Инструкция к практическому занятию Работа №1 «Исследование состава сыворотки крови в разные сроки после приема пищи »

Принцип работы: в разные сроки после приема пищи значительно изменяется уровень гормонов и , как следствие, концентрация основних источников энергии в плазме крови (см. Приложение 1).

В плазме крови человека определите концентрации:

• глюкозы;

• общих липидов

• кетонових тел.

Используя приложение 1 проанализируйте полученные данные и определите фазу гомеостаза.

Материальное обеспечение:сыворотка крови, тест-полоски для определения глюкозы крови, раствор фосфованилиновой смеси, 10% раствор щелочи, раствор нитропруссида натрия, ледяная уксусная кислота,ФЭК.

Ход работы:

1. Определение содержания глюкозы в плазме крови по тест-полоске.

Опустите тест-полоску в пробирку с анализируемой плазмой крови и по шкале определите уровень глюкозы в плазме.

2. Определение содержания общих липидов плазмы.

В пробирку наливают 1 мл сыворотки крови и прибавляют 1 мл фосфованилиновой смеси. Тщательно перемешивают и оставляют на 5 минут при комнатной температуре. Интенсивность окраски определяется на ФЭКе с зеленым светофильтром. По калибровочной прямой находят содержание общих липидов в пробе и затем рассчитывают их концентрацию в г/л. Нормальное содержание общих липидов в сыворотке крови 3,5-8 г/л.

3. Качественная реакция на ацетон (проба Легаля)

Принцип работы. Ацетон и ацетоуксусная кислота в щелочной среде образуют с нитропруссидом натрия оранжево-красное окрашивание.

Ход работы. В пробирку наливают 5 капель мочи, 5 капель 10% раствора щелочи и 5 капель свежеприготовленного нитропруссида натрия. Появляется оранжево-красное окрашивание, которое после добавления 10 капель ледяной уксусной кислоты переходит в вишнево – красное окрашивание. Проба положительна при концентрации кетоновых тел в плазме более 1 ммоль/л

Клинико-диагностическое значение.

Гиперкетонемия и кетонурия наблюдаются при сахарном диабете, голодании, гиперпродукции гормонов – антагонистов инсулина.

Результаты:

Глюкоза –

Общие липиды-

Кетоновые тела- (< или > 1ммоль/л

ВЫВОД: Фаза голодания

Приложение1

Уровень гормонов и источников энергии в плазме крови в различные сроки после приема пищи.

Метаболиты	После еды	Время после приема пищи
		12 час	3 суток	3 недели

Инсулин/глюкагон	0,5	0,15	0,05	0,05
Глюкоза крови	6,1 ммоль/л	4,8	3,8	3,6
Аминокислоты	4,5 ммоль	4,5	4,5	3,1
Общие липиды	8 г/л	6г/л	6г/л	3,4г/л
Кетоновые тела	0,10 ммоль	0,2	2,0	8-10

Фазы гомеостаза глюкозы

Фаза	Происхождение	Ткани,	Основной
( время после еды)	глюкозы в крови	использующие	источник энергии
		глюкозу	для мозга
I ( 4 час )	Пища	Все	Глюкоза
II (8-16 час)	Гликоген	Все (мышечная и	Глюкоза
		жировая ткань в
		меньшей степени)
III (16-24 час)	Глюконеогенез	Все (мышечная,	Глюкоза
	(печень)	жировая ткани и
		печень в меньшей
		степени)
IV (1- 24 суток)	Глюконеогенез	Мозг, эритроциты,	Глюкоза, Кетоновые
	(печень и почки)	мозговое вещество	тела
		почек)
V ( 24-40 суток)	Глюконеогенез	Мозг в меньшей	Кетоновые тела,
	(печень и почки)	степени, эритроци-	глюкоза
		ты, мозговое веще-
		ство почек

Приложение 2

Межорганный метаболизм в различные сроки после приема пищи