Кислотно-основные свойства тетрациклинов
Тетрациклины являются амфотерными соединениями.
Диметиламиногруппа обладает основными свойствами, поэтому тетрациклины образуют соли с органическими и неорганическими кислотами. Реакцию используют при количественном определении — кислотно-основное титрование в неводных средах.
За счет енольных и фенольных гидроксилов тетрациклины проявляют кислотные свойства и могут образовывать растворимые соли с гидроксидами щелочных металлов.
Тетрациклины дают положительные реакции на фенольный гидроксил, например, реакцию образования азокрасителя.
Образуют нерастворимые окрашенные хелатные комплексы с поливалентными катионами. Для идентификации тетрациклинов применяются реакции образования окрашенных солей с железа (III) хлоридом.
Определение подлинности
I. Физико-химические методы
СФМ
Поляриметрия – определение удельного вращения (вращают плоскость поляризованного света влево)
ТСХ
Реакция на хлорид-ион (доксициклин, метациклин)
II. Химические методы (цветные реакции)
1. С нитропруссидом натрия, n-диметиламинобензальдегидом, реактивом Несслера, хлорамином Б, селенистой кислотой, нингидрином (образование продуктов, окрашенных в различный цвет)
2. Реакция с хлоридом железа (III)
окситетрациклина дигидрат - коричневое окрашивание
доксициклин и метациклин – темное красно-коричневое окрашивание
3. Реакция с концентрированной серной кислотой
(общегрупповой реактив, позволяющий отличить тетрациклины друг от друга)
На 1-й стадии образуется ангидротетрациклин, затем – реакция окисления с образованием окрашенных в различный цвет продуктов:
тетрациклин - фиолетовое окрашивание
окситетрациклин — вишнево-красное окрашивание
доксициклин и метациклин – желтое окрашивание
При последующем добавлении к окрашенному раствору тетрациклина хлорида железа (III) фиолетовая окраска переходит в коричневую или красно-коричневую.
4. Гидролитическое расщепление
в кислой среде
В сильнокислой среде (например, при действии кHCl) тетрациклины превращаются в ангидротетрациклины, которые имеют темно-желтую окраску (λmax = 437 нм) и желтую флюоресценцию в УФ-свете:
тетрациклин ангидротетрациклин
в щелочной среде
Под действием щелочи происходит изомеризация тетрациклинов с образованием окрашенных в желтый цвет продуктов, имеющих голубую флуоресценцию в УФ-свете.
изотетрациклин
5. Реакция образования азокрасителя (в щелочной среде)
красное окрашивание
6. Реакция образования эпитетрациклина
Тетрациклины вследствие наличия алициклической структуры колец А, В, С, а также фенольного гидроксила неустойчивы и в процессе хранения могут образовывать неактивные или токсичные продукты: 4-эпитетрациклины, которые необходимо учитывать при оценке качества:
тетрациклин 4-эпитетрациклин
Определение доброкачественности
Специфические примеси определяют (гидрохлориды 4-эпитетрациклина, ангидротетрациклина, ангидро-4-эпитетрациклина) методами СФМ, ВЭЖХ, ТСХ.
Содержание остаточных растворителей (метанол, изооктанол) определяют методом ГЖХ.