3.3. Доказательство химической природы гемопротеинов

К гемопротеинам относят гемоглобин, миоглобин, ферменты каталазу, пероксидазу и цитохромы. Их молекулы состоят из белка и простетической группы — гема. Для доказательства наличия последнего используется бензидиновая проба.

Ход определения

К 1 мл раствора крови добавьте 5 капель 5 % свежеприготовленного спиртового раствора бензидина и 5 капель 3 % раствора пероксида водорода. При окислении бензидина пероксидом водорода появляется синее окрашивание. Эта реакция используется в судебно-медицинской практике для выявления пятен крови.

Оформите протокол исследования. Сделайте выводы из проведенных экспериментов.

Контроль выполнения лабораторной работы

1. Чем можно осадить муцин?

2. Как можно доказать белковую природу муцина, казеина, гемоглобина?

3. С помощью какого реактива обеспечивается доказательство наличия углеводной компоненты в муцине?

4. С какой целью можно использовать молибденовый реактив?

Темы рефератов:

1. Родопсин: строение и функции в организме.

2. Особенности строения гликопротеинов, обеспечивающие выполнение их функций.

3. Классификация липопротеинов и их роль в организме.

4. Строение нуклеопротеинов и их роль в хранении и передаче генетической информации.

5. Альбумины: строение и физиологические функции.

6. Глобулины плазмы крови как апопротеины сложных белков.

Лабораторно-практическое занятие №4

Тема: Ферменты. Строение, механизм действия.

Цель: Изучить принципы структурно-функциональной организации ферментов на основе знаний строения простых и сложных белков. Выяснить механизм действия и влияние различных факторов на скорость энзиматической реакции.

Значение: Энзимы - регуляторы процессов клеточного метаболизма. Обычно – это белки, компоненты (ко-, апофермент) которых обеспечивают не только разрыв связей в субстрате (активный центр), но и регулируют скорость преобразований (аллостерический центр).

Исходный уровень

1. Особенности строения аминокислот, уровни организации белковой мицеллы. Понятие о мультимерах.

2. Строение, классификация, роль простых и сложных белков.

3. Физико-химические и биологические свойства протеинов.

4. Понятие о центрах связывания и лигандах.

5. Сущность химического катализа. Свойства минеральных катализаторов.

6. Клеточные органоиды, строение и функции.

Вопросы для самоподготовки

1. Ферменты – биологические катализаторы, определение. Отличительные особенности ферментов от минеральных катализаторов. График изменения свободной энергии в ходе катализируемой и некатализируемой реакции.

2. Особенности строения ферментов. Понятие о холоферменте. Апофермент, кофермент, кофактор. Химическая природа, биологическая роль.

3. Косубстраты, их роль в химических реакциях на примере аскорбиновой кислоты.

4. Функциональные центры ферментов (активный и аллостерический). Их структура, лиганды и биологическая роль.

5. Энзимы, имеющие четвертичную структуру апофермента. Мультиэнзимные комплексы (пируватдегидрогеназный, 2-оксо-глутаратдегидрогеназный мультиэнзимные комплексы, синтаза ВЖК). Изоэнзимы. Особенности строения лактатдегидрогеназы (ЛДГ). Органоспецифичность ферментов (на примере ЛДГ). Использование изоэнзимов в диагностике заболеваний.

6. Механизм действия ферментов. Этапы ферментативного катализа. Основные положения теорий ферментативного катализа (Фишера, Кошланда). Современные представления: а) концентрационный эффект; б) ориентационный эффект; в) эффект индуцированного соответствия или полифункциональный катализ.

7. Специфичность действия ферментов. Виды специфичности: субстратная (абсолютная, групповая, стереоспецифичность), каталитическая.

8. Факторы, влияющие на скорость ферментативной реакции (концентрации фермента, кофермента, субстрата, изменение температуры, рН среды).