Вопрос 2. Сальмонеллы – род salmonella
Морфологические и культуральные признаки.
Подвижные грамотрицательные палочки, спор не имеют, капсулу не образуют, некоторые виды имеют микрокапсулу.
Растут на простых питательных и желчесодержащих средах, на плотных средах образуют блестящие колонии S- и R-типа, на жидких средах – диффузный рост. На среде Эндо образуют бесцветные колонии. Факультативные анаэробы.
Мазок из чистой культуры S.typhi. Окраска по Граму.
Антигенная структура.
Сальмонеллы обладают О-, Н-, и некоторые К-антигенами. Разновидностью К-антигена у S. typhi, S. paratyphi A, S. paratyphi В является Vi-антиген. Согласно классификации Кауфмана-Уайта все сальмонеллы на основании О-антигена разделены на серогруппы, внутри серогорупп по Н-антигену – на серовары. Серогруппы обозначаются латинскими буквами: А, В, С и т.д, Внутри серогруппы серовары расположены в алфавитном порядке на основании видоспецифичкской фазы Н-антигена (Н-антиген состоит из 2-х фаз: первая – видоспецифичная, обозначается строчными буквами латинского алфавита, вторая – неспецифическая – обозначается цифрами).
Биохимические признаки.
По биохимическим свойствам род однороден. Дифференциально-диагностические признаки рода:
- ферментация глюкозы до кислоты и газа (за исключением Salmonella typhi),
- отсутствие ферментации лактозы,
- продукция сероводорода,
- отсутствие индолообразования.
Классификация.
Salmonella typhi – возбудитель брюшного тифа. Внутри вида выделяют фаговары A,B,C.
Salmonella paratyphi A – возбудитель паратифа А,
Salmonella paratyphi B – возбудитель паратифа В,
Salmonella typhimurium, Salmonella enteritidis, Salmonella cholirasuis – возбудители сальмонеллезов.
Патогенез брюшного тифа и паратифов.
Брюшной тиф - антропонозная инфекция, характеризующаяся язвенным поражением лимфатического аппарата тонкой кишки, бактериемией, интоксикацией, розеолезной сыпью, увеличением печени и селезенки.
Паратиф А и паратиф В – заболевания схожие с брюшным тифом по патогенезу, клиническим проявлениям и эпидемиологии.
Источник инфекции – больной или бактерионоситель, которые выделяют микроб с фекалиями, мочой, слюной. Особенно опасен носитель!
Основной механизм заражения - фекально-оральный. Основные пути передачи - водный, пищевой, редко - контактный.
Инфицирующая доза – 1000 клеток.
Входные ворота инфекции: слизистая оболочка тонкой кишки,
Факторы вирулентности: эндотоксин, каталаза, супероксиддисмутаза, белки наружной мембраны, микрокапсула.
После адгезии сальмонелл происходит частичная колонизация ими слизистой оболочки тонкой кишки и проникновение микробов в пейеровы бляшки – где формируется первичный очаг (микробы поглощаются макрофагами и размножаются в них). Затем сальмонеллы проникают в лимфоузлы, вызывая лимфаденит, и дальше – в лимфу, затем в кровь, вызывая бактериемию. С кровью сальмонеллы проникают в печень, легкие, костный мозг и селезенку, колонизируют их, заселяют желчный пузырь. С желчью сальмонеллы проникают в двенадцатиперстную кишку и вторично в тонкую кишку и пейеровы бляшки – развивается иммунное воспаление, в результате которого может развиться кишечное кровотечение, прободение стенки кишки и перитонит.
Микробиологическая диагностика.
Основной метод диагностики – бактериологический.
Материал:
- на первой неделе – кровь (метод выделения гемокультуры)
- со второй недели: моча (уринокультура), фекалии (копрокультура) желчь (биликультура).
Метод выделения гемокультуры: материал – кровь из вены – засевают на желчный бульон (элективная среда для патогенных сальмонелл) в соотношении 1:10. S. typhi, S. paratyphi A, S. paratyphi В на желчном бульоне дают диффузное помутнение. Выделяют чистую культуру и идентифицируют по биохимическим признакам, в реакции агглютинации на стекле. Для внутривидовой идентификации применяют фаготипирование.
Для обнаружения антигена возбудителя в биологических жидкостях применяют реакцию иммунофлюоресценции (РИФ).
Материал:
- на первой неделе – кровь (метод выделения гемокультуры)
- со второй недели: моча (уринокультура), фекалии (копрокультура) желчь (биликультура).
Готовят мазки из материала на стекле и обрабатывают флюоресцирующими сыворотками, препараты изучают под люминесцентным микроскопом. В положительном случае обнаруживают свечение.
Серологический метод обнаружения O- и H- антител в реакции непрямой гемагглютинации (РНГА), реакции агглютинации (РА) Видаля, реакции Vi-гемагглютинации.
Материал: сыворотка крови.
РНГА: в пробирках готовят разведения сыворотки крови, добавляют эритроцитарный брюшнотифозный О- или Н-диагностикум.
РА Видаля: берут 4 ряда пробирок и в каждом готовят разведения сыворотки больного. В пробирки первого ряда добавляют брюшнотифозный О-диагностикум, второго ряда – брюшнотифозный Н-диагностикум, третьего ряда – паратифозный А диагностикум и четвекртого – паратифозный В диагностикум. Диагностический титр в РА Видаля 1:200.
В этой реакции мы можем определить вид возбудителя, а в случае брюшного тифа и стадию болезни, т.к.О-антитела появляются на 1-й неделе, накапливаются в разгар заболевания и исчезают к моменту выздоровления. Н-антитела появляются в разгар заболевания, накапливаются к концу и сохраняются у переболевших в течение длительного времени. У людей, вакцинированных против брюшного тифа, РА Видаля также положительна. Чтобы отличить «инфекционный Видаль» от «прививочного» ставят РА Видаля с парными сыворотками. При инфекции титр Н-антител будет нарастать.
Реавкция непрямой Vi-гемагглютинации применяется при обследовании реконвалесцентов и выявлении бактерионосителей. Готовят разведения сыворотки больного от 1:10 до 1:1280 добавляют эритроцитарный Vi-диагностикум (взвесь эритроцитов человека, обработанных формалином и нагруженных Vi-антигеном . S. Typhi. Диагностический титр 1:40
Бактерионосителей выявляют по обнаружению Vi-антител в сыворотке крови с помощью РНГА и положительному результату бактериологического выделения возбудителя.
Лечение. Для лечения используют хлорамфеникол и другие антибиотики, действующие на грамотрицательные бактерии.
Специфическая профилактика. Существует брюшнотифозная химическая и брюшнотифозная спиртовая вакцина, обогащенная Vi-антигеном. Вакцинация проводится по эпидпоказаниям. Для экстренной профилактики брюшного тифа возможно использование брюшнотифозного бактериофага.