Инструкция к практическому занятию Количественное определение мочевой кислоты в моче

Принцип метода. Метод основан на способности мочевой кислоты восстанавливать фосфорно–вольфрамовый реактив в фосфорно–вольфрамовую синюю, интенсивность окраски которой пропорциональна содержанию мочевой кислоты. Количество фосфорно–вольфрамовой синей определяется путем титрования красной кровяной солью К₃ [Fе(СN)₆]. Последняя окисляет фосфорно–вольфрамовую синюю и синее окрашивание исчезает.

Материальное обеспечение:моча, раствор карбоната натрия, фосфорно–вольфрамовыйо реактива Фолина, раствор К₃ [Fе(СN)₆], химические стаканы, бюретка.

Ход работы. К 1,5 мл мочи прибавляют 1 мл 20% раствора карбоната натрия и 1 мл фосфорно–вольфрамового реактива Фолина, перемешивают и титруют 0,01 н раствором

К₃ [Fе(СN)₆] до исчезновения синего окрашивания. Параллельно проводят такой же опыт со стандартным раствором мочевой кислоты.

Расчет: Содержание мочевой кислоты (в мг) в суточной моче вычисляют по формуле:

А х В

Х = 0,75--------- мг/сут; Х =

А_о х 1,5

где:

А-количество мл красной кровяной соли,израсходованное на титрование исследуемой мочи,

А_о-количество мл красной кровяной соли, пошедшее на титрование стандартного раствора мочевой кислоты,

0,75 – количество мл мочевой кислоты в стандартном растворе в мг,

В – объем суточной мочи в мл (1500мл).

Для пересчета результатов в системе “СИ” (ммоль/сут.) результат нужно умножить на коэффициент 0,0059.

Норма содержания мочевой кислоты в моче 1,6-3,5 ммоль/сут или 276-600 мг/сут.

ВЫВОДЫ:

Подпись преподавателя.

Приложение 1

Приложение 1

Граф логической структуры

ЗАПАСНОЙ ПУТЬ

СИНТЕЗА

СИНТЕЗ ИЗ ПРОСТЫХ ПРЕДШЕСТВЕННИКОВ (DENOVO)

ПУРИНОВЫЕ

НУКЛЕОТИДЫ

РАСПАД

МОЧЕВАЯ КИСЛОТА

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

В МОЧЕ

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ В ДИАГНОСТИКЕ

ПОДАГРА СИНДРОМ ЛЕША-НИХАНА

Тема 3.2. Исследование метаболизма пиримидиновых нуклеотидов. Исследование состава нуклеиновых кислот

Актуальность темы

Структурными компонентами нуклеиновых кислот- ДНК и РНК являются нуклеотиды пуринового и пиримидинового ряда. Скорость синтеза пиримидиновых нуклеотидов является объектом тонкой регуляции, которая может нарушаться при различных заболеваниях. Путь синтеза de novo позволяет синтетическим аналогам пиримидинов с антиканцерогенными свойствами включаться в состав ДНК, что имеет огромное значение в лечении онкологических больных. Эти знания будут необходимы при изучении разделов патофизиологии, патанатомии, фармакологии и онкологии.

Теперь ознакомьтесь с целями занятия

Общая цель

Уметь оценивать механизм синтеза пиримидиновых нуклеотидов и нуклеиновых кислот с целью понимания наследственной оротацидурии и механизма действия химиотерапевтических препаратов при опухолевых заболеваниях.

Конкретные цели: Цели исходного уровня

Уметь:

1. Интерпретировать процессы синтеза пиримидиновых нуклеотидов, их регуляцию.	1.Интерпретировать структуру пиримидиновых азотистых оснований (каф. медицинской и фарм. химии).
2. Интерпретировать процессы распада пиримидиновых нуклеотидов и их регуляцию.	2.Интерпретировать структуру нуклеиновых кислот (каф. медицинской и фарм. химии).
3. Объяснить нарушения пиримидинового обмена на молекулярном уровне.
4. Интерпретировать механизм действия противоопухолевых препаратов –ингибиторов синтеза нуклеотидов.

Для проверки исходного уровня Вас предлагается выполнить ряд заданий

Задание 1. В гидролизате дрожжей было открыто пиримидиновое основание урацил. Какую структуру имеет гетероцикл, входящий в его состав? Напишите его формулу.

А. 1,2 диазин

В. 1,3 диазин

С. 1,4 диазин.

Д. Пиридин

Е. Бензол

Задание 2. После гидролиза вещества, которое не обладало восстановительной активностью, образовались рибоза и этанол, причем раствор приобрел восстанавливающие свойства.

1. Какое соединение было подвергнуто гидролизу?

А. Сложный эфир.

В. Пептид

С. Гликозид

Д. Дисахарид

Е. Простой эфир

2. Что представляет собой это производное моносахаридов?

А. Восстановленная рибоза

В. Окисленная рибоза

С. Простой эфир за счет полуацетального гидроксила ( у первого атома С рибозы)

Д. Простой эфир за счет ОН- у пятого атома С

Е. Сложный эфир с фосфорной кислотой.

Правильность решения заданий проверьте, сопоставив их с эталонами ответов.

Эталоны ответов к решению заданий для самопроверки и самоконтроля исходного уровня знаний-умений:

1.-В, 2.1 – Е., 2.2 – С..

Информацию для восполнения исходного уровня можно найти в следующей литературе:

1. Тюкавкина Н.А.,Бауков Ю.И. Биоорганическая химия. -М.: “Медицина”, 1991. – С. 297-298, 302-304.

2.А.Я.Рево, В.В.Зеленкова «Малый практикум по органической химии».-«Высш. школа»,1980, С. 154-156.

3. Лекции по биоорганической химии.

Содержание обучения.

Содержание обучения должно обеспечивать достижение целей обучения, чему способствует граф логической структуры изучаемой темы (Приложение 1).