Определение протеина s

Протеин S - витамин-К-зависимый белок, который является кофактором АПС. Эта функ­ция положена в основу всех известных коммер­ческих тест-систем определения протеина S. Опи­саны случаи как функционального, так и количе­ственного дефицита протеина S. При проведении тестов важно помнить, что протеин S присутству­ет в плазме частично в свободном состоянии, ча­стично в комплексе с С4-связывающим протеи­ном (С4-СП), но активна только свободная фор­ма протеина S.

Определение протеина S коагуляционным ме­тодом

Для определения протеина S необходимо использовать тест-систему, содержащую очищен­ный активный протеин С, его субстрат - фактор Va и дефицитную по протеину S плазму. После ин­кубации исследуемой плазмы с тест-системой определяют время свертывания, выполняя тест АЧТВ или индуцируя активацию змеиным ядом, фосфолипидами и Са²⁺ (рис. 117). Удлинение вре­мени свертывания пропорционально активности протеина S. Специфичность метода относитель­ная, так как фактор V Лейден, высокий уровень

ф.VIII и волчаночный антикоагулянт могут су­щественно влиять на результаты теста, а именно: с этими факторами часто проводят дифференци­альную диагностику, определяя протеин S. На результаты влияют качество дефицитной плазмы и препаратов АПС, а также состав фосфолипи-дов, поэтому значения теста зависят от конкрет­ного производителя. Так как коагуляционный метод подвержен действию многих интерфериру­ющих факторов и не стандартизован, то предпо­читают использовать иммунохимический метод для определения протеина S.

Определение протеина S иммунохимическим методом

Иммунохимический метод достаточно широ­ко распространен. Первая генерация тест-набо­ров определяла «общий протеин S», включая сво­бодную форму и форму протеина S, связанную с белком С4-СП. Наборы последних генераций позволяют определять «свободный протеин S» прямо без предварительной обработки. Чаще все­го используют турбидиметрический метод с по­листироловыми частицами или метод ELISA. Недостатком иммунохимического метода являет­ся то, что он выявляет протеолитически неактив­ные формы протеина S, которые иногда появля­ются в плазме.

Оценка результатов

Уменьшение содержания (активности) проте­ина S наблюдается при:

• врожденном (наследственном) дефиците;

• врожденном (наследственном) уменьшении свободной фракции протеина S;

• заболеваниях печени с нарушением синтети­ ческой функции;

• нефротическом синдроме;

• ДВС-синдроме;

Рис. 117. Принцип определения протеина S коагуляционным методом

Обеспечение диагностики нарушений гемостаза в КДЛ

• системной красной волчанке;

• лечении L-аспарагиназой;

• лечении пероральными (непрямыми) антико­ агулянтами;

• приеме эстрогенов (пероральных контрацеп­ тивов);

• беременности, в послеродовом периоде;

• наличии аутоантител к протеину S. Относительный дефицит протеина S наблю­ дается при повышении С4-СП. С4-СП - белок острой фазы, его количество повышается в плазме крови при воспалении, аутоиммунных реакциях, беременности, у женщин, принима­ ющих стероидные контрацептивы. С4-СП оп­ ределяют методом иммунотурбидиметрии или ELISA.