Определение доброкачественности
Поляриметрия (определение удельного показателя вращения)
Определение рН раствора (кислоты 2,5-5,5; натриевые соли 8-10)
ГЖХ – остатки растворителей
Влага (высушивание до постоянной массы при t=100-105оC; титрование реактивом Фишера; нагревание в условиях вакуума)
Подвергают испытаниям на прозрачность и цветность растворов, микробиологическую чистоту, токсичность, пирогенность, стерильность
Количественное определение
1. Метод обратной нейтрализации (натриевая соль оксациллина, динатриевая соль карбенициллина)
Сумма пенициллинов в полусинтетических пенициллинах по ГФ и другим НД определяется методом нейтрализации после щелочною гидролиза препаратов избытком титрованного раствора гидроксида натрия при нагревании. Титрование проводят по фенолфталеину, поэтому воду для растворения препарата, а также раствор препарата в воде до гидролиза нейтрализуют 0,01 н. раствором гидроксида натрия до розового окрашивания.
При охлаждении раствора его предохраняют от поглощения углекислого газа из воздуха (натронной известью). Избыток щелочи после охлаждения раствора титруют 0,1 н. раствором соляной кислоты:
2. Метод обратной йодометрии (натриевая, калиевая, новокаиновая соли бензилпенициллина, феноксиметилпенициллин, амоксициллин)
Поскольку пенициллины являются гетерогенными соединениями, по НД требуется найти сумму пенициллинов и определяемого пенициллина.
Пенициллин подвергают щелочному гидролизу (0.1 М NaOH), в результате чего происходит раскрытие β-лактамного кольца с образованием пенициллоиновой кислоты в открытой тиольной форме. Далее ее окисляют йодом до пенальдиновой кислоты и пеницилламина, которые окисляются раствором йода соответственно до дегидропенальдиновой и пеницилламиновой (диметилцистеиновой) кислоты:
f = 1/8
3. Неводное титрование
феноксиметилпенициллин
Среда – диметилформамид
Титрант - раствор метоксида натрия (лития, калия)
Литиевая соль феноксиметилпенициллина
Ампициллин
Среда – ледяная уксусная кислота
Титрант - раствор хлорной кислоты
Перхлорат ампициллина
4. Гравиметрический метод (натриевая, калиевая и новокаиновая соли бензилпенициллина)
Бензилпенициллин извлекают амилацетатом и количественно осаждают в виде N-этилпиперидиновой соли:
N-этилпиперидиновая соль бензилпенициллина
Осадок N-этилпиперидиновой соли бензилпенициллина промывают, высушивают до постоянной массы и взвешивают. Затем делают пересчет на соответствующую соль.
5. СФМ
6. Формольное титрование (ампициллин)
Навеску растворяют в воде, добавляют разбавленный нейтрализованный раствор формальдегида и через 2 мин титруют раствором гидроксида натрия (индикатор фенолфталеин).
7. Меркуриметрический метод (ампициллин, амоксициллин)
8. Микробиологический метод
Активность пенициллинов устанавливают по антибактериальному действию на определенный штамм золотистого стафилококка. Одна единица действия соответствует активности 0,5988 мкг химически чистой натриевой соли бензилпенициллина (1670 ЕД в 1 мг)