
- •Государственное образовательное учреждение
- •Лабораторно-практическое занятие № 1
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •1.1.Биуретовая реакция
- •1.2.Нингидриновая реакция
- •1.3.Ксантопротеиновая реакция
- •1.4.Реакция Фоля
- •Лабораторно-практическое занятие № 2
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •1.Реакции осаждения белков
- •1.1.Высаливание белков сульфатом аммония
- •1.2.Необратимые реакции осаждения белков
- •1.2.1. Осаждение белков при нагревании
- •1.2.2. Осаждение белков минеральными кислотами
- •1.2.3. Осаждение белков органическими кислотами
- •1.2.4.Осаждение белков солями тяжелых металлов
- •2.Количественное определение белка биуретовым методом
- •Лабораторно-практическое занятие № 3
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •3.1.Выделение муцина из слюны и изучение его свойств
- •3.2.Выделение казеина из молока
- •3.2.1.Осаждение казеина и доказательства его белковой природы
- •3.2.2.Доказательство наличия простетической группы в казеине
- •3.3. Доказательство химической природы гемопротеинов
- •Лабораторно-практическое занятие №4
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •4.1. Воздействие температуры на неорганический катализатор и фермент
- •4.2.Специфичность действия ферментов
- •4.3.Влияние рН на активность ферментов
- •Лабораторно-практическое занятие №5
- •Литература
- •5.1. Эффект активирующего и ингибирующего влияний на ферменты
- •Лабораторно-практическое занятие № 6
- •Лабораторно-практическое занятие № 7
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •7.1. Сопоставление редокс-потенциалов рибофлавина и метиленового синего
- •7.2. Качественное определение активности сукцинатдегидрогеназы мышц
- •7.3. Действие пероксидазы крови
- •Лабораторно-практическое занятие № 8
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •8.1. Количественное определение пировиноградной кислоты в моче
- •Лабораторно-практическое занятие № 9
- •Лабораторно-практическое занятие №10
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •10.1. Определение концентрации глюкозы в крови глюкозооксидазным методом
- •Лабораторно-практическое занятие №11
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •11.1. Выявление пентозурии пробой Биаля
- •11.2. Выявление фруктозурии пробой Селиванова
- •Лабораторно-практическое занятие №12
- •Литература
- •Лабораторная работа Изучение состояния углеводного обмена методом нагрузок
- •12.1. Проба на толерантность к глюкозе
- •12.2. Выявление мукополисахаридозов пробой с толуидиновым синим
- •Лабораторно-практическое занятие №13
- •Лабораторно-практическое занятие №14
- •Литература
- •14.1. Качественные реакции на жёлчные кислоты (реакция Петтенкофера).
- •Лабораторно-практическое занятие №15
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •15. Исследование содержания таг в плазме крови
- •15.1. Ферментативный метод определения содержания таг в плазме крови
- •Лабораторно-практическое занятие №16
- •Литература
- •16.1. Метод определения содержания общего хс в сыворотке крови с помощью холестеролоксидазной реакции
- •16. 2. Определение содержания хс лпвп
- •16. 3. Определение содержания хс лпонп и хс лпнп
- •Практическое занятие №17
- •Лабораторно-практическое занятие №18
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •18.1. Обнаружение крови в желудочном соке
- •18.2. Реакция на молочную кислоту в желудочном содержимом
- •18.3. Определение активности аланин-аминотрансферазы
- •Лабораторно-практическое занятие №19
- •Лабораторная работа
- •19.1. Количественное определение мочевины в крови
- •19.2. Качественная реакция на наличие фенилпировиноградной кислоты в моче
- •Лабораторно-практическое занятие №20
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •20.1. Качественная реакция на мочевую кислоту
- •20.2. Количественное определение мочевой кислоты в моче и крови
- •Лабораторно-практическое занятие №21
- •Литература
- •Практическое занятие №22
- •Лабораторно-практическое занятие № 23
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •23.3.1. Качественная реакция на токоферолы с концентрированной азотной кислотой
- •Лабораторно-практическое занятие №24
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •24.1. Диазореакция на витамин в1
- •24. 2. Доказательство восстанавливающих свойств витамина в2
- •24. 3. Реакция витамина в6 с хлорным железом
- •24. 4. Качественная реакция на витамин с с раствором йода
- •24. 5. Количественное определение витамина с в продуктах питания с 2,6-дихлорфенолиндофенолом
- •24.5. 1. Определение содержания витамина с в картофеле
- •Лабораторно – практическое занятие № 25
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •25.1. Открытие йода в щитовидной железе
- •25.2. Цветные реакции на инсулин
- •25.2.1. Ксантопротеиновая реакция
- •Лабораторно – практическое занятие № 26
- •Лабораторная работа
- •26.3. Качественная реакция на фолликулин (эстрон)
- •Практическое занятие № 27 Коллоквиум по теме: «Биологически активные вещества»
- •Лабораторно-практическое занятие № 28
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •28.1. Доказательство присутствия глюкозы в моче
- •28.1.1. Проба Троммера на глюкозу в моче
- •28.1.2. Проба Фелинга на глюкозу
- •28.1.3. Полуколичественное определение глюкозы в моче
- •28.2. Открытие кетоновых тел в моче
- •28.2.1. Проба Легаля на кетоновые тела
- •28.2.2. Проба Либена на кетоновые тела
- •Лабораторно-практическое занятие № 29
- •Литература Основная:
- •Лабораторная работа
- •28.1. Освобождение крови от белков
- •28. 2. Доказательство присутствия гемоглобина в моче
- •28.2.1. Бензидиновая проба на гемоглобин
- •28.2.2. Определение наличия Hb с помощью комбинированных тест-полосок
- •Лабораторно-практическое занятие № 30
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •Лабораторно-практическое занятие № 31
- •Лабораторно-практическое занятие № 32
- •Литература
- •1. Количественное определение глюкозы в крови
- •2. Проба на толерантность к глюкозе
- •3. Количественное определение холестерина в сыворотке крови
- •4. Количественное определение общей и свободной кислотности желудочного содержимого
- •5. Количественное определение билирубина по методу Йендрашека
- •6. Количественное определение кальция в сыворотке крови
- •7. Количественное определение неорганических фосфатов в крови
- •8. Определение физико-химических свойств мочи
- •9. Количественное определение пировиноградной кислоты (пвк) в моче
- •10. Количественное определение белков в плазме крови
- •11. Количественное определение мочевины в крови
- •1. Цветные реакции на аминокислоты, пептиды, белки:
- •2. Необратимые реакции осаждения белков (денатурация):
- •3. Доказательство наличия белка в моче (проба Геллера)
- •4. Доказательство наличия глюкозы в моче
- •5. Доказательство наличия кетоновых тел в моче
- •6. Доказательство наличия билирубина в моче
- •7. Доказательство наличия крови в моче (кале, желудочном содержимом)
- •13. Доказательство наличия молочной кислоты в желудочном содержимом
- •Лабораторно-практическое занятие № 33
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •33.1. Определение кальция в сыворотке крови по методу де Ваарда
- •33.2. Качественный анализ мочи
- •33.2.1. Определение рН, доказательство наличия белка, глюкозы, кетоновых тел, уробилина и крови с помощью комбинированных тест-полосок.
- •33.2.2. Качественная реакция на кровяные пигменты
- •33.2.3. Качественные реакции на желчные пигменты
- •Лабораторно-практическое занятие № 34
- •Литература
- •Лабораторная работа
- •34.1. Унифицированный метод определения сиаловых кислот
- •Лабораторно-практическое занятие № 35
33.2. Качественный анализ мочи
33.2.1. Определение рН, доказательство наличия белка, глюкозы, кетоновых тел, уробилина и крови с помощью комбинированных тест-полосок.
Комбинированными тест-полосками можно провести оценку в моче шести важных показателей: рН, белок, глюкозу, кетоновые тела, уробилин и кровь.
Ход определения
В пробирки налейте нецентрифугированную, хорошо перемешанную мочу. Тест-полоску (всю) опустите в сосуд с мочой. Избыток мочи снимите с полоски, прикасаясь к стенке сосуда. Через 30-60 сек, развившуюся окраску сравните со стандартной шкалой. Изменение окраски, которое наступило лишь на краях индикаторной зоны или только через 2 мин, не имеет диагностического значения. Моча не должна перед исследованием стоять больше 4 ч при комнатной температуре.
Белок. При наличии белка наблюдаются сдвиги в цвете тест-полоски от желтого к зеленому (0,3; 1,0; 5,0 г/л); патологическая протеинурия констатируется при цифрах более 0,25 г/л.
Глюкоза. Положительная реакция от оранжевого до коричневого цвета развивается через 60 с (5,55; 16,65, 55,55 ммоль/л). Окраска появляется даже при небольшой концентрации глюкозы (2,2 ммоль/л).
Кетоновые тела. Об их присутствии свидетельствует появление окраски в границах от розовой до фиолетовой (+, ++, +++). Чувствительность тест-полоски на ацетоуксусную кислоту выше, чем на ацетон; на β-гидроксимасляную кислоту тест-полоска не реагирует. Величины обнаружения: 100 мг/л для ацетоуксусной кислоты и от 400 мг/л для ацетона.
Уробилин. Положительная реакция от розового до красного цвета (граница появления 4 мг/л).
Кровь. Для эритроцитов и гемоглобина имеется отдельная шкала. Интактные эритроциты видны в виде отдельных или густо сидящих зеленых точек на желтом фоне (5-10, 50, 250 эрит/мкл). Равномерная зеленая окраска обозначает свободный гемоглобин или миоглобин, или гемолизированные эритроциты (50-250 эрит./мкл). При малых примесях крови в моче или при более длительном смачивании полосок реакция может наступить через 1-2 мин.
33.2.2. Качественная реакция на кровяные пигменты
К числу патологических составных частей мочи относятся также кровь (точнее, форменные элементы) и кровяные пигменты (гемоглобин или метгемоглобин). В тех случаях, когда появляется кровь в моче, говорят о гематурии, а при наличии кровяных пигментов — о гемоглобинурии. Наличие гемоглобина в моче в случае, как гематурии, так и гемоглобинурии, можно легко обнаружить спектроскопическим методом или с помощью специальных химических проб (гваякой, бензидиновой, пробы Геллера). Моча при гематурии непрозрачна, имеет красноватый оттенок, интенсивность которого зависит от количества форменных элементов крови. В осадке под микроскопом выявляются эритроциты и лейкоциты; в отличие от гемоглобинурии гематурия развивается при повреждении сосудов мочеполовых путей (мочевыми камнями, при раке мочевого пузыря, воспалении мочевого пузыря и цистите). Гемоглобинурия наблюдается при ряде заболеваний, связанных с усиленным гемолизом (распадом) эритроцитов. Моча при этом бывает окрашена в красный или, чаще, в кофейно-бурый цвет. В случае гематурии и гемоглобинурии моча дает положительную реакцию на белок.
Бензидиновая проба
Принцип метода: бензидиновая проба основана на окислении бензидина атомарным кислородом, который образуется при разложении пероксида водорода кровяным пигментом — гемоглобином, оказывающим пероксидазное действие.
Ход определения:
В пробирку накапайте 20 капель свежесобранной нефильтрованной мочи, охладите. Добавьте равный объем раствора бензидина в уксусной кислоте и несколько капель 0,5% пероксида водорода. При наличии гемопротеида моча окрашивается в синий или зеленый цвет.