Определение прямого билирубина сыворотки крови

Ход работы. К 1 мл сыворотки крови прибавить 3,5 мл физраствора и 0,5 мл диазореактива. Через 5 минут полученную смесь помещают в кювету с толщиной 1 см и фотометрирует на ФЭКе при зеленом светофильтре против компенсационного раствора, содержащего 1 мл сыворотки, 3,5 мл физраствора и 0,5 мл воды. Норма: общий - 8,2-20,5 мкмоль/л или 0,5-0,9 мг% (75%-непрямой от общего билирубина);

прямой - 2,1-6,3 мкмоль/л;

непрямой -6,1- 14,2 мкмоль/л.

Клинико-диагностическое значение. Повышение концентрации билирубина в крови до 20 мг/л приводит к развитию желтухи. Боле высокий уровень билирубина в крови вызывает явление тяжелого отравления. В крови количество и соотношение между прямым и непрямым билирубином резко меняются при поражениях печени, селезенки, костного мозга, болезнях крови и т.д., поэтому определение обеих форм билирубина в крови имеет существенное значение в клинике при дифференциальной диагностике желтух различной этиологии.

Диагностика желтух

Таблица 1

Признак	Желтухи
	механическая	паренхиматозная	гемолитическая
Свободный билирубин крови	Не изменен	Незначительно повышен	Резко повышен
Связанный билирубин крови (глюкуронид)	Резко повышен	Значительно повышен	Незначительно повышен
Билирубин мочи (глюкуронид, прямой)	Значительно повышен	Незначительно повышен	Не изменен
Уробилиноген мочи	Не изменен или снижен	Значительно повышен	Резко повышен
Стеркобилин кала	Снижен	Снижен или тот же	Тот же

Проба Гмелина на желчные пигменты

Ход работы. В пробирку наливают 10 капель концентрированной азотной кислоты содержащей следы азотистой кислоты и осторожно, пипеткой наслаивают на нее исследуемую мочу (примерно 1 мл). При наличии в моче желчных пигментов на границе кислоты и мочи появляется слой цветных колец, возникающих в результате образования продуктов окисления билирубина. Особенно характерным является зеленое кольцо.

Диагностическое значение анализа. Увеличение содержания билирубина в крови (гипербилирубинемия) наблюдается при желтухах (гемолитической, обтурационной, печеночно-клеточной).

Проба Богомолова на уробилин

Ход работы. К 10-15 мл мочи прибавить 2-3 мл насыщенного раствора сульфата меди. Если получается помутнение от образовавшегося гидроксида меди, то прибавить несколько капель соляной кислоты до просветления раствора. Через 5 минут прибавить 2-3 мл хлороформа или толуола и взболтать.

Диагностическое значение анализа. Уробилин - продукт окисления бесцветного уробилиногена, в малых количествах выделяется с мочой (3, 2 мг). Определение концентрации желчных пигментов в моче имеет значение для дифференциации видов желтух: увеличение – гемолитическая желтуха, отсутствие - обтурационная желтуха.

Контрольные вопросы к теме биохимия печени

1. Роль печени в углеводном обмене.

2. Роль печени в липидном обмене.

3. Роль печени в белковом обмене.

4. Механизм детоксикации чужеродных веществ в печени.

5. Химический состав желчи.

6. Какие «защитные» синтезы протекают в печени?

7. Участие печени в обмене а) головного мозга; б) мышечной ткани; г) почек.

8. Как осуществляется распад гемоглобина в тканях?

9. Какие вещества называют желчными пигментами?

10. Напишите формулу билирубина. Что такое «прямой» и «непрямой» билирубин? Каковы их синонимы?

11. В каком организме происходит образование билирубинглюкуронидов? В чем биологический смысл этого процесса?

12. Напишите реакцию образования билирубин-диглюкуронида.

13. Каково содержание билирубина в сыворотке крови в норме?

14. Перечислите виды желтух. Лабораторная диагностика желтух.

15. Какие превращения происходят с билирубином в кишечнике?

16. Какие продукты превращения билирубина можно обнаружить в моче в норме и при патологии?