Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
БХ / Метод 2008 / Новая метод полная.doc
Скачиваний:
197
Добавлен:
14.05.2015
Размер:
1.17 Mб
Скачать

Литература

Основная:

  1. Лекции «Биохимия тканей: соединительной, мышечной, нервной. Биохимия иммунитета».

  2. Биологическая химия : Учебник / Е.С. Северин, Т.Л. Алейникова, Е.В. Осипов, С.А. Силаева. – М. : ООО «Медицинское информационное агентство», 2008. – С. 343 - 362.

  3. Березов Т.Т. Биологическая химия: Учебник. – 3-е изд., перераб. И доп./ Т.Т.Березов, Б.Ф.Коровкин. – М.: Медицина, 1998. – С.625-679.

  4. Николаев А.Я. Биологическая химия / А.Я.Николаев. – М.:Мед. инф. агентство, 2004. – С. 452-474.

  5. Гомбоева А.Ц. Биохимия тканей / А.Ц.Гомбоева, Л.П. Никитина. – Чита, 2004. – 51с.

  6. Ситуационные задачи по биохимии: Учебное пособие для студентов лечебного и педиатрического факультетов // Л.П.Никитина, А.Г.Гомбоева, Н.В.Соловьева и др. – 2-е изд., испр. И доп. – Чита, 2003.- С.30-32.

6. Патохимия наследственных болезней. Учебное пособие для студентов лечебного и педиатрического факультетов // Никитина Л.П., Гомбоева А.Ц., Соловьева Н.В. – Чита, 2008. – С.101-111.

Дополнительная:

  1. Биохимия / Под ред. Е.С.Северина. – М.:ГЭОТАР-МЕД, 2005 (2003). – С. 616-636.

  2. Николаев А.Я. Биологическая химия / А.Я.Николаев. – М.:Мед. инф. агенство. -2004. – С. 452-474.

3. Биохимия. Тесты и задачи: Учеб. Пособие для студ. Мед. вузов / Под ред.

Е.С.Северина. – М.: ВЕДИ, 2005. – С.335-347.

4. Биохимия (в вопросах и ответах) (Учебное пособие для студентов мед. вузов в вопросах и ответах) / Т.П.Вавилова, О.Л.Евстафьева. – М.: ВЕДИ, 2005.- С.105-115.

5. Биохимия. Краткий курс с упражнениями и задачами / Под ред. Член-корр. Е.С.Северина, А.Я.Николаева. – М.: ГЭОТАР-МЕД, 2001. – С. 162-173; 387-390.

6. Клиническая биохимия / под ред. В.А.Ткачука. – М.:ГЭОТАР-МЕД, 2002. – С.32-57.

7. Щербак И.Г. Биохимия: Учебник. – СПб.: СПбГМУ, 2005. – С. 353-412.

8. Адгезивные белки межклеточного матрикса. Их роль в межклеточных взаимодействиях и развитии опухолей. Возрастные и патологические изменения соединительной ткани при старении. (Методичка для самостоятельной работы).

9. Медиаторы: ацетилхолин, катехоламины, серотонин, ГАМК, гистамин, глицин. Физиологически активные пептиды мозга (Методичка для самостоятельной работы).

Лабораторная работа

34.1. Унифицированный метод определения сиаловых кислот

Принцип метода. При нагревании гликопротеидов плазмы с трихлоруксусной кислотой отщепляются сиаловые кислоты, которые в свою очередь гидролизуются с образованием свободной нейраминовой и уксусной кислот. Резорцин в присутствии солей меди дает с нейраминовой кислотой синее окрашивание.

Ход определения

К 0,1 мл плазмы или сыворотки прилейте 1,9 мл раствора трихлоруксусной кислоты, поставьте на 7 мин в кипящую водяную баню для гидролиза, затем охладите и отфильтруйте через бумажный фильтр. К 0,5 мл прозрачного фильтрата добавьте 0,5 мл воды и 1 мл резорцинового реактива, закройте стеклянными пробками и поставьте вновь на кипящую водяную баню еще на 15 мин. После этого охладите, прилейте 3 мл экстрагирующего реактива, встряхните и оставьте на 15 мин для расслоения фаз. Окраска переходит в верхний слой, который отделите и измерьте на ФЭКе при длине волны 575-590 нм в кювете с длиной оптического пути 0,5 см против холостой пробы, при постановке которой к 1 мл воды добавьте 1 мл резорцинового реактива. Остальные процедуры те же, что и в опыте. Для построения калибровочного графика возьмите по 1 мл калибровочных растворов, приготовленных согласно таблице, добавьте по 1 мл резорцинового реактива и обработайте также, как в опыте.

Расчет проведите по калибровочному графику.

Калибровочные растворы. Основной раствор содержит 0,5 мг ацетилнейраминовой кислоты в 1 мл воды. Из него готовят калибровочные растворы.

Основной раствор ацетил-

нейрам.

Кислоты, мл

Вода,

мл

Содержание

Соответствует концентрации

в плазме

мкг

нмоль

мг/л

132А132т/л

0,1

0,9

50

162

200

0,65

0,2

0,8

100

324

400

1,29

0,3

0,7

150

485

600

1,94

0,4

0,6

200

647

800

2,59

0,5

0,5

250

809

1000

3,24

Нормальные величины. В норме величины сиаловых кислот составляют в системе СИ 2,0-2,33 ммоль/л независимо от того, выражаются результаты определения в свободной нейраминовой кислоте или же в ее ацетилированной форме — сиаловых кислотах. Содержание нейраминовой кислоты в весовых единицах колеблются 620-730 мг/л.

Клиническое значение. Уровень сиаловых кислот возрастает при самых разнообразных воспалительных процессах, а также при опухолях, инфаркте миокарда.

Контроль выполнения лабораторной работы

1. Почему при нагревании гликопротеинов с ТХУ отщепляются сиаловые кислоты?

2. Строение и биологическая роль сиаловых кислот.

Темы рефератов:

1. Изменения соединительной ткани при старении, коллагенозах.

2. Биохимические изменения при мышечных дистрофиях и денервации мышц.

3. Нарушения обмена биогенных аминов при психических заболеваниях.

4. Предшественники катехоламинов и ингибиторы моноаминооксидазы в лечении депрессивных состояний.

Соседние файлы в папке Метод 2008