Литература

Основная:

1. Лекции «Ферменты. Строение. Функциональные центры ферментов. Механизм действия ферментов».

2. Биологическая химия : Учебник / Е.С. Северин, Т.Л. Алейникова, Е.В. Осипов, С.А. Силаева. – М. : ООО «Медицинское информационное агентство», 2008. – С. 29 – 35.

3. Николаев А.Я. Биологическая химия. – 3-е изд., перераб. и доп. – М.: Медицинское информационное агентство, 2004. – С.61-78; 80-86; 89-91; 97-98.

4. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия: Учебник. – 3-е изд., перераб. и доп. – М.: Медицина, 1998. – С.114 – 145.

5. Ситуационные задачи по биохимии: Учебное пособие для студентов лечебного и педиатрического факультетов // Никитина Л.П., Гомбоева А.Ц., Соловьева Н.В. и др. – 2-е изд., испр. и доп. - Чита, 2003. – С. 6.

Дополнительная:

1. Биохимия / Под ред. Е.С.Северина – М.: ГЭОТАР-МЕД, 2005 (2003). – С.75-80; 83-102; 120-122.

2. Биохимия (в вопросах и ответах) (учебное пособие для студентов мед. вузов) / Т.П.Вавилова, Евстафьева О.Л. – М.: ВЕДИ, 2005. – С.13 – 21.

3. Биохимические основы патологических процессов / Под ред. Е.С.Северина. – М.: Медицина, 2000.- С.8-17.

4. Биохимия. Краткий курс с упражнениями и задачами / Под ред. Е.С.Северина. – М.: ГЭОТАР-МЕД, 2001. – С.32-41; 343-347.

5. Биохимия. Тесты и задачи: Учеб. пособие для студ. мед. вузов / Под ред. Е.С.Северина. – М.: ВЕДИ, 2005. – С.9-20.

6. Биологическая химия: Учеб. пособие для студ. высш. учеб. завед / Под ред. Ковалевской. – М.: Издат. Центр «Академия», 2005. – С.5-6; 9-33.

7. Клиническая биохимия / Под ред. В.А.Ткачука.-М.: ГЭОТАР-МЕД, 2002.- С.72-82.

8. Гринстейн Б., Гринстейн А. Наглядная биохимия. Пер. с англ. – М.: ГЭОТАР-МЕД, 2004. – С. 70–74.

9. Щербак И.Г. Биохимия: Учебник. – СПб.: СПбГМУ, 2005. – С.105 -121.

10. История развития энзимологии. Строение ферментов (роль кофактора). (Методички для самостоятельной работы).

11. Мультисубстратные реакции (Методичка для самостоятельной работы).

Лабораторная работа

4.1. Воздействие температуры на неорганический катализатор и фермент

По биологическим свойствам энзимы отличаются от минеральных катализаторов. Активность ферментов зависит от ряда факторов, в том числе и от температуры, с увеличением которой белковая часть биокатализатора подвергается денатурации.

Ход определения

В четыре пробирки внесите по 2 мл 1% раствора пероксида водорода (Н₂О₂) в качестве субстрата. В первую пробирку насыпьте немного порошка МnO₂, во вторую – 1 мл гемолизированной крови. Пробирку встряхните и наблюдайте выделение пузырьков газообразного кислорода. В третью пробирку внесите прокалённый на огне МnO₂, а в четвёртую – гемолизированную кровь, подвергнутую кипячению. Сравните интенсивность выделения пузырьков кислорода и сделайте вывод.

4.2.Специфичность действия ферментов

Ферменты – белки, обладающие каталитической активностью. Изменение их активности и количества в тканях сопровождается нарушениями в обмене веществ. Ферменты имеют высокую специфичность действия по отношению к субстрату. Для исследования используется биологическая жидкость – слюна, содержащая ряд энзимов, в том числе амилазу, которая гидролизует крахмал.

Приготовление слюны. Ротовую полость слегка ополосните дистиллированной водой, чтобы очистить от остатков пищи. Наберите новую порцию воды (около 15 – 20 мл) в рот и ополосните его в течение 1 – 2 мин. Соберите жидкость в пробирку или стаканчик, после чего отфильтруйте и используйте для проведения анализа.

Ход определения

Возьмите две пробирки. В первую отмерьте 2 мл 0,5% раствора крахмала, а во вторую – 2 мл 20% раствора сахарозы. В обе пробирки добавьте по 2 мл слюны, разведённой водой, встряхните и инкубируйте при температуре 37ºС в течение 10 мин. Проведите с содержимым обеих пробирок пробу Троммера. Положительный результат вы получите при наличии редуцирующего углевода – мальтозы (продукт гидролиза крахмала) в первой пробирке. Проба отрицательна – при отсутствии восстанавливающего углевода (вторая пробирка).

Проба Троммера. К 1 мл исследуемой жидкости прилейте равный объём 10% раствора гидроксида натрия и по каплям 1% раствор сульфата меди (II) до получения неисчезающей при взбалтывании голубой мути гидроксида меди (II). Верхнюю часть содержимого пробирки осторожно нагрейте. При наличии углевода, обладающего восстанавливающими свойствами, образуется жёлтый осадок гидроксида меди (I) и красный – оксида меди (I).