Определение подлинности

1. Физические и физико-химические методы

   • ИК-спектрофотометрия (после прессования в таблетках с бромидом калия)

   • Определение удельного вращения

   • ТСХ

   • ВЭЖХ

2. Химические методы

А. Реакции обнаружения стероидного цикла

• реакция Либермана — Бурхардта

(фармакопейная реакция для коргликона и строфантина К). Основана на способности стероидов к дегидратации под действием уксусного ангидрида и концентрированной серной кислоты. В результате реакции слой уксусного ангидрида окрашивается в зеленый цвет.

• флуориметрический метод (реактив: смесь фосфорной и серной кислот с хлоридом железа (III)): после дегидрирования образуются окрашенные моно- или диангидридопроизводные.

• реакция с концентрированной серной кислотой (для строфантина К) - зеленое окрашивание

Б. Реакции обнаружения лактонного цикла

• реакция Легаля - с раствором нитропруссида натрия в щелочной среде образуется красное окрашивание.

• Реакции с нитропроизводными ароматического ряда в щелочной среде

  • реакция Раймонда - с м-динитробензолом (красно-фиолетовое окрашивание)

  • реакция Балье - со щелочным раствором пикриновой кислоты (оранжево-красное окрашивание):

В. Реакции обнаружения сахарного компонента

• реакции, основанные на их восстановительных свойствах сахаров (реакция с реактивом Фелинга, реакция «серебряного зеркала» и др.)

• реакция Келлера — Килиани (на 2-дезоксисахара) -

гликозид растворяют в ледяной уксусной кислоте, содержащей хлорид железа (III), добавляют концентрированной серной кислотой и наблюдают сине-зеленое окрашивание верхнего слоя, подтверждающее наличие дигитоксозы и лилово-красное или бурое окрашивание на границе двух слоев, подтверждающее наличие — дигитоксигенина.

• реакция Пезеца

Гликозид нагревают в присутствии ледяной уксусной кислоты с ксантгидролом (дибензо-γ-пиранолом) и затем прибавляют несколько капель серной или фосфорной кислоты - появляется красное окрашивание.

• Реакция с антроном - под действием концентрированной серной кислоты образуется фурфурол, который дает с антроном продукт конденсации, окрашенный в зеленый или сине-зеленый цвет:

Определение доброкачественности

• потеря в массе при высушивании

• сульфатная зола

• тяжёлые металлы

• прозрачность и цветность растворов

• наличие примеси посторонних гликозидов (ТСХ, СФ)

• В коргликоне по ФС устанавливают отсутствие примеси дубильных веществ (по отрицательной цветной реакции с ионом железа (III)) и сапонинов (по отсутствию стойкой пены после взбалтывания).

Количественное определение

1. Физико-химические методы

   • Спектрофотометрия

   • Фотоэлектроколориметрия (после постановки цветных реакций)

   • ВЭЖХ

   • Полярография

2. Биологический метод

Стандартизация сердечных гликозидов биологическим методом основана на способности карденолидов вызывать в токсических дозах остановку сердца животных в стадию систолы. Их активность оценивают сравнением с препаратами-стандартами, при этом устанавливая наименьшие дозы стандартного и испытуемого лекарственного препарата, и выражают в ЛЕД (лягушачьих), КЕД (кошачьих) или ГЕД (голубиных) единицах действия.

Содержание единиц действия (ЕД) рассчитывают в 1,0 г исследуемого препарата, в одной таблетке или в 1 мл раствора. Этот метод ФС рекомендуют для оценки лекарственных препаратов, 1,0 г которых должен содержать строфантина К (43000-58000 ЛЕД или 5800-7100 КЕД, или 3827-4773 ГЕД), дигитоксина (8000-12000 ЛЕД или 1900-2400 ГЕД), коргликона (19000-27000 ЛЕД или 3030-3700 КЕД).