- •Государственное образовательное учреждение
- •Лабораторно-практическое занятие № 1
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •1.1.Биуретовая реакция
- •1.2.Нингидриновая реакция
- •1.3.Ксантопротеиновая реакция
- •1.4.Реакция Фоля
- •Лабораторно-практическое занятие № 2
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •1.Реакции осаждения белков
- •1.1.Высаливание белков сульфатом аммония
- •1.2.Необратимые реакции осаждения белков
- •1.2.1. Осаждение белков при нагревании
- •1.2.2. Осаждение белков минеральными кислотами
- •1.2.3. Осаждение белков органическими кислотами
- •1.2.4.Осаждение белков солями тяжелых металлов
- •2.Количественное определение белка биуретовым методом
- •Лабораторно-практическое занятие № 3
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •3.1.Выделение муцина из слюны и изучение его свойств
- •3.2.Выделение казеина из молока
- •3.2.1.Осаждение казеина и доказательства его белковой природы
- •3.2.2.Доказательство наличия простетической группы в казеине
- •3.3. Доказательство химической природы гемопротеинов
- •Лабораторно-практическое занятие №4
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •4.1. Воздействие температуры на неорганический катализатор и фермент
- •4.2.Специфичность действия ферментов
- •4.3.Влияние рН на активность ферментов
- •Лабораторно-практическое занятие №5
- •Литература
- •5.1. Эффект активирующего и ингибирующего влияний на ферменты
- •Лабораторно-практическое занятие № 6
- •Лабораторно-практическое занятие № 7
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •7.1. Сопоставление редокс-потенциалов рибофлавина и метиленового синего
- •7.2. Качественное определение активности сукцинатдегидрогеназы мышц
- •7.3. Действие пероксидазы крови
- •Лабораторно-практическое занятие № 8
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •8.1. Количественное определение пировиноградной кислоты в моче
- •Лабораторно-практическое занятие № 9
- •Лабораторно-практическое занятие №10
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •10.1. Определение концентрации глюкозы в крови глюкозооксидазным методом
- •Лабораторно-практическое занятие №11
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •11.1. Выявление пентозурии пробой Биаля
- •11.2. Выявление фруктозурии пробой Селиванова
- •Лабораторно-практическое занятие №12
- •Литература
- •Лабораторная работа Изучение состояния углеводного обмена методом нагрузок
- •12.1. Проба на толерантность к глюкозе
- •12.2. Выявление мукополисахаридозов пробой с толуидиновым синим
- •Лабораторно-практическое занятие №13
- •Лабораторно-практическое занятие №14
- •Литература
- •14.1. Качественные реакции на жёлчные кислоты (реакция Петтенкофера).
- •Лабораторно-практическое занятие №15
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •15. Исследование содержания таг в плазме крови
- •15.1. Ферментативный метод определения содержания таг в плазме крови
- •Лабораторно-практическое занятие №16
- •Литература
- •16.1. Метод определения содержания общего хс в сыворотке крови с помощью холестеролоксидазной реакции
- •16. 2. Определение содержания хс лпвп
- •16. 3. Определение содержания хс лпонп и хс лпнп
- •Практическое занятие №17
- •Лабораторно-практическое занятие №18
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •18.1. Обнаружение крови в желудочном соке
- •18.2. Реакция на молочную кислоту в желудочном содержимом
- •18.3. Определение активности аланин-аминотрансферазы
- •Лабораторно-практическое занятие №19
- •Лабораторная работа
- •19.1. Количественное определение мочевины в крови
- •19.2. Качественная реакция на наличие фенилпировиноградной кислоты в моче
- •Лабораторно-практическое занятие №20
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •20.1. Качественная реакция на мочевую кислоту
- •20.2. Количественное определение мочевой кислоты в моче и крови
- •Лабораторно-практическое занятие №21
- •Литература
- •Практическое занятие №22
- •Лабораторно-практическое занятие № 23
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •23.3.1. Качественная реакция на токоферолы с концентрированной азотной кислотой
- •Лабораторно-практическое занятие №24
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •24.1. Диазореакция на витамин в1
- •24. 2. Доказательство восстанавливающих свойств витамина в2
- •24. 3. Реакция витамина в6 с хлорным железом
- •24. 4. Качественная реакция на витамин с с раствором йода
- •24. 5. Количественное определение витамина с в продуктах питания с 2,6-дихлорфенолиндофенолом
- •24.5. 1. Определение содержания витамина с в картофеле
- •Лабораторно – практическое занятие № 25
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •25.1. Открытие йода в щитовидной железе
- •25.2. Цветные реакции на инсулин
- •25.2.1. Ксантопротеиновая реакция
- •Лабораторно – практическое занятие № 26
- •Лабораторная работа
- •26.3. Качественная реакция на фолликулин (эстрон)
- •Практическое занятие № 27 Коллоквиум по теме: «Биологически активные вещества»
- •Лабораторно-практическое занятие № 28
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •28.1. Доказательство присутствия глюкозы в моче
- •28.1.1. Проба Троммера на глюкозу в моче
- •28.1.2. Проба Фелинга на глюкозу
- •28.1.3. Полуколичественное определение глюкозы в моче
- •28.2. Открытие кетоновых тел в моче
- •28.2.1. Проба Легаля на кетоновые тела
- •28.2.2. Проба Либена на кетоновые тела
- •Лабораторно-практическое занятие № 29
- •Литература Основная:
- •Лабораторная работа
- •28.1. Освобождение крови от белков
- •28. 2. Доказательство присутствия гемоглобина в моче
- •28.2.1. Бензидиновая проба на гемоглобин
- •28.2.2. Определение наличия Hb с помощью комбинированных тест-полосок
- •Лабораторно-практическое занятие № 30
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •Лабораторно-практическое занятие № 31
- •Лабораторно-практическое занятие № 32
- •Литература
- •1. Количественное определение глюкозы в крови
- •2. Проба на толерантность к глюкозе
- •3. Количественное определение холестерина в сыворотке крови
- •4. Количественное определение общей и свободной кислотности желудочного содержимого
- •5. Количественное определение билирубина по методу Йендрашека
- •6. Количественное определение кальция в сыворотке крови
- •7. Количественное определение неорганических фосфатов в крови
- •8. Определение физико-химических свойств мочи
- •9. Количественное определение пировиноградной кислоты (пвк) в моче
- •10. Количественное определение белков в плазме крови
- •11. Количественное определение мочевины в крови
- •1. Цветные реакции на аминокислоты, пептиды, белки:
- •2. Необратимые реакции осаждения белков (денатурация):
- •3. Доказательство наличия белка в моче (проба Геллера)
- •4. Доказательство наличия глюкозы в моче
- •5. Доказательство наличия кетоновых тел в моче
- •6. Доказательство наличия билирубина в моче
- •7. Доказательство наличия крови в моче (кале, желудочном содержимом)
- •13. Доказательство наличия молочной кислоты в желудочном содержимом
- •Лабораторно-практическое занятие № 33
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •33.1. Определение кальция в сыворотке крови по методу де Ваарда
- •33.2. Качественный анализ мочи
- •33.2.1. Определение рН, доказательство наличия белка, глюкозы, кетоновых тел, уробилина и крови с помощью комбинированных тест-полосок.
- •33.2.2. Качественная реакция на кровяные пигменты
- •33.2.3. Качественные реакции на желчные пигменты
- •Лабораторно-практическое занятие № 34
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •34.1. Унифицированный метод определения сиаловых кислот
- •Лабораторно-практическое занятие № 35
Лабораторно-практическое занятие №15
Тема: Метаболизм кетоновых тел. Биосинтез жирных кислот и нейтральных жиров. Обмен фосфолипидов.
Цель: На основе знаний об особенностях строения и функционирования мультиэнзимных комплексов сформировать представления о механизме синтеза высших жирных кислот. Изучить химизм процессов образования триацилглицеролов, фосфолипидов и кетоновых тел.
Значение: В организме человека большая часть липидов приходится на ТАГ, которые являются главными липидами жировых отложений и пищи. ВЖК, высвобождающиеся при гидролизе нейтральных жиров, составляют основной энергетический материал многих тканей. Они окисляются до ацетил-КоА и образуются из него, но эти процессы пространственно разобщены и катализируются разными ферментными системами. Компартментализация позволяет избирательно регулировать реакции синтеза и распада в соответствии с потребностями клетки.
Первостепенное значение биосинтеза ЖК заключается в трансформации избытка углеводов, поступающих в организм, и аккумулировании их энергии для использования через какое-то время в процессе работы или между приёмами пищи. При голодании окисление ВЖК протекает более интенсивно, в результате чего в печени синтезируются кетоновые тела, имеющие кислотную природу. Увеличение их концентрации в крови при некоторых патологических состояниях, например, при сахарном диабете, может привести к развитию кетоацидоза и даже к летальному исходу.
ФЛ и ГЛ представляют собой амфифильные соединения и идеально подходят для образования основных компонентов биологических мембран. Некоторые ФЛ выполняют и специфические функции: фосфатидилинозитолы служат предшественниками вторичных посредников переноса гормонального сигнала в клетки; ацетил-ФЛ, известный как тромбоцитактивирующий фактор, участвует в развитии ряда острых аллергических и воспалительных реакций у человека и животных; дипальмитоилфосфатидилхолин, являющийся основным компонентом сурфактанта лёгких, иногда отсутствует у недоношенных детей, в результате чего у них наблюдается расстройство дыхания. Таким образом, изучение метаболизма ТАГ, ВЖК и ФЛ имеет важное значение для понимания многих аспектов энергетического обмена и патологических отклонений, развивающихся в случае его нарушения.
Исходный уровень:
1. Классификация липидов, строение ТАГ, ВЖК, ФЛ, ГЛ и составляющих их компонентов ( ВЖК, этаноламина, холина, серина, инозитола, сфингозина, моносахаридов, N-ацетилгалактозамина, N-ацетилнейраминовой кислоты).
2. Гидролиз и гидрогенизация жиров.
3. Классификация и номенклатура ферментов.
4. Общие пути катаболизма.
5. Тканевое дыхание и окислительное фосфорилирование. Пути синтеза АТФ.
6. Пентозофосфатный путь окисления глюкозы как источник восстановленного НАДФ.
Вопросы для самоподготовки:
1. Кетоновые тела, их строение, пути синтеза. Концентрация кетоновых тел в крови в норме, их утилизация тканями. Регуляция кетогенеза. Причины гиперкетонемии и кетонурии. Кетоацидоз.
2. Биосинтез жирных кислот: локализация процесса, строение мультиэнзимного комплекса синтазы ЖК, химизм реакций. Роль биотина, HSKoA, восстановленных форм НАДФ в процессе синтеза пальмитиновой кислоты.
3. Реакции удлинения углеводородной цепи в молекулах ВЖК. Процессы десатурации, образование олеиновой кислоты. Эссенциальные ЖК, их источники и роль в организме.
4. Биосинтез нейтральных жиров. Фосфатидная кислота как центральный метаболит обмена ТАГ и ФЛ.
5. Пути образования глицерофосфолипидов. Липотропные и антилипотропные вещества, их роль в синтезе ФЛ.
6. Анаболизм сфингомиелинов и гликолипидов.