- •«Микробиология, вирусология, иммунология»
- •Раздел 1. Цели и задачи дисциплины «микробиология, вирусология, иммунология», ее место в учебном процессе
- •Раздел 2. Содержание дисциплины
- •3 Лекции продолжительностью по 2 час.
- •3 Занятия продолжительностью по 2 час.
- •Часть 1. Общая микробиология, вирусология, иммнология
- •Правила работы в лаборатории
- •Вопрос 3. Особенности работы с микроскопом, имеющим иммерсионный объектив. Ошибки при работе. Уход за микроскопом. Порядок действий при микроскопии
- •Ошибки при работе с микроскопом
- •Уход за микроскопом
- •Вопрос 4. Морфология бактерий
- •Вопрос 5. Техника приготовления мазков
- •Окраска по методу Бурри
- •Вопрос 7. Сложные методы окраски препаратов Окраска по Граму
- •Вопрос 8. Строение бактериальной клетки
- •Тема 2: Морфология актиномицетов, грибов, спирохет, вирусов и простейших.
- •Вопрос 2. Классификация и морфология спирохет: боррелии, трепонемы и лептоспиры. Классификация спирохет
- •Морфология спирохет
- •Вопрос 3. Классификация и строение риккетсий.
- •Вопрос 4. Классификация и строение хламидий.
- •Вопрос 5. Классификация и строение микоплазм.
- •Вопрос 6. Классификация грибов, их строение. Методы изучения. Классификация грибов
- •Ультраструктура грибов
- •Вопрос 7. Морфология вирусов
- •Вопрос 8. Классификация и строение простейших. Классификация простейших:
- •Ультраструктура простейших
- •Тема 3: Физиология микроорганизмов. Выделение чистых культур аэробных бактерий.
- •Вопрос 1. Питание бактерий
- •Вопрос 2. Питательные среды, их классификация.
- •Вопрос 3. Понятие о стерилизации, методы стерилизации.
- •Вопрос 4. Дыхание бактерий.
- •Вопрос 5. Ферменты микробов, их классификация
- •Вопрос 6. Принципы культивирования и идентификации бактерий:
- •Вопрос 7. Рост и размножение микроорганизмов на жидких и плотных питательных средах. Деление. Фазы развития бактериальной популяции. Рост и размножение бактерий
- •Виды роста бактерий на жидких и плотных питательных средах
- •Фаза развития бактериальной популяции
- •Вопрос 8. Этапы бактериологического исследования:
- •Вопрос 9. Методы выделения чистых культур аэробов:
- •Вопрос 10. Культивирование вирусов
- •Вопрос 11. Бактериофаги
- •Тема 4: Экология микроорганизмов
- •Теоретический материал для самоподготовки
- •Вопрос 1. Микрофлора почвы и методы ее изучения.
- •Вопрос 2. Микрофлора воды и методы ее изучения.
- •Вопрос 3. Микрофлора воздуха и методы ее изучения.
- •Вопрос 4. Естественная микрофлора тела человека, ее значение.
- •Состав нормальной микрофлоры
- •Вопрос 5. Эубиоз и дисбиоз.
- •Вопрос 6. Эубиотики.
- •Тема 5: Генетика микроорганизмов.
- •Вопрос 1. Организация генетического материала у бактерий.
- •Вопрос 2. Внехромосомные факторы наследственности: плазмиды, транспозоны, is-последовательности.
- •Вопрос 3. Модификации. R-s-диссоциации. Мутации. Мутагены. Репарации.
- •Вопрос 4. Генетические рекомбинации: конъюгация, трансформация, трансдукция.
- •Тема 6 : Учение об инфекции. Химиотерапевтические препараты. Антибиотики.
- •Вопрос 1. Инфекция. Условия возникновения и пути передачи возбудителя
- •Условия возникновения
- •Пути передачи:
- •Вопрос 2. Формы инфекции и их характеристика.
- •Вопрос 3. Периоды инфекционной болезни.
- •Вопрос 4. Характеристика бактериальных токсинов.
- •Вопрос 5. Антибиотики: классификация, применение, осложнения при приеме антибиотиков.
- •Вопрос 4. Методы определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам.
- •Вопрос 5. Важнейшие группы химиотерапевтических препаратов и механизмы их действия.
- •Тема 7: Иммунитет. Виды иммунитета.
- •Вопрос 1. Понятие об иммунитете. Виды и формы иммунитета.
- •Вопрос 2. Антигены. Основные свойства и строение антигенов.
- •Вопрос 3. Антигены микроорганизмов.
- •Вопрос 4. Антитела (иммуноглобулины).
- •Вопрос 5. Структура иммуноглобулинов. Свойства иммуноглобулинов.
- •Вопрос 6. Классы и типы иммуноглобулинов.
- •Тема 8: Реакции иммунитета, их практическое значение. Реакции агглютинации, преципитации, их виды и применение; реакции гемолиза и связывания комплемента. Иммунобиологические препараты.
- •Вопрос 1 . Реакция агглютинации и ее варианты
- •Вопрос 2. Реакция преципитации и ее виды.
- •Вопрос 3. Реакция гемолиза.
- •Вопрос 4. Реакция связывания комплемента.
- •Вопрос 5. Вакцины: классификация, применение.
- •Вопрос 6. Сыворотки и иммуноглобулины.
- •Часть 2. Частная микробиология, вирусология
- •Тема1 : Микробиологическая диагностика бактериальных инфекций верхних дыхательных путей.
- •Материал для теоретической подготовки
- •Вопрос 1. Стафилококки (род Staphylococcus)
- •Вопрос 2. Стрептококки (род Streptococcus)
- •Тема 2: Микробиологическая диагностика туберкулеза, дифтерии и коклюша.
- •Теоретический материал для самоподготовки
- •Вопрос 1. Микобактерии туберкулеза
- •Вопрос 2. Коринебактерии дифтерии Сorynebacterium diphtheriae (род Corynebacterium)
- •Вопрос 3. Bordetella pertussis - возбудитель коклюша
- •Тема 3: Микробиологическая диагностика раневых инфекций.
- •Теоретический материал для самоподготовки
- •Вопрос 1. Возбудитель столбняка - Clostridium tetani
- •Вопрос 2. Возбудители газовой гангрены – бактерии рода Clostridium Виды клостридий, вызывающие инфекцию: c.Perfringens, c. Novyi, c.Histolyticum, c.Septicum.
- •Тема 4: Микробиологическая диагностика инфекций, передающихся половым путем.
- •Теоретический материал для самоподготовки Вопрос 1.Neisseria gonorrhoeae (гонококки)
- •Вопрос 4. Возбудитель урогенитального хламидиоза – Chlamydia trachomatis
- •Тема 5: Микробиологическая диагностика бактериальных кишечных инфекций.
- •Теоретический материал для самоподготовки
- •Вопрос 1. Эшерихии (род Escherichia)
- •Вопрос 2. Сальмонеллы – род salmonella
- •Вопрос 3. Патогенез сальмонеллезов.
- •Вопрос 4. Возбудители дизентерии - шигеллы (род Shigella)
- •Вопрос 5. Возбудитель холеры – холерный вибрион (Vibrio cholerae)
- •Вопрос 6. Возбудители ботулизма (Clostridium botulinum)
- •Тема 6: Микробиологическая диагностика зоонозных инфекций.
- •Теоретический материал для самоподготовки
- •Вопрос 1. Бруцеллы (род Brucella) – возбудители бруцеллеза
- •Вопрос 3. Yersinia pestis – возбудитель чумы
- •Вопрос 4. Франциселлы (Francisella tularensis) – возбудители туляремии
- •Тема 7: Микробиологическая диагностика респираторных вирусных инфекций.
- •Теоретический материал для самоподготовки
- •Вопрос 1.Ортомиксовирусы (семейство Orthomyxoviridae) – вирус гриппа
- •Вопрос 2. Вирус кори (семейство Paramyxoviridae, род Morbillivirus)
- •Вопрос 3. Вирус краснухи (сем. Togaviridae)
- •Тема 8. Микробиологическая диагностика кишечных вирусных инфекций.
- •Теоретический материал для самоподготовки
- •Вопрос 1.Вирусы полиомиелита 1, 2, 3
- •Вопрос 2. Вирус гепатита а
- •Вирус гепатита е человека (семейство Caliciviridae)
- •Тема 9. Микробиологическая диагностика вирусных инфекций наружных покровов.
- •Теоретический материал для самоподготовки
- •Вопрос 2. Герпесвирусы (семейство Herpesviridae) Герпесвирусы (сем. Herpesviridae) - крупные оболочечные днк-содержащие вирусы.
- •Вопрос 3.
- •Вирусы гепатитов в, с, д Гепаднавирусы (семейство Hepadnaviridae)
- •Вирус гепатита c
- •Вирус гепатита d (hdv)
- •Раздел 3. Методическое обеспечение контроля знаний студентов
- •Раздел 4. Учебно-методическое обеспечение дисциплины
Вопрос 3. Патогенез сальмонеллезов.
Сальмонеллез – острая кишечная зоонозная инфекция, характеризующаяся поражением ЖКТ, может протекать в виде локальной, например, гастроэнтерит, или генеролизованной форме, например, тифободобная септикопиемия
Основной источник болезни - домашние животные (свиньи, крупный и мелкий рогатый скот и др.) и птицы (куры, гуси, утки и др.).
Механизм заражения - фекально-оральный. Основной путь передачи - пищевой: факторами передачи являются яйца птиц, мясо животных и птиц.
Факторы вирулентности: микрокапсула, белки наружной мембраны (адгезины), токсины: эндотоксин (липополисахарид клеточной стенки, нарушает функции нервной, сердечно-сосудистой и пищеварительной систем) и белковый энтеротоксин (нарушает водно-солевой обмен).
Инфицирующая доза: от 1 млн. до 100 млн. клеток.
Сальмонеллы адгезируются на энтероцитах тонкой кишки, инвазируют слизистую оболочку и проникают в подслизистую, размножаются в пейеровых бляшках и макрофагах, где формируют первичный очаг. Сальмонеллы выделяют токсины, которые обусловливают проявление клинических симптомов болезни: рвота, понос.
При нарушении барьерной функции лимфатического аппарата кишечника происходит генерализация процесса и возникает бактериемия, в результате чего сальмонеллы заносятся во внутренние органы.
Микробиологическая диагностика.
Бактериологический метод – основной метод диагностики:
Материал для исследования - рвотные массы, фекалии, промывные воды желудка.
Материал засевают на среду Эндо, на которой сальмонеллы образуют бледно-розовые колонии. Чистую культуру идентифицируют по биохимическим и антигенным свойствам. При идентификации выделенных культур необходим широкий набор диагностических O- и H-сывороток.
Лечение и профилактика. Для лечения и экстренной профилактики используют сальмонеллезные поливалентные бактериофаги. Антибиотики применяют только для лечения генерализованных форм. Для восстановления нормальной микрофлоры ЖКТ применяют эубиотики: бифидумбактерин, лактобактерин, колибактерин.
Вопрос 4. Возбудители дизентерии - шигеллы (род Shigella)
Род Shigella состоит из 4-х видов: S.dysenteriae (типовой вид), S.flexneri, S. boydii, S. sonnei, которые вызывают бактериальную дизентерию (шигеллез) - антропонозную кишечную инфекционную болезнь с преимущественным поражением толстой кишки.
Морфологические признаки.
Шигеллы - прямые грамотрицательные палочки с закругленными концами, спор и капсул не образуют. Неподвижны (не имеют жгутиков). Многие имеют пили.
Мазки из чистой культуры S.flexneri: Окраска по Граму
Культуральные признаки.
Факультативные анаэробы. Растут на простых питательных средах: на плотных образуют мелкие, гладкие, блестящие полупрозрачные колонии, на жидких – диффузный рост. Элективными средами являются селенитовый бульон и среда Плоскирева. S. Sonnei на плотных средах образует колонии S- и R-типа (диссоциация).
Антигенная структура. Шигеллы обладают соматическим О-антигеном, по которому 45 сероваров внутри видов S.dysenteriae, S.flexneri, S.boydii. У некоторых представителей обнаруживают К-антиген.
Биохимические признаки. Дифференциально-диагностическими признаками являются:
- отсутствие газообразования при ферментации глюкозы,
- отсутствие продукции сероводорода,
- отсутствие ферментации лактозы в течение 48 часов.
Факторы патогенности. Вирулентность шигелл связана:
- с плазмидой инвазии, которая имеется у всех шигелл. Плазмида детерминирует синтез Ipa BCD-инвазинов (invasion plasmide antigen) - белков, входящих в состав наружной мембраны, которые прикрепляются к апикальной мембране M-клеток; вызывают апоптоз фагоцитов, лизис мембран эукариотических клеток, обеспечивая внутриклеточное и межклеточное распространение шигелл.
- экзотоксином (шигатоксин), который вызывает повреждение эндотелия, поражение почек с гемолитическим уремическим синдромом, нарушения водно-солевого обмена и ЦНС.
- эндотоксином, который обуславливает общую интоксикацию и усиление перистальтики кишечника.
Резистентность:
Шигеллы устойчивы на бумаге и ткани около 1 мес, в высохших испражнениях –около 5 мес., в почве 3-4 мес, на овощах и фруктах – около 2 нед, в молоке – несколько недель.
Патогенез.
Шигеллы вызывают заболевание шигеллез (бактериальная дизентерия).
Источник инфекции: человек – больной или бактерионоситель.
Механизм заражения - фекально-оральный. Пути передачи: контактно-бытовой (S.dysenteriae), водный (S.flexneri), алиментарный (S. sonnei).
Входные ворота инфекции – слизистая оболочка толстой кишки.
Шигеллы прикрепляются к клеткам слизистой оболочки толстой кишки, проникают внутрь и размножаются. В подслизистом слое формируется воспалительный процесс, эпителий слизистой оболочки разрушается и развивается язвенный колит. Шигеллы продуцируют энтеротоксин, который поражает энтероциты, нейроны и клетки миокарда. При гибели шиигелл освопождается эндодоксин (липополисахарид клеточной стенки), который проникает в кровь и оказывает действие на нервную и сосудистую систему.
Инкубационный период: 1-7 сут
Клинические симптомы: вначале обильный жидкий стул, с примесью крови и гноя, лихорадка, боли в животе, затем количество выделений уменьшается, испражнения напоминают вареный картофель (слизь+кровь+гной)
Микробиологическая диагностика
Основной метод – бактериологический. Материал – испражнения.
Материал засевают на лактозо-содержащие среды (Плоскирева, Левина), отбирают неокрашенные колонии, выделяют чистую культуру и идентифицируют по биохимическим и антигенным свойствам, проводят внутривидовую идентификацию (определяют серовар), определяют чувствительность к антибиотикам.
При стертых формах перед забором материала проводят провокацию дизентерийной вакциной.
При затяжном течении дизентерии можно использовать серологический метод (реакцию непрямой гемагглютинации и реакцию агглютинации по типу реакции Видаля). Материал – сыворотка крови.
К методам экспресс диагностики относится реакция иммунофлуюресценции (РИФ). Из материала готовят мазки и обрабатывают флюоресцирующими антителами. В положительном случае обнаруживают светящиеся микроорганизмы.
Реакция иммунофлюоресценции
Лечение. Используют дизентерийный бактериофаг, фторхинолоны, антибиотики после определения антибиотикограммы; для коррекции микрофлоры пробиотики.
Специфическая профилактика. Дизентерийный поливалентный бактериофаг. Неспецифическая профилактика сводится к соблюдению правил личной гигиены, приготовления пищи, хранения пищевых продуктов.