Визначення масової частки білка методом формольного титрування

Метод можна використовувати для контролю масової частки білка в не консервованому молоці кислотністю не більше 22 °Т.

Суть методу. Метод формального титрування ґрунтується на реакції лужних аміногруп білка з формаліном, внаслідок якої вивільняються карбоксильні кислі групи білка При цьому підвищується титрована кислотність молока, за збільшенням якої визначають масову частку білка в молоці.

Прилади і реактиви. Піпетки прості на 20 і 50 см³ і градуйовані на 1 і 5 см стакани хімічні місткістю 150-200 см³, бюретка на 25 см³ з ціною поділки 0,1 см³ і бюретка місткістю 50 см³ з ціною поділки 0,1 см³; гумова груша; гідроксид натрію концентрацією 0,1 моль/дм³ і 40 % - вий розчин, розчин гідроксиду натрію готують на дистильованій воді без діоксиду вуглецю, спирт етиловий ректифікований, фенолфталеїн (2 % - ний спиртовий розчин), форма пні технічний; 2,5 % - ний водний розчин сульфату кобальту, х. ч. або ч. д. а, сульфіт натрію ч. д. а. або ч.; розчин сірчаної кислоти концентрацією 1 моль/дм³; вода дистильована.

Для визначення вмісту формальдегіду в технічному формаліні готують розчин сульфіту натрію 126 г сульфіту натрію кристалічного (Ма]80₃-7 Н₂0) або 63 г безводного сульфіту натрію (Каз80₃) розчиняють у мірній колбі місткістю 500 см³ і об'єм до мітки доводять дистильованою водою.

Розчин сульфіту натрію в кількості 50 см³ нейтралізують 1 моль/дм³ розчином сірчаної кислоти при наявності фенолфталеїну до світло-рожевого забарвлення і додають 3 см³ досліджуваного формаліну Гідроксид натрію, який утворився в результаті реакції, титрують 1 моль/дм³ розчином сірчаної кислоти до світло-рожевого забарвлення.

Кількість 1 моль/дм³ розчину сірчаної кислоти (см), яку витратили на титрування, показує кількість формальдегіду, який міститься в 100 см³ формаліну (г/100 см³).

Для визначення кількості білка в молоці допускається використовувати формалін з вмістом формальдегіду не менше 36 г на 100 см . При наявності каламуті або осаду розчин формаліну перед використанням фільтрують.

Формалін перед застосуванням нейтралізують: до 50 см³ формаліну додають 3-4 краплі 2 % - вого розчину фенолфталеїну і потім по краплях приливають спочатку 40 % - вий, а потім в кінці ОД моль/дм³ розчин гідроксиду натрію до появи слабо-рожевого забарвлення. Формалін, який залишився на наступний день, в разі необхідності додатково нейтралізують 0,1 моль/дм³ розчином гідроксиду натрію. Нейтраліза­цію формаліну, в якому утворився осад, проводять після фільтрування.

Вміст загальної кількості білка в молоці можна визначити також за даними таблиці 6.

Таблиця 6

Визначення вмісту білка в молоці при титруванні

Кількість 0,1 моль/дм3 розчину МаОН, см3	Масова частка білків у молоці, %	Кількість 0,1 моль/дм3 розчину №ОН, см3	Масова частка білків у молоці, %
2,45	2,35	3,3	3,16
2,5	2,4	3,35	3,21
2,55	2.44	3.4	3,25
2.6	2,49	3.45	3,31
2,65	2,54	3,5	3,35
2,7	2,59	3,55	3,4
2,75	2,64	3,6	3,45
2,8	2,69	3,65	3,5
2,85	2,73	3.7	3,55
2,9	2,78	3,75	3,6
2,95	2,83	3.8	3,65
3,0	2,88	3,85	3,69
3,05	2,93	3,9	3,74
3,1	2,98	3,95	3,79
3,15	3,03	4,0	3,84
3,2	3,07	4,05	3,89
3.25	3,12	4,1	3,94

Для приготування еталону забарвлення в хімічний стакан місткістю 150-200 см³ відміряють піпеткою 20 мл молока і додають 0,5 мл 2,5 % - го розчину сульфату кобальту Еталон використовують протягом зміни

Хід аналізу. В хімічний стакан на 150-200 см³ відміряють піпеткою 20 см³ молока і додають 0,25 см³ 2 % - ного розчину фенолфталеїну Суміш перемішують і титрують розчином гідроксиду натрію до появи слабо рожевого забарвлення відповідно до забарвлення еталону.

Потім у стакан вносять 4 см³ нейтралізованого 36-40 %-вого формаліну, перемішують суміш коловими рухами і через 1 хв. знову титрують до появи слабо рожевого забарвлення, яке визначають на білому фоні.

Масова частка (%) загальної кількості білків у молоці дорівнює кількості 0,1 ноль/дм³ розчину гідроксиду натрію, витраченого на нейтралізацію в присутності формаліну, помноженому на коефіцієнт 0,959.