відсутні виділення та застосувати мікроскопічний і бактеріологічний методи неможливо. З сироваткою крові хворого ставлять РЗК (див. додаток), при якій антигеном є гонококова вакцина, або спеціальний антиген, виготовлений з вбитих формаліном гонококів.

Таблиця 1. Диференційні ознаки окремих видів роду NЕISSERIА

Ознаки	N.gonorr-hoeae	N.menin-gitidis	N.sicca	N.subflava	N.flaves-cens	N.mucosa
Капсула	-	+	v	+	-	+
Утворення кислоти з глюкози	+	+	+	+	-	+
мальтози	-	+	+	+	-	+
фруктози	-	-	+	V	-	+
сахарози	-	-	+	v	-	+
крохмалю	-	-	v	v	-	+
Утворення Н2S	-	-	+	+	+	+
Відновлен ня нітратів	-	d	+	+	+	+
Пігмент	-	-	d	+	+	-
Ріст при 22ºС	-	-	d	d	+	+
Потреба в СО2	Vi	i	-	-	-	-

Примітка: ознака

+ -позитивна більш чим у 90% штамів

d - у деяких штамів ознака позитивна, у деяких негативна

v - ознака непостійна, в одного штама може бути іноді позитивна, іноді - негативна

Vi – дуже важливо

i - важливо

Схема „Мікробіологічна діагностика гонококової інфекції”