Качественный анализ

Проводят с очищенным спиртовым извлечением из растительного сырья.

Приготовление извлечения:

5 г измельченного сырья заливают 50 мл 80%-ного этилового спирта, настаивают 24 ч. Спирт отгоняют под вакуумом, водный остаток промывают в делительной воронке четыреххлористым углеродом 6 раз по 10 мл. Сердечные гликозиды извлекают смесью хлороформ — изопропиловьш спирт (3:1) 4 раза по 10 мл. К полученному извлечению добавляют 2 г безводного Na2SO4, дают постоять 3—5 мин, а затем отфильтровывают через бумажный фильтр.

Качественные реакции делятся на три группы:

• реакции на углеводную часть молекулы (2-дезоксисахара - реакция Келлер-Килиани);

• на стероидную структуру (реакция Либермана-Бухарда);

• на лактонное ненасыщенное кольцо.

Реакции на углеводную часть молекулы

1. Моносахара

После предварительного гидролиза вступают во все цветные реакции, свойственные углеводам (Феллинга, серебряного зеркала).

2. Дезоксисахара - реакция Келлер-Килиани:

Дезоксисахара в присутствии сульфата железа (III), ледяной уксусной кислоты и конц. серной образуют комплексы, окрашенные в синий или сине-зеленый цвет. Необходимое условие - отсутствие на конце углеводной цепи обычных сахаров (глюкозы).

Реакции на стероидную структуру

Основаны на способности стероидного ядра подвергаться дегидратации под действием кислотных реагентов (уксусный ангидрид, конц. серная кислота, трихлоруксусная кислота) с образованием окрашенных комплексных соединений.

1. Реакция Либермана — Бурхарда:

При взаимодействии СГ со смесью уксусного ангидрида и конц. серной кислотой появляется розовое окрашивание, переходящее в зеленое.

2. Реакция Розенгейма:

При взаимодействии СГ с 90% водным раствором трихлоруксусной кислоты появляется розовое окрашивание, переходящее в лиловое и затем в синее.

3. Реакция с хлоридом сурьмы (III).

СГ при взаимодействии с хлоридом сурьмы в среде уксусного ангидрида образуют лиловое окрашивание.

Реакции на лактонное кольцо

1. Реакция Балье.

При взаимодействии с пикриновой кислотой в щелочной среде СГ образуют комплексы, окрашенные в оранжевый цвет.

2. Реакция Кедде.

При взаимодействии с 3,5-динитробензойной кислотой СГ образуют комплексы, окрашенные в красный цвет,

3. Реакция Легаля.

При взаимодействии с нитропруссидом натрия в щелочной среде СГ образуют комплексы, окрашенные в красный цвет.

4. Реакция Раймонда. При взаимодействии с мета-динитробензолом СГ образуют комплексы, окрашенные в красно-фиолетовый цвет.

Достоверное заключение о присутствии СГ можно сделать только при положительном результате всех трех групп качественных реакций на различные части молекулы.

В ГФ XI на сырье наперстянок пурпурной и крупноцветковой, ландыша майского и горицвета весеннего качественных реакций не предусмотрено.

СГ образуют нерастворимые комплексы с растворами дубильных веществ, что используется при отравлениях СГ.

Количественный анализ

Проводят методом биологической стандартизации (ОФС.1.2.4.0009.15 Биологические методы оценки активности лекарственного растительного сырья и лекарственных препаратов).

Метод основан на способности СГ вызывать в токсических дозах остановку сердца животных в стадию систолы. В качестве подопытных животных используют лягушек, голубей или кошек. Чувствительность животных к сердечным гликозидам определяют в сравнении со стандартными индивидуальными веществами или экстрактами, которые вырабатывают в специальных научно-исследовательских институтах.

Активность выражают в единицах действия (ЕД), которые, в зависимости от вида животных обозначают: ЛЕД - «лягушачьи» ЕД, КЕД - «кошачьи» ЕД или ГЕД - голубиные ЕД.

ЛЕД соответствует наименьшей дозе стандартного препарата, вызывающей остановку сердца стандартной лягушки ( самец травяной лягушки массой 28-33 г). В нормативной документации на лекарственное сырье и препараты, содержащих СГ, обязательно указывается ВАЛОР (ЕД в 1 г сырья).

Недостатки: трудоемкость, высокая стоимость, большая ошибка опыта (до 25%).

Поэтому НД на некоторые виды сырья и препараты требует определять их количественное содержание физико-химическими методами (хроматофотоэлектроколориметрическим или хроматоспектрофотометрическим) методами. Они основаны на предварительном хроматографическом разделении СГ с последующим фотоэлектроколориметрическим или спектрофотометрическим определением.

Обзор ЛР и ЛРС, содержащих сердечные гликозиды

наперстянка пурпурная	Digitalis purpurea	Норичниковые (Scrophulariaceae)	листья	пурпуреагликозиды А и В, дигоксин	Кардиотоническое действие	Порошок, сухой экстракт, настой, Дигитоксин, Кордигит
наперстянка крупноцветковая	Digitalis grandiflora	Норичниковые (Scrophulariaceae)	листья	Дигиланиды А, В, С
наперстянка шерстистая	Digitalis lanata	Норичниковые (Scrophulariaceae)	листья	Дигиланиды (ланатозиды) А, В, С		Дигоксин, Целанид, Лантозид
адонис весенний	Adonis vernalis	Лютиковые (Ranunculaceae)	трава	К-строфантин-бета, адонитоксин	Кардиотонические действие; при бессоннице, эпилепсии	Адонисбром табл, микстура Бехтерева
ландыш майский	Convallaria majalis	Ландышевые (Convallariaceae)	цветки, листья, трава	конваллозид, конваллотоксин	Кардиотоническое действие	Коргликон, настойка, Конвафлавин
строфант Комбе	Strophanthus kombe	Кутровые (Apocynaceae)	семена	К-строфантозид	Кардиотоническое действие; при остром инфаркте миокарда	Строфантин К, Строфантидина ацетат
желтушник раскидистый	Erysimum diffusum	Капустные (Brassicaceae)	трава	эризимин, эризимозид	При ревматических пороках сердца, кардиосклерозе, стенокардии, вегетативных неврозах	Кардиовален

4. Общая характеристика сапонинов. Классификация, распространение и использование в медицине. Пути биосинтеза тритерпеновых и стероидных сапонинов. Химическая структура и физико-химические свойства сапонинов. Методы анализа сырья, содержащего сапонины. Использование физико-химических методов анализа для количественного определения сапонинов в сырье.

Сапонины (сапонизиды) - гетерозиды растительного происхождения, производные стероидов и тритерпеноидов, обладающие гемолитической и поверхностной активностью, а также токсичностью к холоднокровным животным.