Глава 1. Возбудители зооантропонозных болезней, передающиеся человеку через продукты животноводства

1. Возбудитель сибирской язвы

Возбудитель сибирской язвы – Bacillus anthracis (Koch, 1872) – типичный представитель патогенных бацилл. Относится к семейству Васillaceae, роду Bacillus. Этот микроб часто называют бациллой антракса.

Сибирская язва (Anthrax) – зооантропоноз. Восприимчивы животные многих видов, особенно травоядные, и человек. Инфекционный процесс протекает преимущественно остро, с явлениями септицемии или с образованием карбункулов различной величины. Болезнь регистрируют в виде спорадических случаев, возможны энзоотии и даже эпизоотии. Название болезни «сибирская язва» предложил в 1789 г. С. С. Андриевский, который изучал ее на Урале и в Сибири.

Микроскопически бацилла сибирской язвы была обнаружена Поллендером в 1849 г. Французские исследователи Давен и Рейс (1850), а в России профессор Дерптского ветеринарного училища Брауэлл (1857) установили также в крови больных и погибших от сибирской язвы овец наличие нитевидных, неподвижных и неветвящихся телец. Брауэлл одним из первых выявил бациллы в крови человека, умершего от сибирской язвы, и экспериментально заразил животных его кровью. Однако роль этих палочек оставалась невыясненной до 1863 г., когда Давен окончательно установил их в качестве возбудителей сибирской язвы.

Чистые культуры бациллы антракса выделил в 1876 г. вначале Р. Кох, а затем Л. Пастер. Независимо друг от друга они культурами этих микробов воспроизвели болезнь у животных. В России первую культуру сибиреязвенного микроба получил В. К. Высокович в 1882 г.

Р. Кох в 1876 г. доказал, что вегетативные клетки сибиреязвенного микроба обладают способностью формировать споры, в 1888 г. Серафини обнаружил капсулу микроба.

Морфология. Бациллы антракса довольно крупные (1,0-1,3х3,0-10,0 мкм) палочки, неподвижные, грамположительные; образуют капсулу и споры. Микроб встречается в двух формах: вегетативной, в виде палочки различной величины клеток (капсульных и бескапсульных), и споровой. Споры могут быть заключены в хорошо выраженный экзоспориум и находиться внутри и вне палочек в виде изолированных телец. В окрашенных препаратах из крови и тканей больных или погибших от сибирской язвы животных бациллы располагаются одиночно, попарно и в виде коротких цепочек (3-4 клетки, окруженные капсулой). Концы палочек в цепочках прямые, с резко обрубленными концами, а свободные – слегка закругленные. Иногда цепочки имеют форму бамбуковой трости.

В мазках из культур, на плотных и в жидких питательных средах палочки располагаются длинными цепочками.

В организме или при культивировании на искусственных питательных средах с большим содержанием нативного белка сибиреязвенная бацилла образует капсулу.

Сибиреязвенная бацилла во внешней среде при неблагоприятных условиях существования формирует споры. В каждой вегетативной клетке образуется только одна эндоспора, чаще располагающаяся центрально, реже – субтерминально. Споры овальные, иногда округлые. Размеры зрелых спор колеблются в пределах 1,2-1,5 мкм в длину и 0,8-1,0 мкм в поперечнике, а также в живом организме или невскрытом трупе.

Культивирование. Сибиреязвенный микроб по способу дыхания относят к факультативным анаэробам: он хорошо размножается в обычных атмосферных условиях и в условиях пониженного содержания кислорода.

Бацилла антракса нетребовательна к условиям питания и хорошо растет на универсальных средах (МПБ, МГЛА, МПЖ, картофеле, молоке). Кроме того, может расти на различных растительных субстратах: настоях соломы, сена, экстрактах гороха, сои, вики, ломтиках вареного картофеля, свеклы, моркови и др.

Оптимальная температура роста культуры 35-37 ⁰С; при температуре ниже 12 ⁰С и выше 45 ⁰С она не растет; оптимальная рН среды 7,2-7,6.

На поверхности МПА в аэробных условиях при 37 ⁰С первые признаки роста появляются уже через 6-8 ч после посева, 17-24 часовые культуры имеют вид серовато-беловатых колоний с неровными краями и шероховатой поверхностью диаметром 3-5 мм. От их краев отходят завитки. Под лупой или малым увеличением микроскопа колонии имеют локонообразную структуру. Такие колонии характерны для типичных вирулентных штаммов, образующих R-форму.

В МПБ и других жидких средах сибиреязвенная бацилла (R-форма) через 16-24 часа образует на дне пробирки рыхлый белый осадок, сам бульон остается прозрачным, при встряхивании осадок разбивается на мелкие хлопья. Некоторые штаммы растут в виде нежных мелких хлопьев, взвешенных в столбике бульона, которые через 48 часов оседают на дно пробирки. Отдельные штаммы на 3-4 сутки дают рыхлое пристеночное кольцо, пленка на поверхности среды не образуется.

Весьма характерный рост отмечают в столбике желатина при посеве уколом. По ходу укола на 2-5 сутки появляется серовато-белый стержень, от которого под прямым углом радиально отходят нежные боковые отростки – более длинные по мере приближения к поверхности среды и постепенно укорачивающиеся по направлению вниз. Такая культура напоминает елочку, перевернутую верхушкой вниз. Постепенно верхний слой желатина начинает разжижаться, принимая сначала форму воронки, затем мешочка.

В молоке В. anthracis размножается быстро, вырабатывает кислоту и через 2-4 суток оно свертывается с последующей пептонизацией сгустка. На картофеле образует обильный, сухой, серо-белый налет, иногда с кремовым оттенком. Агаровые и бульонные культуры некоторых штаммов интенсивно окрашиваются в светло-коричневый цвет вследствие окисления тирозина.

Биохимические свойства. В. anthracis вырабатывает следующие ферменты: липазу, диастазу, протеазу, желатиназу, дегидразу, цитохромоксидазу, пероксидазу, каталазу и др. Некоторые штаммы образуют сероводород, особенно это свойство проявляется в средах, богатых пептонами; выделяют аммиак. Ферментирует с образованием кислоты без газа глюкозу, мальтозу, медленно сахарозу, трегалозу, фруктозу и декстрин. На средах с глицерином и салицином возможно слабое кислотообразование. Арабинозу, рамнозу, галактозу, маннозу, рафинозу, инулин, маннит, дульцит, сорбит, инозит не сбраживает. Утилизирует цитраты, образует ацетилметилкарбинол и вследствие этого дает положительную реакцию Фогеса-Проскауэра. Синтезирует лецитиназу и медленно коагулирует растворы желтка куриного яйца. Редуцирует метиленовый синий и восстанавливает нитраты в нитриты. Вырабатывает желатиназу, а также протеазу и достаточно быстро гидролизует желатин и свернутую сыворотку.

Токсинообразование. Бацилла антракса образует сложный экзотоксин, включающий в себя три компонента (фактора): эдематогенный фактор (EF), протективный антиген (РА) и летальный фактор (LF), или соответственно факторы I, II, III. Их синтезируют капсульные и бескапсульные варианты микроба. Эдематогенный фактор представляет собой липопротеин, вызывает местную воспалительную реакцию – отек и разрушение тканей.

Протективный антиген – носитель защитных свойств, обладает выраженным иммуногенным действием. В чистом виде нетоксичен. Летальный фактор сам по себе нетоксичен, но в смеси со II фактором (РА) вызывает гибель белых крыс, мышей и морских свинок. Протективный антиген и летальный фактор – гетерогенные в молекулярном отношении белки. Все три компонента токсина составляют синергическую смесь, оказывающую одновременно эдематогенное и летальное действия, каждый из них обладает выраженной антигенной активностью и серологически активен.

Инвазивные свойства микроба обусловлены капсульным полипептидом d-глутаминовой кислоты и экзоферментами.

Антигенная структура. В состав антигенов бациллы антракса входят неиммуногенный соматический полисахаридный комплекс и капсульный глутаминполипептид. Полисахаридный антиген не создает иммунитета у животных и не определяет агрессивных функций бациллы: всегда присутствует как у вирулентных, так и у авирулентных штаммов. В связи с тем, что полисахарид тесно связан с телом бактериальной клетки, он получил название соматического антигена. Сибиреязвенный соматический антиген очень часто обозначают буквой С, капсульный полипептид – буквой Р. Капсульный антиген бациллы антракса представлен сложным полипептидом d-глутаминовой кислоты; его принимают за группоспецифическое вещество, так как он дает перекрестные серологические реакции с полипептидом В. subtilis, В. cereus и В. megaterium. Активными антигенами также являются все три компонента сибиреязвенного экзотоксина.

Устойчивость. Устойчивость и длительность выживания у вегетативных клеток и спор возбудителя сибирской язвы различны. Вегетативные формы относительно лабильны, споры обладают высокой резистентностью.

В невскрытом трупе вегетативная форма микроба в результате воздействия протеолитических ферментов разрушается уже в течение 2-3 суток, в зарытых трупах сохраняется до 4 суток, через 7 суток завершается лизис бактерий даже в костном мозге. В желудочном соке при 38 ⁰С гибнет через 30 минут, в замороженном мясе при – 15 ⁰С жизнеспособна 15 суток, в засоленном мясе – до 1,5 месяцев. Навозная жижа, смешанная с сибиреязвенной кровью, губительно действует на вегетативные клетки уже через 2-3 ч, однако споры остаются в ней вирулентными в течение многих месяцев, даже лет. Споры в запаянных ампулах сохраняют жизнеспособность и вирулентность до 63 лет, а в почве более 60 лет.

К воздействию различных химических веществ вегетативные клетки малоустойчивы. Спирт, эфир, 2 % формалин, 5 % фенол, 5-10 % хлорамин, свежий 5 % раствор хлорной извести, пероксид водорода их разрушают в течение 5 минут.

Для уничтожения споровой формы возбудителя необходима более длительная экспозиция. Этиловый спирт в концентрациях от 25 % до абсолютного разрушает споры в течение 50 суток и более, 5 % фенол и 5-10 % раствор хлорамина – через несколько часов и даже суток, 2 % раствор формалина – через 10-15 минут, 3 % раствор пероксида водорода – через 1 ч, 10 % раствор гидроксида натрия – через 2 ч. На споры высушивание не оказывает губительного действия. Сухой жар при 120-140 ⁰С убивает споры только через 2-3 ч, при 150 ⁰С – через 1 ч.

Вегетативные клетки малоустойчивы к высоким температурам. При нагревании до 50-55 ⁰С гибнут в течение 1 ч, при 60 ⁰С – через 15 минут, при 75 ⁰С – через 1 минут, при кипячении – мгновенно. Они чувствительны к высушиванию, однако при медленном высушивании происходит спорообразование и микроб не гибнет. К низким температурам бактерии малочувствительны: при – 10 ⁰С сохраняются 24 суток, при – 24 ⁰С – до 12 суток. Воздействие прямого солнечного света обезвреживает бактерии через несколько часов.

Возбудитель сибирской язвы проявляет высокую чувствительность к пенициллину, хлортетрациклину и левомицетину, а также к литическому действию лизоцима.

Патогенность. К возбудителю сибирской язвы восприимчивы все виды млекопитающих. В естественных условиях чаще болеют овцы, крупный рогатый скот, свиньи, лошади, реже – ослы и мулы. Чрезвычайно восприимчивы козы, буйволы, верблюды и северные олени. Сибирская язва у свиней протекает, как правило, хронически, с длительным бациллоносительством. Среди диких животных восприимчивы все травоядные. Известны случаи заболевания собак, волков, лисиц, песцов, среди птиц – уток и страусов.

Патогенез. Бацилла антракса обладает выраженной инвазивностью и легко проникает через царапины кожных покровов или слизистых оболочек. Заражение животных происходит преимущественно алиментарным путем. Через поврежденную слизистую оболочку пищеварительного тракта микроб проникает в лимфатическую систему, а затем в кровь, где фагоцитируется и разносится по всему организму, фиксируясь в элементах лимфоидно-макрофагальной системы, после чего снова мигрирует в кровь, обусловливая септицемию.

Размножаясь в организме, бацилла антракса синтезирует капсульный полипептид и выделяет экзотоксин. Капсульное вещество ингибирует опсонизацию, в то время как экзотоксин разрушает фагоциты, поражает центральную нервную систему, вызывает отек, гипергликемию и повышение активности щелочной фосфатазы.

В терминальной фазе процесса в крови снижается содержание кислорода до уровня, несовместимого с жизнью. Резко нарушается метаболизм, развивается вторичный шок, и наступает гибель животных.

Возбудитель сибирской язвы может выделяться из организма с бронхиальной слизью, слюной, молоком, мочой и испражнениями.

Эпизоотологические данные. Все виды млекопитающих, в том числе человек восприимчивы к возбудителю сибирской язвы.

Источник возбудителя – больные животные, выделяющие возбудитель с калом, мочой, слюной, бронхиальной слизью, молоком. Факторы передачи возбудителя – объекты внешней среды, особенно трупы погибших животных, необезвреженные сточные воды мясокомбинатов и кожевенных заводов. Вынужденный убой животных в атональном состоянии опасен. Особенно опасны трупы животных, павших от сибирской язвы, а также их рога, кости, кожа, щетина. Неубранный (необезвреженный) труп могут растащить плотоядные животные и птицы, маловосприимчивые к сибирской язве. Вскрытие сибиреязвенных трупов категорически запрещено: в невскрытых трупах возбудитель погибает за 3 суток, а при вскрытии трупа кислород воздуха поступает к органам и тканям, содержащим большое количество бацилл, которые под действием кислорода и тепла образуют споры, длительно сохраняющиеся в почве и на окружающих предметах.

Основной путь заражения – алиментарный. Заражению способствуют травмирование кожи и слизистых оболочек, а также снижение резистентности организма при недостаточном кормлении и неудовлетворительном содержании животных. Не исключаются аэрогенный и трансмиссивный пути заражения.

Болезнь регистрируют в виде спорадических случаев, возможны энзоотии и даже эпизоотии. Сибирской язве свойственна стационарность. Болезнь чаще проявляется в весенний, летний и осенний сезоны года.

Предубойная диагностика. Продолжительность инкубационного периода – 2-3 суток. Болезнь у животных проявляется в основном в двух формах – септической и карбункулезной. По локализации патологического процесса выделяют также кожную, кишечную, легочную, местную и атипичную (абортивную) формы сибирской язвы. Такое деление условно. Так, например, септицемия может развиваться при карбункулезной форме, а появление карбункулов возможно при септической. Течение сибирской язвы обычно протекает молниеносно, остро, подостро.

Молниеносное течение чаще всего отмечают у овец и коз и реже – у крупного рогатого скота и лошадей. Заболевшие животные погибают внезапно, и клинические признаки трудно заметить. У овец и коз начинаются судороги, дрожь и через несколько минут они гибнут. У крупного рогатого скота и лошадей наблюдают возбуждение, быстро сменяющееся угнетением, тяжелое дыхание, учащенный пульс, синюшность слизистых оболочек, повышение температуры тела до 41-42 ⁰С. Через несколько минут, реже через 1-2 ч, животное погибает.

При остром течении болезни у крупного рогатого скота и лошадей отмечают высокую температуру тела (40-42 ⁰С), угнетенное состояние, учащенное дыхание и сердцебиение, мышечную дрожь. Животное отказывается от корма, у крупного рогатого скота прекращается жвачка, заметна цианотичность слизистых оболочек, иногда развивается тимпания, у дойных коров прекращается лактация. У лошадей могут наблюдаться приступы колик, запор или кровавый понос. Животные быстро слабеют. На слизистых оболочках точечные кровоизлияния. В области глотки, гортани, шеи, подгрудка, живота отеки, геморрагические инфильтраты на слизистой оболочке ротовой полости и языке. Через 2-3 суток наступает смерть.

Подострое течение болезни протекает до 6-8 суток, при этом характерны те же клинические признаки, но развитие их идет более медленно.

Кроме типичных форм сибирской язвы у животных возможны случаи хронического течения болезни (2-3 месяца) с признаком прогрессирующего истощения, подозрение на сибирскую язву при этом возникает лишь при послеубойном осмотре. Что касается абортивной формы течения сибирской язвы, то она проявляется незначительным подъемом температуры тела и обычно заканчивается выздоровлением.

Карбункулезная форма наблюдается как при остром, так и подостром течении болезни. При этом обнаруживают ограниченные, вначале горячие, болезненные, плотные отечные припухлости (чаще в области живота, груди, лопаток, вымени). Затем эти карбункулы становятся холодными, безболезненными, тестоватыми с омертвлением и изъязвлением ткани в центральной части.

При кишечной форме развивается тяжелая клиническая картина септицемии с приступами колик, запором, а затем кровавым поносом.

При легочной форме наблюдается геморрагическая пневмония и острый отек легких.

Местная (локализованная) форма сибирской язвы чаще всего регистрируется у свиней, протекает она менее типично. Обычно заболевание констатируют в виде локализованного процесса с поражением только подчелюстных лимфатических узлов и окружающих их тканей и реже с вовлечением области глотки и гортани (ангины и фарингиты).

Развиваются признаки тяжелого дыхания, затруднено глотание, наблюдается слюнотечение. Больная свинья хрипит, давится при приеме корма, видимые слизистые оболочки синюшны. При прогрессирующем развитии отека глотки и гортани животные погибают от удушья. Нередко вышеописанные признаки у свиней бывают слабо выражены, и подозрение на сибирскую язву возникает при послеубойном осмотре органов и туши. С учетом особенностей течения сибирской язвы у свиней. Правилами ветеринарно-санитарной экспертизы предусмотрено сразу после обескровливания животного обязательное исследование подчелюстной области путем вскрытия и осмотра с обеих сторон подчелюстных лимфатических узлов.

При выявлении в пути следования или во время приемки на мясокомбинат сибирской язвы в партии скота, транспортируемой на предприятие по железной дороге или автотранспортом, животных подвергают ветеринарному осмотру и поголовной термометрии. Крупный и мелкий рогатый скот, верблюдов, лошадей, оленей с нормальной температурой тела, без признаков заболевания карантинируют, вводят им противосибиреязвенную сыворотку в профилактической дозе и устанавливают за ними ветеринарное наблюдение с ежедневной термометрией.

По истечении 3 суток после иммунизации карантинированный скот поголовно термометрируют и животных с нормальной температурой тела направляют на санитарную бойню. Свиней без клинических признаков заболевания, с нормальной температурой тела, также направляют на санитарную бойню.

С животными, больными и подозрительными по заболеванию сибирской язвой, поступают в соответствии с действующей инструкцией по этому заболеванию.

Послеубойная диагностика. Патологоанатомические изменения в начальной стадии развития болезни обнаруживаются с трудом. В этом случае отсутствуют характерные изменения, которые наблюдаются в трупе.

У крупного рогатого скота важнейший патологоанатомический признак – образование в подкожной клетчатке кровянисто-студенистых инфильтратов (отеков) различных размеров. Подобные отеки чаще всего локализуются в области живота, лопаток, грудной части, на вымени, иногда в области средостения между листками плевры, в брыжейке, кишечнике, на слизистой оболочке полости рта, вокруг лимфоузлов в подчелюстном пространстве. В толще мышц шеи и подгрудка отмечают кровоизлияния. В местах отека в процесс вовлекаются регионарные лимфатические узлы. Они увеличены, отечны, гиперемированы, на разрезе кирпично-красного или темно-красного цвета, с наличием точечных или полосчатых (часто гнездных) кровоизлияний. Ткань вокруг пораженного лимфатического узла инфильтрирована. Селезенка сильно увеличена. Ее пульпа размягчена, соскоб с поверхности обильный, дегтеподобный. Печень дряблая, почки с многочисленными кровоизлияниями. При кишечной форме сибирской язвы у свиней чаще всего поражается двенадцатиперстная и тощая кишки. Слизистая оболочка гиперемирована, на фоне чего отмечаются округлые или продолговатые фокусы темно-красного цвета с покрытием пленками фибрина. В центре фокуса иногда образуются некротические очаги. Серозная оболочка кишечника с очагами кровоизлияния. Лимфатические узлы брыжейки имеют вид шнуров желтого или темно-коричневого цвета.

Атипичные формы сибирской язвы у крупного рогатого скота и особенно у свиней встречаются часто и затрудняют диагностику. Поэтому во всех сомнительных случаях необходимо проводить бактериологическое исследование.

Ставя диагноз на сибирскую язву, следует дифференцировать ее от эмфизематозного карбункула, пастереллеза и пироплазмоза. В случае заболевания животного эмфизематозным карбункулом отмечается более интенсивная инфильтрация и деструкция пораженной ткани с большим скоплением газов в отечной ткани. Отличительный признак поражения ткани при пастереллезе – отсутствие геморрагии и нормальный размер селезенки. Пироплазмоз не дает геморрагического воспаления в лимфоузлах, пульпа селезенки на разрезе плотная и не стекает, наблюдается общая желтушность.

Лабораторная диагностика. При подозрении на сибирскую язву запрещается вскрывать трупы павших животных. Для лабораторного исследования чаще всего направляют ухо павшего животного или толстые нефиксированные мазки крови из надреза сосуда на предметном стекле. При вынужденном убое или подозрении на сибирскую язву во время вскрытия осторожно отбирают кусочки селезенки, печени, измененные лимфоузлы, от трупов свиней – кусочки отечных тканей в области глотки и заглоточные лимфоузлы. Материал должен быть свежим: в разложив­шихся тканях бацилла антракса подвергается лизису. Направляют также пробы почвы, фуража, воды, шерсти и кожевенно-мехового сырья; объектами для серологического исследования в реакции преципитации служат пробы кожевенно-мехового сырья и разложившиеся ткани.

Исследование проводят по обычной схеме: бактериоскопия мазков, выделение и изучение свойств чистой культуры, биопроба на лабораторных животных, при необходимости серологические исследования – реакция преципитации и иммунофлюоресцентный анализ.

Бактериоскопия. Из патологического материала готовят мазки, часть которых красят по Граму и обязательно на наличие капсулы – по Михину, Ребигеру, Ольту и др. Важным диагностическим признаком является обнаружение типичных по морфологии капсульных палочек.

Посев на питательные среды. Исходный материал засевают в МПБ и на МПА (рН 7,2-7,6), посевы инкубируют при 37 ⁰С в течение 18-24 ч; при отсутствии роста выдерживают в термостате еще 2 суток. Культуры просматривают, определяют их типичность, готовят препараты, микроскопируют. В мазках из культур обнаруживают бескапсульные палочки, расположенные длинными цепочками, и споры.

Биологическая проба. Заражают белых мышей, морских свинок, кроликов одновременно с посевом материала на питательные среды. Белым мышам вводят подкожно в заднюю часть спины (по 0,1-0,2 мл), морским свинкам и кроликам – под кожу в область живота (по 0,5-1,0 мл). Мыши погибают через 1-2 суток, морские свинки и кролики – через 2-4 суток. Павших животных вскрывают, делают мазки и посевы из крови, сердца, селезенки, печени и инфильтрата на месте инъекции исследуемого материала.

Идентификация бациллы антракса. В природе существует несколько видов аэробных споровых сибиреязвенноподобных сапрофитов: В. cereus, В. megaterium, B. mycoides и B. subtilis. Так как они по морфологии и культуральным признакам во многом сходны с бациллой антракса, то часто при лабораторной диагностике возникает необходимость решить вопрос: выделена ли культура возбудителя сибирской язвы или подобного ему сапрофита.

Идентификацию и дифференциацию культуры проводят на основании главных и дополнительных признаков. К главным относят патогенность, капсулообразование, определение подвижности, тест «жемчужного ожерелья», пробу со специфическим фагом, иммунофлюоресцентный тест, к дополнительным – тесты на отсутствие гемолиза и лицетиназной активности, образование фосфатазы.

Бацилла антракса патогенна для лабораторных животных. Сибиреязвенноподобные сапрофиты не вызывают их гибель, за исключением В. cereus, которая убивает белых мышей при внутрибрюшинном заражении. Массивную, с четкими контурами капсулу, в организме образует только возбудитель сибирской язвы.

Тест «жемчужного ожерелья», предложенный в 1953 г. Иенсеном и Клеемейером, основан на способности пенициллина угнетать синтез клеточной стенки бациллы антракса и образовывать сферопласты. Испытуемую трехчасовую бульонную культуру высевают на МПА в чашки Петри: в первой чашке содержится 0,5, во второй – 0,05 ЕД пенициллина в 1 мл среды, третья – контрольная. Посевы инкубируют 3 ч при 37 ⁰С. На агаре с пенициллином бацилла антракса растет в виде цепочек, состоящих из шарообразных клеток, напоминающих ожерелье из жемчуга. Сибиреязвенноподобные сапрофиты на агаре с пенициллином этого феномена не образуют.

Проба с бактериофагом (лизабельность фагом). Сибиреязвенный фаг, взаимодействуя с гомологичной культурой, вызывает ее лизис. Эту высокоспецифичную реакцию применяют для идентификации бациллы антракса, а также дифференциации ее от ложносибиреязвенных бацилл. В качестве индикатора в России выпускают фаг ВНИИВВиМ, грамма-фаг МВА.

Иммунофлюоресцентный тест. Идентификация возбудителя сибирской язвы при помощи флюоресцирующих антител – ориентировочный метод, который требует дополнительного изучения вирулентности, капсулообразования, фагочувствительности.

Подвижность устанавливается микроскопически или путем посева культуры уколом в столбик 0,3 % МПА. Неподвижные культуры растут только по ходу укола, подвижные – дают диффузный рост. Возбудитель сибирской язвы неподвижен, тогда как многие спорообразующие аэробные сапрофиты подвижны.

Гемолитическая активность не может быть надежным критерием дифференциации: как правило, бациллы антракса не гемолизируют эритроциты барана или же лизируют их очень медленно и незначительно, но этот признак у разных штаммов вариабелен.

Лецитиназная активность у возбудителя сибирской язвы низкая: медленно свертывает или вообще не свертывает желток куриного яйца. В. cereus интенсивно синтезирует лецитиназу и вызывает свертывание желтка через 6-10 ч. Не образует бацилла антракса и фосфатазу, в то время как сапрофитные споровые аэробы ее продуцируют.

Серологическое исследование. Для обнаружения сибиреязвенных антигенов применяют реакцию преципитации по Асколи. Эту реакцию используют для исследования на сибирскую язву кожевенного и мехового сырья, загнившего патологического материала, в котором происходит лизис бациллы антракса, а также дня исследования свежего патологического материала и серологической идентификации выделенных культур. РП по Асколи – достоверный и широко применяемый в практике тест серологической диагностики сибирской язвы. В качестве серологического теста, главным образом для изучения антигенного спектра бациллы антракса, применяют реакцию диффузионной преципитации (РДП).

Для идентификации и дифференциации возбудителя сибирской язвы от сходных микроорганизмов применяют селективную агаровую среду для выявления щелочной фосфатазы по изменению цвета колоний после воздействия паров аммиака. При этом сибиреязвенные колонии цвет не изменяют. С целью дифференциации от сапрофитов рекомендована реакция диск-преципитации, которая сочетает бактериологическую и серологическую диагностику.

Для выявления свежих случаев и ретроспективной диагностики сибирской язвы у животных предложен аллерген ВНИИВиМ.

Специфическая профилактика. Соматические полисахариды и капсульные полипептиды глутаминовой кислоты бациллы антракса не способны обусловить синтез защитных антител. Эту функцию у бациллы антракса выполняет протективный антиген: будучи одним из факторов патогенности, он обусловливает формирование иммунитета к этой инфекции по типу антитоксического.

В настоящее время защитные антитела обнаруживают при помощи РСК, РДП и непрямого варианта метода флюоресцирующих антител в сыворотке крови животных, вакцинированных сибиреязвенным протективным антигеном или живыми споровыми вакцинами. Переболевание животного сибирской язвой или же его вакцинация сопровождаются развитием гиперчувствительности замедленного типа. В результате естественного заражения и переболевания сибирской язвой у животных возникает длительный иммунитет.

Активная защита животных от сибирской язвы путем вакцинации – надежное средство профилактики данного заболевания. С этой целью применяют живые споровые сибиреязвенные вакцины.

Н.Н. Гинсбург в 1940 г. селекционировал из культуры вирулентного штамма вакцинный бескапсульный мутант СТИ-1. С 1942 г. вакцину СТИ, приготовленную из этого варианта, используют для профилактики сибирской язвы у животных. Она зарекомендовала себя как высокоиммунный препарат. В настоящее время вакцину СТИ в споровой форме применяют для вакцинации людей против сибирской язвы. Иммунитет наступает через 10 суток и длится не менее 12 месяцев.

В настоящее время животных иммунизируют вакциной из штамма 55 (ВНИИВиМ). Вакцину вводят подкожно, начиная с 3 месячного возраста, повторно вакцинируют через 6 месяцев. Напряженность иммунитета сохраняется в течении 1 года. Затем животных иммунизируют повторно.

В практике используют также живую вакцину ВГНКИ, ассоциированную живую вакцину против сибирской язвы и эмфизематозного карбункула крупного рогатого скота.

Для лечения и пассивной профилактики применяют антибиотики, противосибиреязвенную гипериммунную сыворотку и гамма-глобулин. Пассивный иммунитет наступает через 6 часов и сохраняется до 14 суток.

Ветеринарно-санитарная оценка и мероприятия. При возникшем подозрении на сибирскую язву дальнейший убой животных прекращают. От подозрительной туши берут часть селезенки, измененные части ткани и пораженные лимфатические узлы для микробиологического исследования. До получения результатов тушу и все органы изолируют в обособленное место.

При установлении микроскопией возбудителя сибирской язвы тушу со всеми органами и шкурой, не ожидая результатов бактериологических исследований, сжигают.

Все продукты, полученные от убоя других животных, смешанные с продуктами убоя от больных сибирской язвой, тоже сжигают. Шкуры здоровых животных, бывшие вместе со шкурой от животного, больного сибирской язвой подлежат дезинфекции в порядке, предусмотренном «Наставлением по дезинфекции сырья животного происхождения и предприятий по его заготовке, хранению и обработке».

После удаления сибиреязвенной туши и других продуктов убоя убойный цех немедленно дезинфицируют согласно инструкции о мероприятиях против сибирской язвы. Среди рабочих проводят экстренную профилактику против сибирской язвы в соответствии с инструкцией и методическим указанием по лабораторной и клинической диагностике, профилактике и лечению сибирской язвы у людей, утвержденной медицинской службой.

Другие туши и продукты убоя, подозреваемые в обсеменении возбудителем сибирской язвы по ходу технологического процесса, немедленно подвергают обезвреживанию путем проваривания, но не позднее чем через 6 ч с момента убоя: в открытых котлах – в течение 3 ч с начала закипания, в закрытых – при давлении пара 0,5 атм. – 2,5 ч. Если провести обезвреживание в указанный срок невозможно, эти туши изолируют в помещение с температурой не выше +10 ⁰С, а затем направляют на обезвреживание, как указано выше, но не позже чем через 48 ч с момента убоя. В противном случае все туши животных и субпродукты, подлежащие обезвреживанию, утилизируют или сжигают. Туши, обсеменение которых возбудителем сибирской язвы по ходу технологического процесса исключается, направляют на промпереработку.

При отрицательных результатах микробиологического исследования тушу и органы, подозреваемые в заражении сибирской язвой, оставляют в изоляции до получения заключения о результатах микробиологического исследования. Необходимость проведения других мероприятий в цехе определяет ветеринарный врач. Когда бактериологическое исследование подтвердит диагноз на сибирскую язву, санитарную оценку всех продуктов убоя проводят так же, как описано выше.

Убой на мясо животных, привитых против сибирской язвы вакцинами разрешается не ранее чем через 14 суток после прививки. Снятие шкур с животных, павших в период до истечения 14 суток после прививки противосибиреязвенной вакцины, не допускается.

Молоко от больных и подозрительных по заболеванию коров подлежит уничтожению после обезвреживания хлорной известью – с содержанием 25 % активного хлора (1 кг на 20 л молока), и 6 часовой выдержки. Молоко от животных, находящихся в эпизоотологическом очаге в течение 3-х дней после вакцинации, кипятят 4-5 минут и скармливают здесь же животным.