По сравнению с взрослыми

Активность всех факторов, кроме фибриногена, выражена в международных единицах на миллилитр (МЕ/мл) при условии, что в нормальной контрольной (пулированной) плазме активность факторов составляет 1 МЕ/мл, кроме протеина S, активность которого в среднем составляет 0.4 МЕ/мл. Вне скобок даны средние показате­ли, в скобках - минимальные и максимальные результаты 95% обследованных. Для всех показателей у детей исследовалось от 20 до 30 образцов плазмы; * - результаты, достоверно отличающиеся от аналогичных у взрослых (Andrew M, Vegh P, Johnston M, et al. Maturation of the hemostatic system during childhood. Blood 1992; 80: 1998-2005).

Приложение

Таблица 9

Референтные уровни результатов исследования фибринолитической системы здоровых детей в возрасте от 1 до 16 лет по сравнению с взрослыми

Единицы активности плазминогена исчислялись методом, рекомендованным Комитетом по тромболитичес-ким агентам. Уровень тканевого активатора плазминогена выражался в нанограммах на миллилитр. Актив­ность а₂-антиплазмина выражалась в международных единицах на миллилитр (МЕ/мл), при значении актив­ности в контрольной нормальной (пулированной) плазме, равном 1 МЕ/мл. Активность ингибитора актива­тора плазминогена-1 исчислялась в международных единицах на миллилитр плазмы, где 1 ME определялась как количество ИАП-1, которое ингибирует 1 ME человеческого одноцепочечного тканевого активатора плаз­миногена (Andrew M, Vegh P, Johnston M, et al. Maturation of the hemostatic system during childhood. Blood 1992; 80: 1998-2005).

Библиография

БИБЛИОГРАФИЯ

1. Балу да В, П., Балу да М.В., Голъдберг А. П. и др. Предтромботическое состояние // Тромбоз и его профилактика. М.-Амстердам: Зеркало-М, 1999.

2. Баркаган 3. С, Момот А.П. Основы диагностики нарушений гемостаза. М.: Ньюдиамед АО, 1999.

3. Баркаган 3. С, Суханова Г. А. Геморрагические мезенхимальные дисплазии: основные нарушения в системе гемостаза и принципы их коррекции // Консилиум. 2000. № 6 (16).

4. Насонов Е.Л., Баранов А.А., Шилкина Н.П. Васкулиты и васкулопатии. Ярославль: Верхняя Вол­ га, 1999.

5. Папаян Л.П. Новое в представлении процесса свертывания крови // Трансфузиология. 2004. Т. 5, № 3.С. 7-22.

6. Петрищева Н.Н., Папаян Л.П. Гемостаз. Физиологические механизмы, принципы диагностики основных форм геморрагических заболеваний: Учебное пособие. СПб., 1999.

7. Шевченко О.П., Олефиренко Г.А., Червякова Н.В. Гомоцистеин. М.: Реафарм, 2002.

8. Шитикова А. С. Тромбоцитарный гемостаз. СПб.: ГМУ, 2000.

9. Hemophilia. Editor E. Berntorp. 2004.

10. Hemostasis and Thrombosis. Basic Principles and Clinical Practice. Editors: Robert W. Colman and others. 2001.

11. Henry J.B. Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods. Twentieth Edition. W.B. Saun- ders Company, 2001.

12. Kasper Carol K. Von Willebrand disease. 2004.

13. Kolde H.-J. Haemostasis. Physiology, Pathology, Diagnostics. Pentapharm Ltd., Basel, 2001.

14. Nathan and Oski's Hematology of Infancy and Childhood. Sixth Edition. 2003.

15. Thomas L. Clinical Laboratory Diagnostics. Use and assessment of clinical laboratory results. TH- Books/Frankfurt/Main, Germany, 1998.

16. Lutze G. Useful Facts about Coagulation. Questions/Answers. Roche Diagnostics GmbH, Mannheim, 2004.

Содержание

СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ 3

ВВЕДЕНИЕ 5

ХАРАКТЕРИСТИКА СИСТЕМЫ ГЕМОСТАЗА .... 6 Общее представление о гемостазе, гемостатический баланс 6

СОСУДИСТАЯ СТЕНКА 8

Структура и функции сосудистой стенки 8

Эндотелий 9

Характеристика эндотелиального покрова 9

Антикоагулянтная активность интактного

эндотелия 10

Гликокаликс 10

Контроль активности тромбоцитов 11

Молекулярный каскад образования

простациклина и тромбоксана 12

Тромбомодулин 13

Прокоагулянтная роль эндотелия, регуляция

сосудистого тонуса 15

Роль эндотелия в регуляции сосудистого

тонуса 15

Субэндотелий 17

Тканевой фактор 18

Коллаген 18

ТРОМБОЦИТЫ 20

Тромбоцитопоэз 20

Жизненный цикл тромбоцитов 21

Структура тромбоцитов 22

Мембрана и цитоскелет тромбоцитов 23

Рецепторы мембраны тромбоцитов 24

Рецепторы для высокомолекулярных

белков 25

Интегрины 25

Рецепторы для физиологических

стимуляторов 27

Органеллы тромбоцитов 27

Тромбоцитарные факторы 28

Антигепариновый фактор тромбоцитов

(фактор 4 тромбоцитов, ф.4, PF4) 28

$-тромбоглобулин (β-ТГ, β-TG) 28

Фактор роста тромбоцитов (PDGF) 29

Фибриноген 29

Фактор V 29

Фактор XIII 29

Функция тромбоцитов 30

Адгезия тромбоцитов 30

Молекулы адгезии 31

Активация тромбоцитов 34

Агрегация тромбоцитов 36

Ретракция сгустка крови 37

РОЛЬ ЛЕЙКОЦИТОВ В ГЕМОСТАЗЕ 38

Участие нейтрофилов в пристеночном

тромбообразовании 38

Участие моноцитов в свертывании крови 39

ПЛАЗМЕННЫЕ БЕЛКИ ГЕМОСТАЗА 41

Система свертывания плазмы 42

Витамин-К-зависимые белки 44

Неферментные активаторы свертывания

крови 44

Классический коагуляционный каскад

активации тромбина 44

Внешний путь образования протромбиназы 45

Внутренний путь образования протромбиназы. Факторы

контактной активации 46

Конечный этап свертывания плазмы -

образование фибринового сгустка 48

Тромбин 48

Фактор XIII 49

Фибриноген. Формирование

гемостатического тромба 49

Роль кофакторов и микроокружения

в процессе свертывания крови 51

Роль кальция в гемостатических реакциях 51

Ингибиторы системы свертывания плазмы

крови 52

Ингибиторы ферментов системы гемостаза 52

Антитромбин и гепарин 53

Комплекс тромбин-антитромбин 54

Кофактор гепарина II 54

С1-ингибитор 54

а₂-макроглобулин 54

Ингибиторы коферментов 55

Система протеина С 55

Протеин С 55

Протеин S 56

С4-связывающий протеин 56

Ингибиторы активных комплексов 57

СИСТЕМА ФИБРИНОЛИЗА 59

Компоненты фибринолиза 59

Плазминоген 60

Активатор плазминогена тканевого типа 60

Урокиназный активатор плазминогена 61

Другие активаторы плазминогена 61

Механизм активации фибринолиза 61

Внутренний путь активации фибринолиза 62

Внешний путь активации фибринолиза 62

Ингибиторы фибринолиза 63

α₂-антиплазмин, α₂,-макроглобулин,

α₂ -антитрипсин 63

Содержание

Ингибиторы тканевого активатора

плазминогена (PAI) 64

Активируемый тромбином ингибитор

фибринолиза (TAFI) 64

Другие элементы системы фибринолиза 64

Лизис фибринового сгустка. Продукты

деградации фибрина/фибриногена и D-димеры 65

Плазмин-независимый фибринолиз 66

РЕОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ГЕМОСТАЗА 67

Особенности реологии крови 67

Функция тромбоцитов в различных

гемодинамических условиях 68

Влияние сил потока крови на процесс коагуляции... 69

Гемодинамическое воздействие

на функцию сосудистой стенки 69

СОВРЕМЕННАЯ ТЕОРИЯ СВЕРТЫВАНИЯ

КРОВИ 71

Каскадно-матричная теория свертывания крови 72

ОСОБЕННОСТИ ФИЗИОЛОГИИ И ИССЛЕДОВАНИЯ ГЕМОСТАЗА У ПЛОДОВ, НОВОРОЖДЕННЫХ

И ДЕТЕЙ РАННЕГО ВОЗРАСТА 75

Тромбоциты 75

Антикоагулянтные свойства сосудистой

стенки 76

Коагуляционное звено гемостаза 76

ОСОБЕННОСТИ ФИЗИОЛОГИИ И ИССЛЕДОВАНИЯ ГЕМОСТАЗА У ЖЕНЩИН ПРИ МЕНСТРУАЦИИ

И БЕРЕМЕННОСТИ 79

Менструальные кровотечения 79

Изменения гемостаза при беременности 79

ОБЕСПЕЧЕНИЕ ДИАГНОСТИКИ

НАРУШЕНИЙ ГЕМОСТАЗА В КДЛ 81

Общие подходы 81

Преаналитический этап 82

Взятие крови 82

Капиллярная кровь 82

Венозная кровь 83

Положение тела 85

Влияние физической нагрузки

и эмоционального стресса 85

Влияние пищи на показатели гемостаза 85

Интерферирующие лекарственные

препараты 86

Подбор антикоагулянтов 87

Сыворотка 89

Хранение и центрифугирование 89

Проверка исследуемых образцов

перед выполнением тестов 90

Тесты для оценки сосудистого и тромбоцитарного

компонентов гемостаза 90

Время кровотечения 90

Динамический анализ функции тромбоцитов 91

Тромбоцитарные показатели 92

Число тромбоцитов (Platelets, PL, PLT) 92

Средний объем тромбоцита (МР V) 92

Дисперсия распределения тромбоцитов

по объему (PDW) 92

Тромбоцитокрит (РСТ) 93

Агрегация тромбоцитов 93

Агрегация с АДФ 94

Агрегация с адреналином 94

Агрегация с тромбином 94

Агрегация с арахидонатом 95

Исследования агрегации тромбоцитов

в образцах цельной крови 96

Тромбоэластография 97

Молекулярно-биологические методы 99

Методические основы лабораторной оценки

плазменного гемостаза 99

Коагуляционные методы 99

Ручные методы 99

Автоматизированные коагулометры 100

Механические коагулометры 101

Оптико-механические коагулометры 101

Турбидиметрические коагулометры 101

Нефелометрические коагулометры 102

Амидолитические методы с использованием

хромогенных и флуорогенных субстратов 104

Иммунохимические методы 106

Латекс-агглютинация 106

Метод ELISA 106

Радиальная иммунодиффузия 107

«Ракетный» иммуноэлектрофорез 107

Скрининговые тесты оценки плазменного

звена гемостаза 107

Активированное частичное

тромбопластиновое время (АЧТВ) 109

Лабораторные условия, влияющие на АЧТВ 109

Диагностическое значение АЧТВ ПО

Выявление дефицита факторов

с использованием принципа заменных проб 111

Использование А ЧТВ для выявления

волчаночного антикоагулянта 112

Использование А ЧТВ для контроля

гепаринотерапии 113

Контроль за лечением низкомолекулярным

фракционированным гепарином 113

Контроль лечения гирудином 114

Скрининговый тест на основе А ЧТВ

для оценки антикоагулянтной активности

протеина С 115

Протромбиновое время 115

Протромбиновый тест (ПТ) по Квику 116

Протромбиновое время, выраженное через международное нормализованное

отношение (MHO) 117

Контроль за лечением непрямыми

антикоагулянтами 117

Ограничения использования MHO 117

Интерпретация результатов 117

Выявление дефицита факторов

с использованием принципа заменных проб

в тесте ПВ 117

Тромбиновое время 118

Рептилазное время (батроксобиновое время) .... 119

Отдельные факторы гемостаза 120

Референтные диапазоны содержания факторов ..120 Принцип дифференцирования истинного дефицита факторов и действия ингибиторов 122

Содержание

Определение фибриногена 123

Определение по Клауссу 123

Турбидиметрический метод 123

Иммунохимические методы 123

Интерпретация результатов 124

Определение фактора Виллебранда (vWF) 124

Определение фактора X с использованием

хромогенного субстрата 125

Определение фактора VIII с использованием

хромогенного субстрата 125

Определение фактора VII с использованием

хромогенного субстрата 126

Определение протромбина (фактора II)

с использованием хромогенного субстрата 127

Определение фактора XIII 127

Фотометрический метод 128

Инкорпорирующий метод 128

Тесты для определения гепарина 129

Определение гепарина с помощью

хромогенных субстратов 129

Определение гепарина с помощью

коагуляционных методов 129

Преаналитические факторы, влияющие на результаты определения

гепарина 130

Методы для определения резистентности к активированному протеину С, активности протеина S, антитромбина,

антифосфолипидных антител 130

Резистентность к протеину С 130

Тест резистентности фактора Va к А ПС

на основе модифицированного АЧТВ 131

Тест для диагностики фактора V Лейден 131

Определение протеина С 132

Определение протеина S 134

Определение антитромбина 135

Лабораторная диагностика антифосфолипидного синдрома

и волчаночного антикоагулянта 136

Определение антифосфолипидных

антител (АФА) 137

Тесты для исследования фибринолитической

системы 138

Спонтанный эуглобулиновый лизис 138

Определение плазминогена 139

Определение α₂-антиплазмина 139

Определение ингибитора активатора

плазминогена типа 1 (PAI-1) 140

Определение тканевого активатора

плазминогена (t-PA) 141

Тесты активации свертывания крови 142

Определение D-димеров 142

Продукты деградации

фибрина/фибриногена (ПДФ) 143

Тромбин-антитромбиновый

комплекс (ТАТ) 143

Фрагменты протромбина F1+2 143

Фибринопептид А (ФПА, FPA) 144

Растворимые фибрин-мономерные

комплексы (РФМК) 145

Паракоагуляционные тесты 145