- •Зміст лабораторного заняття:
- •Техніка безпеки при роботі у біохімічній лабораторії
- •Забороняється з метою уникнення травм, опіків, нещасних випадків:
- •Перша домедична допомога
- •Заняття 1 Тема: Історія біохімії. Якісні (кольорові) реакції на амінокислоти та білки теоретична частина
- •Практична частина:
- •ХIд роботи
- •Заняття 2 Тема: Властивості білків теоретична частина
- •Практична частина
- •ХIд роботи
- •Заняття 3 Тема: Кількісне визначення білків за допомогою біуретового реактиву теоретична частина:
- •Практична частина
- •Хід роботи
- •Заняття 4 Тема: амінокислоти і білки (семінар)
- •Заняття 5 Тема: Властивості вуглеводів теоретична частина:
- •Практична частина:
- •Хід роботи
- •Заняття 6 Тема: властивості, будова, роль лІпІдІв. Реакція на жири і жироподІбнІ речовини теоретична частина:
- •Практична частина:
- •Хід роботи
- •Заняття 7 Тема: будова і властивості нуклеопротеЇдІв теоретична частина:
- •Цитозин
- •Практична частина:
- •Заняття 8 Тема: загальні властивості ферментів теоретична частина:
- •Властивості ферментів:
- •ПРактична частина:
- •Хід роботи
- •Заняття 9 Тема: Якісні реакції на вітаміни теоретична частина:
- •Практична частина:
- •Хід роботи
- •ВодоРозчинні вітаміни
- •ЖироРозчинні вітаміни
- •Заняття 10 Тема: біологічне Окиснення речовин теоретична частина:
- •Практична частина
- •Заняття 11 Тема: обмін вуглеводів (частина 1). Визначення концентрації глюкози в крові теоретична частина:
- •Практична частина
- •Хід роботи
- •Заняття 12 Тема: обмін вуглеводів (частина 2). Визначення молочної кислоти у біологічному матеріалі теоретична частина:
- •Практична частина:
- •Хід роботи
- •Заняття 13 Тема: обмін вуглеводів (семінар)
- •Заняття 14 Тема: Перетравлення білків у шлунково-кишковому тракті. Визначення сечовини в біологічних рідинах діацетилмонооксимним методом теоретична частина:
- •Катаболизм аминокислот:
- •Біосинтез сечовини (орнітиновий цикл)
- •Практична частина:
- •Хід роботи
- •У пробірки відміряють послідовно, відповідно таблиці, біологічну рідину і робочі розчини. Для зменшення похибки аналізу рекомендується притримуватися обговореного порядку змішання розчинів.
- •Заняття 15 Тема: Обмін ліпідів. Визначення концентрації загального холестерину у біологічних рідинах (за методом Ілька) теоретична частина:
- •Окисний розпад нейтральних жирів (ацилгліцеринів) у тканинах
- •Хід роботи
- •Хід роботи:
- •Заняття 16 Тема: Обмін води та мінеральних солей. Біохімія крові теоретична частина:
- •Заняття 17 Тема: Механізм м’язового скорочення. Біологічні мембрани
- •Механізм м’язового скорочення.
- •Механізм м’язового розслаблення.
- •Особливості енергетичного обміну у скелетних м’язах.
- •Тестовий контроль модуль 1 «Будова і фізико-хімічні властивості біоорганічних речовин»
- •30. Електрофорез − це:
- •82. Каталітичний центр ферменту − це:
- •83. Адсорбційний центр ферменту − це:
- •84. Алостеричний центр ферменту – це:
- •94. Неконкурентне інгібування – це:
- •Модуль 2 «Обмін речовин»
- •71. Склад плазми крові:
- •72. Фібриноген − це:
- •85. Актин − це:
- •86. Тропоміозин − це:
- •92. Роль ядерної мембрани:
- •93. Роль ендоплазматичного ретикулуму:
- •94. Роль мембрани апарату Гольджі:
- •95. Роль мембрани лізосом:
- •Індивідуальні завдання
- •Питання до іспиту
- •Глосарій
- •Рекомендована література Основна:
- •Додаткова:
- •Навчально-методичний посібник
Механізм м’язового розслаблення.
Для процесу розслаблення необхідна енергія у вигляді АТФ. Mg+2-, Ca+2 –АТФ-аза, яка знаходиться у мембрані саркоплазматичного ретикулуму, активується під впливом карнозину та анзерину, використовуючи енергію АТФ та починає перекачувати іони кальцію із саркоплазми у порожнину цистерн. Внаслідок цього концентрація іонів кальцію знижується до 10-8 – 10-7 моль/л, що приводить до розпаду комплексів 1 та 2. Зміна конформації тропоніну 1 сприяє блокуванню активних центрів F-актину і розпаду актоміозину. М’яз розслаблюється та його довжина досягає початкової.
Для отримання енергії скелетні м’язи, у першу чергу, використовують лактат.
Особливості енергетичного обміну у скелетних м’язах.
Для скорочення м’язів витрачається велика кількість АТФ, тому в м’язах постійно протікає ресинтез АТФ двома основними шляхами:
креатинкіназний шлях:
креатинфосфокіназа
к реатинфосфат + АДФ АТФ + креатин,
міокіназний шлях:
аденілаткіназа
2 АДФ АТФ + АМФ.
Запаси креатинфосфату у м’язі також не великі та витрата енергії постійно відшкодовується біосинтезом АТФ у гліколізі, β-окисненні, ЦТК та окислювальному фосфорилюванні. При помірній роботі м’язів енергетичні витрати покриваються за рахунок аеробного метаболізму; при великих навантаженнях можливість постачання м’язів киснем відстає від потреби в ньому, тому м’яз змушений використовувати анаеробний шлях постачання енергії, в результаті чого йде накопичення лактату. Лактат не використовується м’язом (відсутня лактатдегідрогеназа 1), кров відносить його у печінку на глюконеогенез (цикл Корі), і глюкоза знову повертається у м’язи.
Клітинна мембрана (або плазматична мембрана) відокремлює вміст будь-якої клітини від зовнішнього середовища,забезпечуючи її цілісність. Вона регулює обмін між клітиною і середовищем. Внутрішньоклітинні мембрани поділяють клітину на спеціалізовані замкнуті відсіки - компартменти або органели, в яких підтримуються певні умови внутрішньоклітинного середовища.
Клітинна мембрана являє собою подвійний шар (бішар) молекул класу ліпідів,більшість з яких представляє собою так звані складні ліпіди - фосфоліпіди. Молекули ліпідів мають гідрофільну («голівка») і гідрофобну («хвіст») частини. При утворенні мембран гідрофобні ділянки молекул виявляються зверненими всередину, а гідрофільні - назовні. Холестерол надає мембрані жорсткість, займаючи вільний простір між гідрофобними хвостами ліпідів і не дозволяючи їм згинатися. Тому мембрани з малим вмістом холестеролу більш гнучкі, а з більшим - більш жорсткі і тендітні. Також холестерол перешкоджає переміщенню полярних молекул з клітини і в клітину. Біологічна мембрана включає і різні білки: інтегральні (пронизують мембрану наскрізь), навпілінтегральні (занурені одним кінцем в зовнішній або внутрішній ліпідний шар), поверхневі (розташовані на зовнішній або прилеглі до внутрішньої сторонам мембрани). Деякі білки є крапками контакту клітинної мембрани з цитоскелетом в середині клітини і клітинною стінкою (якщо вона є) зовні. Деякі з інтегральних білків виконують функцію іонних каналів, різних транспортерів і рецепторів.
Функції мембран:
бар'єрна - забезпечує регульований, виборчий, пасивний і активний обмін речовин з навколишнім середовищем. Виборча проникність означає, що проникність мембрани для різних атомів або молекул залежить від їх розмірів, електричного заряду і хімічних властивостей. Виборча проникність забезпечує відділення клітини і клітинних компартментів від навколишнього середовища і постачання їм необхідних речовин.
транспортна - через мембрану відбувається транспорт речовин у клітину і з клітини. Транспорт через мембрани забезпечує: доставку поживних речовин, видалення кінцевих продуктів обміну, секрецію різних речовин, створення іонних градієнтів, підтримання в клітині відповідного pH і іонної концентрації, які потрібні для роботи клітинних ферментів.
механічна – забезпечує автономність клітини, її внутрішньоклітинних структур, також з’єднання з іншими клітинами (в тканинах). Велику роль у забезпечення механічної функції мають клітинні стінки, а у тварин - міжклітинна речовина.
рецепторна - деякі білки, що знаходяться в мембрані, є рецепторами (молекулами, за допомогою яких клітина сприймає ті чи інші сигнали). Наприклад, гормони, що циркулюють у крові, діють тільки на такі клітини-мішені, у яких є відповідні цим гормонам рецептори.
ферментативна - мембранні білки нерідко є ферментами. Наприклад, плазматичні мембрани епітеліальних клітин кишечника містять ферменти травлення.
здійснення генерації та проведення біопотенціалів.
Клітинні мембрани мають виборчу проникність: через них повільно дифундують глюкоза, амінокислоти, жирні кислоти, гліцерин та іони, причому самі мембрани певною мірою активно регулюють цей процес - одні речовини пропускають, а інші ні. Існує чотири основних механізми для надходження речовин у клітину або виведення їх з клітини назовні: дифузія, осмос, активний транспорт і екзо- або ендоцитоз. Два перших процесу носять пасивний характер, тобто не вимагають витрат енергії; два останні - активні процеси, пов'язані зі споживанням енергії.
Запитання для домашнього (письмового) виконання:
1. Замалюйте структуру м’язів на різних рівнях організації.
2. Опишіть процес скорочення м’язів. Замалюйте цей процес.
3. Опишіть процес гліколізу при м‘язовому скороченні.
4. Заповніть таблицю «Основні мембрани клітини і їх функції»:
Компонент клітинної структури |
Біологічна роль |
Плазматична мембрана |
|
Ядерна мембрана |
|
Ендоплазматичний ретикулум |
|
Мембрана апарату Гольджі |
|
Мітохондріальна мембрана |
|
Мембран лізосом |
|
5. Заповніть таблицю «Ліпіди мембран»:
Назва |
Будова (формула) |
Фосфоліпіди |
|
Похідні гліцерину: Фосфатидна кислота Фосфатидилхолін Фосфатидилсерин Фосфатидилетаноламін Кардіоліпін |
|
Похідні сфінгозину: Сфінгомієлін |
|
Гліколіпіди |
|
Похідні сфінгозину: Глюкоцероброзид Лактозилцерамід |
|
Холестерин |
|
6. Замалюйте таблицю в лабораторному зошиті і вивчить питання щодо переносу речовин крізь мембрани»:
Дифузія речовин за градієнтом концентрації, самовільний процес |
|||
Проста дифузія |
Не потребує спеціальних переносників |
О2, Н2О, СО2, низькомолекулярні гідрофобні молекули (стероїдні гормони) |
|
Полегшена дифузія |
Відбувається за участю спеціальних білкових структур, які полегшують дифузію гідрофільних речовин крізь гідрофобний шар мембран |
||
|
Транслоказа пропускає речовину в двох напрямках |
Глют-2-транслоказа мембрани гепатоцитів переносить глюкозу в обох напрямках |
|
Пасивний симпорт − переміщення іонів за градієнтом концентрації в одному напрямку |
Транспорт Н+ і пірувату крізь внутрішню мембрану мітохондрій в матрикс |
||
Пасивний антипорт − переміщення іонів за градієнтом концентрації в протилежних направленнях |
Транспорт аніонів Cl- і НСО3- крізь мембрану еритроцитів |
||
Канали, які регулюються |
Са2+-канал мембрани ендоплазматичного ретикулуму, який регулюється ІФ-3 |
||
Активний транспорт, перенос речовин проти градієнту концентрації, несамовільний процес, необхідне джерело енергії |
|||
Первинно-активний транспорт |
Джерело енергії − АТФ |
Na+, K+-АТФаза, Са2+-АТФаза |
|
Вторинно-активний транспорт |
Джерело енергії − градієнт концентрації однієї речовини, яка переноситься |
− |
|
Симпорт |
Транслоказа переносить в клітину 2 речовини, одна з них переміщується проти градієнту концентрації за рахунок переміщення іншої речовини за градієнтом концентрації |
Na+-залежний транспорт глюкози в клітини кишечнику |
|
Антипорт |
Переміщення речовин відбувається в протилежних напрямках − одне з них проти градієнту концентрації за рахунок переміщення іншої речовини за градієнтом концентрації |
Са2+, Na+-активний антипорт |
Мета заняття: засвоїти теоретичний матеріал з тем «Механізм м’язового скорочення», «Біологічні мембрани». Для виконання роботи необхідно вивчити такі питання теорії:
Запитання до обговорення:
Будова м’язів.
Структурна організація поперечно-полосатих м’язів.
Саркомер скелетних м’язів.
Хімізм м’язового скорочення.
Скорочення в нем’язових клітинах.
Розслаблення м’язів.
Основні мембрани клітини і їх функції.
Структура компонентів плазматичних мембран.
Білки мембран. Білок-ліпідне співвідношення. Білки інтегральні, периферичні.
Механізми проникнення речовин крізь мембрани.
Трансмембранна передача сигналу: аденілатциклазна система, інозитолфосфатна система, каталітичні рецептори, передача сигналу за допомогою внутрішньоклітинних рецепторів.
Ушкодження мембран активними формами кисню.
Перекисне окиснення ліпідів: механізм, вплив на структуру і властивості мембран.
Захист мембран від перекисного окиснення ліпідів і репарація окислювальних ушкоджень.