43.Комплексна оцінка імунного статусу організму. Діагностика імунопатологічних станів

Імунний статус людини -  це клінічний стан організму, а також кількісний та функціональний стан вроджених та адаптивних гуморальних і клітинних факторів імунітету. Стан імунної системи має найважливіше значення в забезпеченні гомеостазу організму, захисту від усього генетично чужорідного. Імунний статус визначає ефективність та узгодженість роботи всіх систем і ланок імунітету - макрофагів, комплементу, інтерферонів, Т-і В-лімфоцитів, головної системи гістосумісності. Показання для дослідження імунного статусу:  схильність до хронічних гнійно-септичних,  наявність пухлинних захворювань,  підозра на імунодефіцит,  здорові особи, які будуть працювати в екстримальних (шкідливих) умовах.  Для постановки діагнозу імунопатологічного стану проводять збір імунологічного анамнезу та проведення імунологічних тестів. Можуть також здійснюватися тести in vivo (шкірні тести), ретгенологічічне дослідження лімфоїдних органів (тимуса). Принципи оцінки імунного статусу:  Двохетапний принцип.  Поланковий принцип дослідження імунної системи (фагоцитарна, клітинна, гуморальна ланки) залежно від клінічного прояву імунодефіциту. Для оцінки загального імунного статусу використовують найпростіші і достовірні показники, що відображають сумарну ефективність роботи всіх систем імунітету, для вивчення ураженої ланки - специфічні для кожної системи диференціальні тести. Серед лабораторних методів, використовуваних в цілях иммунодиагностики, особливе місце займають:  1) методи, засновані на детектуванні клітин і молекул імунної системи за допомогою маркованих моноклональних антитіл (МАТ). В основі цих методів - отримання за допомогою гібридомної технології моноклональних антитіл до конкретних молекулам. Отримані моноклональні антитіла маркують флуорохромами, радіоактивним ізотопом або іншим способом і, використовуючи основну властивість антитіл - здатність зв'язуватися з антигеном, детектируют досліджувані молекули на окремих клітинах, біопсійних зразках тканин або в інших матеріалах. Для детекції зв'язування досліджуваної молекули з МАТ потрібно спеціальної обладнання: якщо МАТ марковане флуорохромами, то реєстрацію результатів здійснюють за допомогою люмінесцентного мікроскопа, але ефективніше - за допомогою проточного лазерного цитофлуориметр. Якщо МАТ марковані радіоактивним ізотопом, то результати реєструють за допомогою лічильників іонізуючого випромінювання, або із застосуванням авторадіографіі. Імуноферментний метод, метод іммуноелектронной мікроскопії, іммуноцітохіміі та імуногістохімії також відносяться до цієї групи методів. Впровадження цієї групи методів дозволило проводити іммунофенотіпірованіе для визначення належності клітин імунної системи до тієї чи іншої субпопуляції, а також проводити якісне та кількісне визначення практично будь-яких білкових молекул і гаптенов. Тому області застосування цієї групи методів далеко переступили межі иммунодиагностики і навіть медицини;  2) серологічний метод. Цей метод також застосовується на основі взаємодії антиген-антитіло, але в разі візуально детектіруемого взаємодії. Тобто в тих випадках, коли взаємодія антигену з антитілом проходить як специфічну, так і неспецифічну фазу, формуючи видимий неозброєним оком макромолекулярний комплекс у вигляді агглютіната або преципітатів (див. лекцію Антитіла). Цей метод переважно використовується для діагностики деяких інфекційних захворювань (для визначення рівня антигенспецифических антитіл або антигенів збудника), для визначення груп крові, а також для визначення С-реактивного білка і деяких інших прозапальних білків, що циркулюють у кровоносному руслі в достатньо високій концентрації. Серологічний метод простий, не вимагає спеціального обладнання, але поступається попередній групі методів в точності, відтворюваності, специфічності і роздільної здатності, тому поступово втрачає своє значення;  3) молекулярно-генетичні методи (полімеразна ланцюгова реакція - ПЛР, метод молекулярної гібридизації з використанням ДНК-, РНК-зондів, реакція секвенцірованія). В основі цих методів - дослідження окремих генів, детекція мутацій. Молекулярно-генетичні методи застосовують для підтвердження первинних (вроджених) імунодефіцитів, для визначення гаплотипу головного комплексу гістосумісності при виявленні ризику розвитку аутоімунних процесів, для виявлення в біологічному матеріалі геному мікроорганізмів та ін;  4) культурально-біологічні методи. Це також велика група методів, що припускають застосування в якості допоміжних реагентів клітин тварин (еритроцитів барана, наприклад), мікроорганізмів (для визначення фагоцитарної активності часто використовуються стафілококи, кандиди). Крім цього в процесі проведення дослідження застосовується культивування клітин імунної системи в лабораторних умовах. Зазвичай ця група методів застосовується для оцінки функціональної активності клітин імунної системи.