- •Государственное образовательное учреждение
- •Лабораторно-практическое занятие № 1
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •1.1.Биуретовая реакция
- •1.2.Нингидриновая реакция
- •1.3.Ксантопротеиновая реакция
- •1.4.Реакция Фоля
- •Лабораторно-практическое занятие № 2
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •1.Реакции осаждения белков
- •1.1.Высаливание белков сульфатом аммония
- •1.2.Необратимые реакции осаждения белков
- •1.2.1. Осаждение белков при нагревании
- •1.2.2. Осаждение белков минеральными кислотами
- •1.2.3. Осаждение белков органическими кислотами
- •1.2.4.Осаждение белков солями тяжелых металлов
- •2.Количественное определение белка биуретовым методом
- •Лабораторно-практическое занятие № 3
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •3.1.Выделение муцина из слюны и изучение его свойств
- •3.2.Выделение казеина из молока
- •3.2.1.Осаждение казеина и доказательства его белковой природы
- •3.2.2.Доказательство наличия простетической группы в казеине
- •3.3. Доказательство химической природы гемопротеинов
- •Лабораторно-практическое занятие №4
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •4.1. Воздействие температуры на неорганический катализатор и фермент
- •4.2.Специфичность действия ферментов
- •4.3.Влияние рН на активность ферментов
- •Лабораторно-практическое занятие №5
- •Литература
- •5.1. Эффект активирующего и ингибирующего влияний на ферменты
- •Лабораторно-практическое занятие № 6
- •Лабораторно-практическое занятие № 7
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •7.1. Сопоставление редокс-потенциалов рибофлавина и метиленового синего
- •7.2. Качественное определение активности сукцинатдегидрогеназы мышц
- •7.3. Действие пероксидазы крови
- •Лабораторно-практическое занятие № 8
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •8.1. Количественное определение пировиноградной кислоты в моче
- •Лабораторно-практическое занятие № 9
- •Лабораторно-практическое занятие №10
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •10.1. Определение концентрации глюкозы в крови глюкозооксидазным методом
- •Лабораторно-практическое занятие №11
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •11.1. Выявление пентозурии пробой Биаля
- •11.2. Выявление фруктозурии пробой Селиванова
- •Лабораторно-практическое занятие №12
- •Литература
- •Лабораторная работа Изучение состояния углеводного обмена методом нагрузок
- •12.1. Проба на толерантность к глюкозе
- •12.2. Выявление мукополисахаридозов пробой с толуидиновым синим
- •Лабораторно-практическое занятие №13
- •Лабораторно-практическое занятие №14
- •Литература
- •14.1. Качественные реакции на жёлчные кислоты (реакция Петтенкофера).
- •Лабораторно-практическое занятие №15
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •15. Исследование содержания таг в плазме крови
- •15.1. Ферментативный метод определения содержания таг в плазме крови
- •Лабораторно-практическое занятие №16
- •Литература
- •16.1. Метод определения содержания общего хс в сыворотке крови с помощью холестеролоксидазной реакции
- •16. 2. Определение содержания хс лпвп
- •16. 3. Определение содержания хс лпонп и хс лпнп
- •Практическое занятие №17
- •Лабораторно-практическое занятие №18
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •18.1. Обнаружение крови в желудочном соке
- •18.2. Реакция на молочную кислоту в желудочном содержимом
- •18.3. Определение активности аланин-аминотрансферазы
- •Лабораторно-практическое занятие №19
- •Лабораторная работа
- •19.1. Количественное определение мочевины в крови
- •19.2. Качественная реакция на наличие фенилпировиноградной кислоты в моче
- •Лабораторно-практическое занятие №20
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •20.1. Качественная реакция на мочевую кислоту
- •20.2. Количественное определение мочевой кислоты в моче и крови
- •Лабораторно-практическое занятие №21
- •Литература
- •Практическое занятие №22
- •Лабораторно-практическое занятие № 23
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •23.3.1. Качественная реакция на токоферолы с концентрированной азотной кислотой
- •Лабораторно-практическое занятие №24
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •24.1. Диазореакция на витамин в1
- •24. 2. Доказательство восстанавливающих свойств витамина в2
- •24. 3. Реакция витамина в6 с хлорным железом
- •24. 4. Качественная реакция на витамин с с раствором йода
- •24. 5. Количественное определение витамина с в продуктах питания с 2,6-дихлорфенолиндофенолом
- •24.5. 1. Определение содержания витамина с в картофеле
- •Лабораторно – практическое занятие № 25
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •25.1. Открытие йода в щитовидной железе
- •25.2. Цветные реакции на инсулин
- •25.2.1. Ксантопротеиновая реакция
- •Лабораторно – практическое занятие № 26
- •Лабораторная работа
- •26.3. Качественная реакция на фолликулин (эстрон)
- •Практическое занятие № 27 Коллоквиум по теме: «Биологически активные вещества»
- •Лабораторно-практическое занятие № 28
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •28.1. Доказательство присутствия глюкозы в моче
- •28.1.1. Проба Троммера на глюкозу в моче
- •28.1.2. Проба Фелинга на глюкозу
- •28.1.3. Полуколичественное определение глюкозы в моче
- •28.2. Открытие кетоновых тел в моче
- •28.2.1. Проба Легаля на кетоновые тела
- •28.2.2. Проба Либена на кетоновые тела
- •Лабораторно-практическое занятие № 29
- •Литература Основная:
- •Лабораторная работа
- •28.1. Освобождение крови от белков
- •28. 2. Доказательство присутствия гемоглобина в моче
- •28.2.1. Бензидиновая проба на гемоглобин
- •28.2.2. Определение наличия Hb с помощью комбинированных тест-полосок
- •Лабораторно-практическое занятие № 30
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •Лабораторно-практическое занятие № 31
- •Лабораторно-практическое занятие № 32
- •Литература
- •1. Количественное определение глюкозы в крови
- •2. Проба на толерантность к глюкозе
- •3. Количественное определение холестерина в сыворотке крови
- •4. Количественное определение общей и свободной кислотности желудочного содержимого
- •5. Количественное определение билирубина по методу Йендрашека
- •6. Количественное определение кальция в сыворотке крови
- •7. Количественное определение неорганических фосфатов в крови
- •8. Определение физико-химических свойств мочи
- •9. Количественное определение пировиноградной кислоты (пвк) в моче
- •10. Количественное определение белков в плазме крови
- •11. Количественное определение мочевины в крови
- •1. Цветные реакции на аминокислоты, пептиды, белки:
- •2. Необратимые реакции осаждения белков (денатурация):
- •3. Доказательство наличия белка в моче (проба Геллера)
- •4. Доказательство наличия глюкозы в моче
- •5. Доказательство наличия кетоновых тел в моче
- •6. Доказательство наличия билирубина в моче
- •7. Доказательство наличия крови в моче (кале, желудочном содержимом)
- •13. Доказательство наличия молочной кислоты в желудочном содержимом
- •Лабораторно-практическое занятие № 33
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •33.1. Определение кальция в сыворотке крови по методу де Ваарда
- •33.2. Качественный анализ мочи
- •33.2.1. Определение рН, доказательство наличия белка, глюкозы, кетоновых тел, уробилина и крови с помощью комбинированных тест-полосок.
- •33.2.2. Качественная реакция на кровяные пигменты
- •33.2.3. Качественные реакции на желчные пигменты
- •Лабораторно-практическое занятие № 34
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •34.1. Унифицированный метод определения сиаловых кислот
- •Лабораторно-практическое занятие № 35
4. Количественное определение общей и свободной кислотности желудочного содержимого
При различных заболеваниях желудка очень важно в диагностике исследование кислотности желудочного содержимого. Различают:
свободную соляную кислоту, которая секретируется в полость желудка в виде диссоциированных ионов водорода и хлора;
связанную соляную кислоту, находящуюся в виде недиссоциированных молекул, т.к. химически связанную с белками;
общую кислотность - это суммарная кислотность всех кислых соединений желудочного сока (кроме соляной кислоты, это кислые соли: бикарбонаты, хлориды; органические кислоты: лактат, ацетат, бутират).
Принцип метода: Существуют зондовые и беззондовые методы получения желудочного сока, который затем титруют 0,1н NаОН в присутствии различных индикаторов. Общая кислотность выражается количеством 0,1 н NаОН, пошедшей на титрование 100 мл желудочного сока в присутствии фенолфталеина. В норме этот показатель составляет 40-60 Ед. Свободная кислотность определяется тем же способом, только в качестве индикатора используется диметиламиноазобензол. Колебания его величин у здорового человека 20-40 Ед.
Избыточное кислотообразование (гиперхлоргидрия) обнаруживается при хроническом гиперацидном гастрите, язвенной болезни 12-перстной кишки. Гипохлоргидрия характерна для язвенной болезни желудка, хронического гипоацидного гастрита. Ахлоргидрия (полное отсутствие соляной кислоты) служит диагностическим признаком атрофического гастрита, рака желудка, пернициозной анемии. При этих заболеваниях может развиться ахилия (отсутствие соляной кислоты и пепсина).
5. Количественное определение билирубина по методу Йендрашека
Гемохромогенные пигменты (билирубин) образуются в клетках РЭС при распаде гемопротеидов (гемоглобина, миоглобина, цитохромов). Получившееся соединение является амфифилом, плохо растворимо в воде и поэтому по крови транспортируется в комплексе с альбумином (свободный билирубин). В таком виде билирубин не реагирует с диазореактивом, поэтому его называют ещё непрямым. Комплекс «альбумин-билирубин» доставляется с током крови в печень, где билирубин преобразуется с помощью уридиндифосфоглюкуроновой кислоты (УДФГК) в растворимый конъюгат «билирубин-глюкуронид» (он даёт прямую реакцию с диазореактивом) – прямой (связанный) билирубин. В норме в плазме крови на долю непрямого (свободного) билирубина приходится не менее 75% всего содержания желчных пигментов, а вклад связанного (конъюгированного) не должен превышать 25%, а может отсутствовать.
Принцип метода: Способ основан на том, что прямой (связанный) билирубин даёт с диазореактивом ( диазотированной сульфаниловой кислотой) розовое окрашивание, а непрямая (свободная) его форма окрашивается только после добавления кофеинового реактива. Норма содержания общего билирубина 8,6-20,5 мкмоль/л, связанного 0-5,1мкмоль /л, свободного до 16,5 мкмоль/л. Количество свободного билирубина вычисляется разностью общего и связанного билирубинов.
Избыток билирубина (гипербилирубинемия) в крови наблюдается при заболеваниях: инфекционных гепатитах, желчнокаменной болезни, панкреатите, серповидноклеточной анемии, алкоголизме, токсоплазмозе и т.д. Это приводит к развитию различных форм желтухи. При гемолитической желтухе регистрируют рост уровня свободного билирубина, а при печёночной повышаются величины обеих форм пигмента. Обтурационная желтуха характеризуется увеличением доли его связанной фракции. Разные паренхиматозные желтухи отличаются различными по направлению сдвигами, обусловленными действием разнообразных по природе токсинов. Гипобилирубинемия не встречается.