Определение подлинности

1. Гидролитическое расщепление

• в кислой среде

Под действием сильных кислот стрептомицина сульфат распадается с образованием стрептидина и стрептобиозамина. Стрептобиозамин затем распадается на N-метил-L-глюкозамин и L-стрептозу.

• в щелочной среде

L-стрептоза подвергается дегидратации и изомеризации, превращаясь в мальтол (α-метил-β-окси-γ-пирон):

При взаимодействии с ионами железа (III) в кислой среде мальтол превращается в соединение, имеющее фиолетовую окраску.

Мальтольная проба обусловлена наличием альдегидной группы в молекуле стрептомицина.

2. Реакции окисления

• с реактивом Несслера (бурое окрашивание вследствие восстановления металлической ртути)

• с реактивом Фелинга (красный осадок восстановленного оксида меди (I))

• с фенолами (резорцином) после нагревания стрептомицина в присутствии концентрированной серной кислоты на кипящей водяной бане, появляется вишнево-красное окрашивание (ауриновый краситель).

3. Реакции обнаружения гуанидина

• Реакция с α-нафтолом и гипобромитом натрия в щелочной среде (фиолетово-красное окрашивание)

Происходит процесс окисления и бромирования α-нафтола с образованием имеющего хиноидный цикл нафтохинонимина:

• Реакция с раствором нитропруссида натрия, подвергнутого воздействию ультрафиолетовых лучей или смесью растворов нитропруссида натрия и гексацианоферрата (III) калия (оранжево-вишневое окрашивание)

• Щелочной гидролиз

• Реакция с диацетилом и оксидом кальция (оранжево-красное окрашивание)

4. Реакция на наличие сульфат-иона

5. ТСХ

6. ПМР-спектроскопия

Доброкачественность

Недопустимая примесь формальдегида (ГЖХ)

Количественное определение

1. ФЭК (после постановки мальтольной пробы)

2. Цериметрия (в основе метода лежит мальтольная проба)

3. Комплексонометрия

Определение биологической активности

• метод диффузии в агар с тест-микробом

Стрептомицина сульфат должен содержать не менее 730 мкг/мл (ЕД/мл) в пересчете на сухое вещество (1 мкг химически чистого стрептомицина соответствует активности, равной 1 ЕД).

Хранение

Стрептомицина сульфат хранят по общему списку в соответствии с требованиями приказа МЗ РФ от 23.08.2010 N 706н, в сухом помещении (учитывая гигроскопичность), при температуре не выше 25°С. Упаковывают во флаконы, герметически закрытые резиновыми пробками, обжатыми алюминиевыми колпачками. В одном флаконе по 0,25, 0,5 и 1,0 г активного вещества в пересчете на стрептомицин основание, что соответствует 250 000, 500 000 и 1 000 000 ЕД.

Применение

Назначают для лечения различных форм туберкулеза, а также при заболеваниях, вызванных чувствительными к стрептомицинам бактериями (пневмонии, перитоните, гонорее, бруцеллезе и т. д.). Вводят внутримышечно по 0,5-1,0 г в сутки.

Лекция № 5

Антибиотики тетрациклинового ряда

Антибиотики-макролиды и азалиды

Тетрациклины

Основой химической структуры тетрациклинов является частично гидрированный цикл тетрацена (нафтацена):

Тетрациклин был получен в 1953 году путём каталитического гидрирования хлортетрациклина, впервые выделенного из почв в 1948 г. М. Дуггаром.

Классификация

Биологические тетрациклины

• тетрациклин, окситетрациклин

Полусинтетические тетрациклины

• доксициклин, метациклин

Общая формула биологических тетрациклинов

Общая формула полусинтетических тетрациклинов

R = –CH₃ или =СН₂

Получение

• Для получения природных антибиотиков тетрациклинового ряда используют микроорганизмы Streptomyces aureofaciens и Streptomyces rimosus

• Полусинтетические тетрациклины получают из окситетрациклина, изменяя структуру молекулы в положении 6. Дезоксилирование приводит к образованию доксициклина (6-дезокси-5-окситетрациклина), а последующее превращение метильной группы в метиленовую дает возможность получить метациклин (6-дезокси-6-деметил-6-метилен-5-окситетрациклин).

СХЕМА СИНТЕЗА

СВОЙСТВА ПРИРОДНЫХ ТЕТРАЦИКЛИНОВ

Лекарственное вещество	Описание	Растворимость
Тетрациклин Tetracyclinum 4-диметиламино-1,4,4а,5,5а,6,11,12а- октагидро-3,6,10,12,12а-пентаокси-6-метил-1,11-дикетонафтацен-2-карбоксамид	Желтый кристаллический порошок без запаха. Гигроскопичен. Удельное вращение от –265 до –275°	Очень мало растворим в воде, умеренно растворим в этаноле, нерастворим в хлороформе и эфире, легко растворим в разведенных кислотах и щелочах.
Окситетрациклин Oxytetracyclinum 4-диметиламино-1,4,4а,5,5а,6,11,12а- октагидро-3,5,6,10,12,12а-гексаокси-6-метил-1,11-дикетонафтацен-2-карбоксамида дигидрат	Светло-желтый кристаллический порошок без запаха. Удельное вращение от –188 до –200°	Практически нерастворим в воде, умеренно растворим в этаноле, практически нерастворим или мало растворим в хлороформе и эфире, легко растворим в разведенных кислотах и щелочах.
СВОЙСТВА ПОЛУСИНТЕТИЧЕСКИХ ТЕТРАЦИКЛИНОВ
Доксициклина гидрохлорид Doxycyclini hydrochloridum 4-диметиламино-1,4,4а,5,5а,6,11,12а-октагидро-3,5,10,12,12а-пентаокси-6-метил-1,11-диоксо-2-нафтаценкарбоксамида гидрохлорид	Желтый кристаллический порошок.	Легко, но медленно растворим в воде, легко растворим в метаноле и мало — в этаноле, практически нерастворим в эфире и хлороформе
Метациклина гидрохлорид Methacyclini hydrochloridum 4-диметиламино-1,4,4а,5,5а,6,11,12а- октагидро-3,5,10,12,12а-пентаокси-6-метилен-1,11-дикетонафтацен-2-карбоксамида гидрохлорид	Желтый кристаллический порошок без запаха, горького вкуса.	Трудно и медленно (в течение 40 мин) растворим в воде (1:80) и в метаноле (1:40). В эфире и хлороформе практически нерастворим.